粉針無(wú)菌分裝過(guò)程中影響粉針劑質(zhì)量的因素

陳娥，吳育利

(海南海藥實(shí)業(yè)發(fā)展股份有限公司，海南?？?70204)

·藥物與臨床·

粉針無(wú)菌分裝過(guò)程中影響粉針劑質(zhì)量的因素

陳娥，吳育利

(海南海藥實(shí)業(yè)發(fā)展股份有限公司，海南海口570204)

目的嚴(yán)格控制無(wú)菌分裝的整個(gè)環(huán)境過(guò)程，確保藥品產(chǎn)品質(zhì)量。方法針對(duì)影響抗生素粉針劑質(zhì)量的幾個(gè)環(huán)境因素包括壓差、溫濕度、微生物污染、塵埃粒子數(shù)、包裝材料進(jìn)行實(shí)驗(yàn)分析，總結(jié)這幾個(gè)因素對(duì)粉針劑質(zhì)量有何影響。結(jié)果超出所規(guī)定的指標(biāo)的各環(huán)境因素都會(huì)導(dǎo)致粉針半成品、成品質(zhì)量檢測(cè)不合格。結(jié)論應(yīng)該嚴(yán)格控制各項(xiàng)規(guī)定指標(biāo)，使其符合GMP要求。

粉針劑；壓差；溫濕度；微生物污染；包裝材料

注射用無(wú)菌粉末又稱(chēng)粉針。臨床前用滅菌注射用水溶解后注射，是一種較常用的注射劑，適用于在水中不穩(wěn)定的藥物，特別是對(duì)濕熱敏感的抗生素及生物技術(shù)藥物，本實(shí)驗(yàn)以注射用頭孢西丁鈉為例。

1 粉針質(zhì)量的環(huán)境因素分析

1.1 壓差、溫濕度、微生物污染、塵埃粒子、包裝材料對(duì)粉針的影響在亞潔凈狀態(tài)下做10批小樣對(duì)注射用頭孢西丁鈉粉針成品進(jìn)行考察，見(jiàn)表1。從表1中可看出所列舉的5個(gè)環(huán)境因素對(duì)粉針質(zhì)量都有影響，在亞潔凈狀態(tài)下做的10批小樣不合格率都超過(guò)了10%，檢測(cè)各因素對(duì)粉針質(zhì)量到底有何影響，將做如下的實(shí)驗(yàn)進(jìn)行具體分析。

表1 影響粉針成品不合格因素統(tǒng)計(jì)表

2 壓差對(duì)粉針質(zhì)量的影響

2.1 儀器與試劑微壓差表，GWF-5J微粒分析儀；注射用頭孢西丁鈉，硫酸肼，烏洛托品。

2.2 方法

2.2.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制稱(chēng)取硫酸肼1.00 g，置于100 ml量瓶中，加水適量使溶解，并用水稀釋至刻度，搖勻，放置4～6 h；取此溶液與等容量的10%烏洛托品溶液混合，搖勻，于25℃避光靜置24 h，取該溶液15.0 ml放100 ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，見(jiàn)表2。

表2 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制(ml)

2.2.2 壓差對(duì)粉針成品相關(guān)檢測(cè)結(jié)果的影響在風(fēng)量測(cè)定之后，將待測(cè)區(qū)域的所有門(mén)都關(guān)閉并開(kāi)啟房間中的排風(fēng)機(jī)或除塵機(jī)，通過(guò)墻壁上安裝的微壓差表讀出房間之間的壓差，然后再通過(guò)5次風(fēng)速、風(fēng)量的改變?cè)僦匦聹y(cè)定壓差，將5次不同壓差條件下生產(chǎn)的粉針小樣進(jìn)行溶液澄清度、可見(jiàn)異物和成品不容性微粒檢測(cè)[1]，結(jié)果見(jiàn)表3。從以上6組數(shù)據(jù)可看出壓差處于5.2 Pa以上的各項(xiàng)相關(guān)檢測(cè)均符合國(guó)家藥典標(biāo)準(zhǔn)，壓差在5.2 Pa以下的成品質(zhì)量不合格。

