血清學(xué)方法檢測(cè)肌肉注射Rho(D)免疫球蛋白初探

蔡于旭(海南省血液中心，海南海口570311)

血清學(xué)方法檢測(cè)肌肉注射Rho(D)免疫球蛋白初探

蔡于旭(海南省血液中心，海南?？?70311)

血清學(xué)方法；Rho(D)免疫球蛋白；Rho(D)陰性

1 病例簡(jiǎn)介

孕婦丁某，29歲，ABO血型為O型，Rho(D)陰性，曾產(chǎn)一胎，于2009年3月10日來我中心檢查血型抗體(孕第二胎，孕期20周)，孕婦血清未檢出抗D抗體，2 d后行羊水穿刺檢查唐氏綜合征，為了避免產(chǎn)生Rho(D)抗體，穿刺24 h內(nèi)注射1支Rho(D)免疫球蛋白(強(qiáng)生Rhogam，300 μg/1 500 IU)，1周后，抽取靜脈血，檢查血清抗D抗體。

2 血型血清學(xué)檢查

2.1 樣本孕婦注射Rho(D)免疫球蛋白前2 d EDTA抗凝全血3 ml，不抗凝全血10 ml；注射Rho(D)免疫球蛋白1周后不抗凝血10 ml。

2.2 試劑抗-A、抗-B試劑(20091222長(zhǎng)春博德生物技術(shù)有限責(zé)任公司)；抗-D試劑(20090729上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司、1905010 Biotest、BMC0702C Millipore)；ABO試劑紅細(xì)胞(20105308上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司)；譜紅細(xì)胞(20105604上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司)；抗IgG+C3d試劑(20090828上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司)；乙醚(分析純)。

2.3 方法均按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程[1]進(jìn)行。ABO血型鑒定用常規(guī)試管法檢測(cè)；Rho(D)陰性確認(rèn)用3種不同批號(hào)、不同廠家的抗-D試劑做抗球蛋白試驗(yàn)；血清和放散液抗體篩選鑒定選用抗球蛋白法檢測(cè)(反應(yīng)血清量增加為4滴)；抗體吸收放散試驗(yàn)：抗體吸收(5 ml血清+1 ml Rho(D)陽(yáng)性洗滌壓實(shí)紅細(xì)胞，37℃水浴1 h)，抗體乙醚放散(1 ml洗滌的抗體吸收紅細(xì)胞+1 ml鹽水+2 ml乙醚，顛倒搖勻10 min，離心，取下層作抗體篩選鑒定)，取孕婦注射Rho(D)免疫球蛋白前2 d血清作同步對(duì)照實(shí)驗(yàn)。

3 結(jié)果

3.1 血型鑒定結(jié)果孕婦注射Rho(D)免疫球蛋白2 d血液血型鑒定為ABO血型為O型，Rho(D)確認(rèn)陰性。

3.2 血型抗體篩選鑒定結(jié)果孕婦注射Rho(D)免疫球蛋白前2 d血清抗球蛋白法不規(guī)則抗篩選陰性(反應(yīng)血清量增加為4滴)；孕婦注射Rho(D)免疫球蛋白1周后血清常規(guī)不規(guī)則抗篩選陰性(反應(yīng)血清量為2滴)，當(dāng)把血清量增加為4滴時(shí)，可檢出抗-D特異性抗體；孕婦注射Rho(D)免疫球蛋白1周后血清與O型、Rho(D)陽(yáng)性紅細(xì)胞做抗體吸收放散試驗(yàn)，放散液可檢出抗-D特異性抗體(孕婦注射Rho(D)免疫球蛋白前2 d血清同步對(duì)照實(shí)驗(yàn)未檢出抗-D調(diào)抗體)。血型抗體鑒定結(jié)果見表1。

表1 孕婦血清及血清吸收放散液與譜紅細(xì)胞反應(yīng)格局

4 討論

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，孕婦丁某肌肉注射Rho(D)免疫球蛋白1周后，常規(guī)血清學(xué)方法未能檢出血清中的抗-D抗體，當(dāng)把血清量增加為4滴時(shí)，可檢出抗-D抗體，血清抗體吸收放散試驗(yàn)也證實(shí)抗-D特異性抗體的存在，比對(duì)注射前血清抗體情況，可以確定檢測(cè)到的抗-D特異性抗體為1周前注射的Rho(D)免疫球蛋白。

Rh(D)陰性婦女要避免Rho(D)不相合的血液輸注以及流產(chǎn)、刮宮等引起的“經(jīng)胎盤出血”產(chǎn)生的同種免疫[2]，而在“經(jīng)胎盤出血”72 h內(nèi)注射Rho(D)免疫球蛋白是避免發(fā)生同種免疫產(chǎn)生抗-D抗體的一種有效的方法[3]。肌肉注射Rho(D)免疫球蛋白后，通過增加反應(yīng)血清量，血清學(xué)方法也可檢出血清中注射的抗-D特異性抗體，為說明注射的有效性提供直接證據(jù)。因該抗D為被動(dòng)免疫獲得，半衰期短，所以，注射Rho(D)免疫球蛋白后血清中是否檢測(cè)出抗D及抗體的量與抽樣檢測(cè)時(shí)間有很大關(guān)系。

[1]葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜.血型血清學(xué)檢查[M]//全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程.3版.南京:東南大學(xué)出版社,2006:246-270.

[2]朱傳福,王玫.Rh(D)陰性孕產(chǎn)婦IgG抗體檢測(cè)分析[J].中國(guó)輸血雜志,2006,19(2):128-129.

[3]黃飛.靜脈注射Rho(D)免疫球蛋白可成功地防止Rh引起的同種免疫[J].國(guó)外醫(yī)學(xué)輸血及血液學(xué)分冊(cè),1999,22(4):276.

R446.11

A

1003—6350(2012)08—107—02

10.3969/j.issn.1003-6350.2012.08.050

2011-10-10)

蔡于旭(1976—)，男，海南省海口市人，技師，學(xué)士。

注射Rho(D)免疫球蛋白是Rho(D)陰性血型產(chǎn)婦在生產(chǎn)、流產(chǎn)或羊水穿刺后避免產(chǎn)生Rho(D)抗體的有效手段，筆者嘗試用常規(guī)血清學(xué)方法檢測(cè)孕婦血清中注射的Rho(D)免疫球蛋白，探討建立一種較為簡(jiǎn)單有效的協(xié)助診斷的檢測(cè)方法。