表3 壓差對(duì)粉針成品相關(guān)檢測(cè)結(jié)果的影響

3 溫濕度對(duì)粉針質(zhì)量的影響

3.1 儀器與試劑儀器：濕度計(jì)、溫度計(jì)；試劑：注射用頭孢西丁鈉。

3.2 方法通過(guò)空調(diào)系統(tǒng)調(diào)整潔凈室內(nèi)溫度，將在不同溫度下生產(chǎn)的粉針小樣作澄清度與粉末色澤檢查，結(jié)果見(jiàn)表4。通過(guò)車(chē)間空調(diào)凈化系統(tǒng)在潔凈生產(chǎn)區(qū)進(jìn)行6次調(diào)整，在風(fēng)量、風(fēng)壓調(diào)整后，在待測(cè)的房間有代表性的工作區(qū)或中心點(diǎn)，用濕度計(jì)讀出室內(nèi)相對(duì)濕度值，然后在6次不同濕度條件下，按照我國(guó)醫(yī)藥工業(yè)潔凈室(區(qū))浮游菌的測(cè)試方法GB/ T16293-1996、醫(yī)藥工業(yè)潔凈室(區(qū))沉降菌的測(cè)試方法GB/T16294-1996規(guī)定的方法測(cè)定。分別取膠塞、西林瓶(10 ml)5個(gè)按干燥失重法進(jìn)行檢查[2]，結(jié)果見(jiàn)表5。分裝半成品澄清度：溶液應(yīng)澄清，如混濁，應(yīng)小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)濁度液。由實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可看出，溫度為28℃以上時(shí)粉針半成品溶液澄清度已經(jīng)大于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)濁度液，粉末色澤開(kāi)始變黃；相對(duì)濕度為65%時(shí)，沉降菌已超出標(biāo)準(zhǔn)，膠塞、西林瓶水份及成品外觀(guān)檢測(cè)均不合格；溫度28℃以下，相對(duì)濕度為65%下時(shí)，成品檢測(cè)均合格。

表4 潔凈室溫度變化對(duì)粉針的影響

表5 潔凈室(區(qū))相對(duì)濕度對(duì)粉針的影響

4 微生物污染對(duì)粉針質(zhì)量的影響

4.1 培養(yǎng)基無(wú)菌性實(shí)驗(yàn)材料：TSB/SCDM培養(yǎng)基(即胰酶咯胨大豆培養(yǎng)基)、西林瓶。方法：將滅菌后的TSB/SCDM培養(yǎng)基分裝于50支西林瓶中，蓋塞、封口后在30℃～35℃恒溫培養(yǎng)一周。結(jié)果：西林瓶TSB/SCDM培養(yǎng)基中無(wú)任何微生物生長(zhǎng)，可用于培養(yǎng)基模擬粉針?lè)盅b試驗(yàn)。

4.2 培養(yǎng)基模擬粉針?lè)盅b試驗(yàn)為了使模擬分裝試驗(yàn)結(jié)果與實(shí)際生產(chǎn)狀況更接近，將模擬分裝試驗(yàn)的時(shí)間選擇在一次正常的批分裝生產(chǎn)后、區(qū)域熏蒸消毒之前。材料：乳糖(作模擬分裝用無(wú)菌粉末)、TSB/ SCDM培養(yǎng)基(經(jīng)無(wú)菌性試驗(yàn)檢驗(yàn)合格)、10 ml注射器、西林瓶、分裝樣品3 000瓶。方法：將1.0 g乳糖分裝到無(wú)菌西林瓶中，在用注射器將TSB/SCDM培養(yǎng)基8 ml注入瓶中，蓋膠塞，封鋁蓋，在30℃～35℃恒溫下進(jìn)行微生物培養(yǎng)一周。結(jié)果及計(jì)算：在實(shí)際工作中可根據(jù)模擬分裝中發(fā)現(xiàn)的污染瓶數(shù)、95%可信限控制上限進(jìn)行計(jì)算，見(jiàn)表6。根據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)概率計(jì)算方法，污染率計(jì)算公式為[3]：污染率%＝(95%可信限的控制上限/模擬分裝的瓶數(shù))×100%經(jīng)檢驗(yàn)，此次模擬分裝實(shí)驗(yàn)污染瓶數(shù)為1，查表得95%可信限的控制上限為4.743 9，因此(4.743 9/3 000)×100%＝0.16%＞0.1%。

4.3 結(jié)論此次模擬分裝并不符合污染率的可接受標(biāo)準(zhǔn)，證明微生物污染水平已超標(biāo)，則應(yīng)立即停止生產(chǎn)，對(duì)潔凈室進(jìn)行消毒滅菌。

表6 模擬分裝污染瓶數(shù)、95%可信限控制上限、至少分裝的瓶數(shù)的關(guān)系

5 塵埃粒子對(duì)粉針質(zhì)量的影響

將在某一萬(wàn)級(jí)潔凈生產(chǎn)區(qū)內(nèi)在六次不同狀態(tài)下測(cè)定塵埃粒子粒數(shù)[4]，然后將6種不同狀態(tài)下的小樣成品、半成品作抽樣檢查。

5.1 儀器與試劑塵埃粒子計(jì)數(shù)器試劑：注射用頭孢西丁鈉(1 g/瓶)、1號(hào)液、2號(hào)液。

5.2 方法在某一潔凈室內(nèi)，靜態(tài)。潔凈室溫度為25℃，潔凈室級(jí)別為萬(wàn)級(jí)，相對(duì)溫度為47%，靜壓差為14 Pa下進(jìn)行檢測(cè)塵埃粒子對(duì)粉針的影響。結(jié)果見(jiàn)表7。

表7 不同塵埃粒子數(shù)時(shí)粉針相關(guān)檢測(cè)結(jié)果

5.3 結(jié)論當(dāng)≥0.5 μm的塵埃粒子個(gè)數(shù)達(dá)到286 902個(gè)/m3時(shí)，出現(xiàn)西林瓶可見(jiàn)異物檢測(cè)不合格，而當(dāng)≥0.5 μm和≥5 μm的粒子都超出檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，成品質(zhì)量都不合格。

6 包裝材料對(duì)粉針質(zhì)量的影響

用天然膠塞、丁基膠塞作為瓶塞對(duì)頭孢西丁鈉等4種抗生素粉針劑質(zhì)量的影響進(jìn)行了研究。

6.1 膠塞的透氣性對(duì)粉針劑質(zhì)量的影響[5-6]注射用粉末多采用天然橡膠塞，如果膠塞不緊則水分透過(guò)膠塞，而導(dǎo)致產(chǎn)品吸潮變質(zhì)。近年來(lái)，人工合成的丁基膠塞開(kāi)始在市場(chǎng)出現(xiàn)，其透氣性比天然橡膠塞小十幾倍。實(shí)驗(yàn)在相同條件下，不同種膠塞密封性不同對(duì)粉針劑質(zhì)量的影響；用同一條件下洗滌、干燥滅菌的西林瓶，分裝同一批注射用頭孢西丁鈉，再分別蓋上丁基膠塞、天然膠塞壓蓋后不封蠟，放置在溫度40℃，相對(duì)濕度為75%～90%的環(huán)境中進(jìn)行對(duì)比實(shí)驗(yàn)，結(jié)果見(jiàn)表8。在相同條件下生產(chǎn)和貯存的粉針劑，使用天然膠塞的粉針劑外觀(guān)、水分、色級(jí)及含量四項(xiàng)指標(biāo)遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于使用丁基膠塞的粉針劑，所以現(xiàn)在一些廠(chǎng)家已用丁基膠塞代替天然橡膠塞。

表8 不同膠塞對(duì)粉針質(zhì)量的影響

6.2 膠塞、瓶子所含的水分程度對(duì)粉針劑質(zhì)量的影響以10批理化性質(zhì)較穩(wěn)定的天然膠塞做實(shí)驗(yàn)，測(cè)其吸水性，測(cè)試情況見(jiàn)表9。由表9對(duì)比分析，天然膠塞的吸水率明顯高于丁基膠塞，抗生素鈉鹽與鉀鹽均有吸濕性，入水后致使藥品失效，因此天然膠塞對(duì)粉針嚴(yán)密性有很大影響，以丁基膠塞替代天然膠塞已成為迫在眉睫的問(wèn)題。

表9 丁基膠塞和天然膠塞吸水率情況統(tǒng)計(jì)表(%)

6.3 壓蓋及封蠟嚴(yán)密性對(duì)粉針劑質(zhì)量的影響取相同條件下分裝的80萬(wàn)U注射用抗生素鈉為樣品，分鋁蓋不松動(dòng)沾蠟、鋁蓋松動(dòng)沾蠟、鋁蓋不松動(dòng)不沾蠟、鋁蓋松動(dòng)不沾蠟4種情況進(jìn)行考察(都使用天然膠塞)，每種情況取300支，放置在溫度40℃，相對(duì)濕度75%～90%的環(huán)境中，保存6個(gè)月，結(jié)果見(jiàn)表10。由表10可以看出，樣品在高溫、高濕的實(shí)驗(yàn)條件下貯存6個(gè)月，壓蓋及沾蠟嚴(yán)密度對(duì)粉針劑質(zhì)量有很大影響，鋁蓋松動(dòng)及不沾蠟(在生產(chǎn)過(guò)程中主要表現(xiàn)為漏蠟)都會(huì)引起粉針劑的結(jié)塊、變黃，并且使用天然膠塞時(shí)，不沾蠟比鋁蓋松動(dòng)對(duì)粉針劑質(zhì)量的影響更大。

表10 壓蓋及粘蠟嚴(yán)密度對(duì)粉針劑質(zhì)量的影響

7 討論

潔凈室內(nèi)相鄰不同的房間內(nèi)都存在壓差，因?yàn)閴翰罡綦x是防止?jié)崈羰覂?nèi)受到污染的一個(gè)重要手段，人員與物品的流動(dòng)都會(huì)造成污染。根據(jù)GMP規(guī)定，相鄰不同級(jí)別房間的壓差絕對(duì)值應(yīng)大于等于5 Pa(0.5 mm水柱)，由實(shí)驗(yàn)看出，壓差大于5 Pa時(shí)，相關(guān)檢測(cè)都符合中國(guó)藥典規(guī)定，但壓差＜6 Pa時(shí)，超出了本廠(chǎng)內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)(≥10 μm的粒子應(yīng)≥2 000個(gè)，≥25 μm的粒子應(yīng)少于等于200個(gè))，所以為了提高粉針的質(zhì)量，壓差維持在6.0 Pa以上能較好的控制成品的不溶性微粒。

無(wú)菌室溫度、濕度的控制不僅應(yīng)考慮防止微生物的生長(zhǎng)，而且還應(yīng)慮無(wú)菌室內(nèi)操作者工作條件的舒適狀況等。由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，溫度過(guò)高藥粉容易變黃，稀釋后溶液混濁，且人體易感悶熱，出汗，造成環(huán)境的污染。溫度過(guò)低人體易感寒冷。潔凈室相對(duì)濕度(HR)的高低同樣對(duì)藥品與人體兩方面都有影響，過(guò)低易產(chǎn)生靜電，人體舒適感差；過(guò)高易長(zhǎng)菌。所以，根據(jù)我國(guó)實(shí)際，冬夏溫、濕度要求都應(yīng)降低，全年溫、濕度應(yīng)在18℃～26℃與45%～60%范圍內(nèi)變化較合適，確保符合GMP要求。

評(píng)價(jià)無(wú)菌模擬分裝試驗(yàn)結(jié)果的主要指標(biāo)之一就是微生物污染水平，發(fā)達(dá)國(guó)家GMP一般明確要求控制生產(chǎn)各步的微生物污染水平，尤其對(duì)無(wú)菌制劑，產(chǎn)品最終滅菌或除菌過(guò)濾前的微生物水平必須嚴(yán)格控制。而微生物的特點(diǎn)是在一定的環(huán)境條件下會(huì)迅速繁殖，數(shù)量急劇增加，而且空氣中存在的微生物能通過(guò)各種途徑污染已清潔的設(shè)備。因此，為防止污染或降低污染發(fā)生的概率，在無(wú)菌室設(shè)計(jì)時(shí)應(yīng)該注意提供方便有效的無(wú)菌室消毒條件，而且每個(gè)無(wú)菌粉針劑生產(chǎn)企業(yè)均應(yīng)指定其無(wú)菌模擬分裝驗(yàn)證制度，以保證無(wú)菌粉針劑分裝工藝過(guò)程符合無(wú)菌粉針劑分裝要求。

潔凈室塵埃粒子數(shù)的多少對(duì)粉針成品不溶性微粒檢測(cè)結(jié)果有很大的影響，人員的數(shù)量、動(dòng)作幅度、走路的快慢等都會(huì)影響潔凈室的塵埃粒子數(shù)，因此，潔凈室應(yīng)控制熱源數(shù)量，且操作熱源的動(dòng)作應(yīng)緩慢、平穩(wěn)，應(yīng)盡量避免不必的動(dòng)作，減少產(chǎn)塵量。

在粉針生產(chǎn)過(guò)程中，膠塞的吸濕性及透氣性、壓蓋及沾蠟的嚴(yán)密度對(duì)粉針劑質(zhì)量的影響非常大，是引起粉針劑在有效期內(nèi)結(jié)塊、變黃的主要因素。如膠塞.瓶子水分偏高，其直接接觸藥粉而吸潮結(jié)塊，一般生產(chǎn)條件，應(yīng)控制膠塞水分≤0.05%，瓶子水分≤0.5 mg/只，另外包裝加紙盒，以保證藥品質(zhì)量。因此，為了保證產(chǎn)品質(zhì)量，保證人民用藥安全，我們必須嚴(yán)格控制生產(chǎn)過(guò)程中對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量有影響的各種因素。為了減少粉針劑有效期內(nèi)結(jié)塊、變黃情況的發(fā)生，應(yīng)保證生產(chǎn)中使用的膠塞彈性好，膠塞與西林瓶密封嚴(yán)，鋁蓋不松動(dòng)，封蠟均勻、嚴(yán)密。

[1]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典(二部)[Z].北京：化學(xué)工業(yè)出版社.2005

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R944.1+1

B

1003—6350（2012）18—086—04

10.3969/j.issn.1003-6350.2012.18.041

2012-06-26)

陳娥(1964—)，女，海南省東方市人，制藥工程師，本科。