血清學方法檢測肌肉注射Rho(D)免疫球蛋白初探

蔡于旭(海南省血液中心，海南?？?70311)

血清學方法檢測肌肉注射Rho(D)免疫球蛋白初探

蔡于旭(海南省血液中心，海南?？?70311)

血清學方法；Rho(D)免疫球蛋白；Rho(D)陰性

1 病例簡介

孕婦丁某，29歲，ABO血型為O型，Rho(D)陰性，曾產一胎，于2009年3月10日來我中心檢查血型抗體(孕第二胎，孕期20周)，孕婦血清未檢出抗D抗體，2 d后行羊水穿刺檢查唐氏綜合征，為了避免產生Rho(D)抗體，穿刺24 h內注射1支Rho(D)免疫球蛋白(強生Rhogam，300 μg/1 500 IU)，1周后，抽取靜脈血，檢查血清抗D抗體。

2 血型血清學檢查

2.1 樣本孕婦注射Rho(D)免疫球蛋白前2 d EDTA抗凝全血3 ml，不抗凝全血10 ml；注射Rho(D)免疫球蛋白1周后不抗凝血10 ml。

2.2 試劑抗-A、抗-B試劑(20091222長春博德生物技術有限責任公司)；抗-D試劑(20090729上海血液生物醫藥有限責任公司、1905010 Biotest、BMC0702C Millipore)；ABO試劑紅細胞(20105308上海血液生物醫藥有限責任公司)；譜紅細胞(20105604上海血液生物醫藥有限責任公司)；抗IgG+C3d試劑(20090828上海血液生物醫藥有限責任公司)；乙醚(分析純)。

2.3 方法均按照相關標準操作規程[1]進行。ABO血型鑒定用常規試管法檢測；Rho(D)陰性確認用3種不同批號、不同廠家的抗-D試劑做抗球蛋白試驗；血清和放散液抗體篩選鑒定選用抗球蛋白法檢測(反應血清量增加為4滴)；抗體吸收放散試驗：抗體吸收(5 ml血清+1 ml Rho(D)陽性洗滌壓實紅細胞，37℃水浴1 h)，抗體乙醚放散(1 ml洗滌的抗體吸收紅細胞+1 ml鹽水+2 ml乙醚，顛倒搖勻10 min，離心，取下層作抗體篩選鑒定)，取孕婦注射Rho(D)免疫球蛋白前2 d血清作同步對照實驗。

3 結果

3.1 血型鑒定結果孕婦注射Rho(D)免疫球蛋白2 d血液血型鑒定為ABO血型為O型，Rho(D)確認陰性。

3.2 血型抗體篩選鑒定結果孕婦注射Rho(D)免疫球蛋白前2 d血清抗球蛋白法不規則抗篩選陰性(反應血清量增加為4滴)；孕婦注射Rho(D)免疫球蛋白1周后血清常規不規則抗篩選陰性(反應血清量為2滴)，當把血清量增加為4滴時，可檢出抗-D特異性抗體；孕婦注射Rho(D)免疫球蛋白1周后血清與O型、Rho(D)陽性紅細胞做抗體吸收放散試驗，放散液可檢出抗-D特異性抗體(孕婦注射Rho(D)免疫球蛋白前2 d血清同步對照實驗未檢出抗-D調抗體)。血型抗體鑒定結果見表1。

表1 孕婦血清及血清吸收放散液與譜紅細胞反應格局

4 討論

實驗結果表明，孕婦丁某肌肉注射Rho(D)免疫球蛋白1周后，常規血清學方法未能檢出血清中的抗-D抗體，當把血清量增加為4滴時，可檢出抗-D抗體，血清抗體吸收放散試驗也證實抗-D特異性抗體的存在，比對注射前血清抗體情況，可以確定檢測到的抗-D特異性抗體為1周前注射的Rho(D)免疫球蛋白。

Rh(D)陰性婦女要避免Rho(D)不相合的血液輸注以及流產、刮宮等引起的“經胎盤出血”產生的同種免疫[2]，而在“經胎盤出血”72 h內注射Rho(D)免疫球蛋白是避免發生同種免疫產生抗-D抗體的一種有效的方法[3]。肌肉注射Rho(D)免疫球蛋白后，通過增加反應血清量，血清學方法也可檢出血清中注射的抗-D特異性抗體，為說明注射的有效性提供直接證據。因該抗D為被動免疫獲得，半衰期短，所以，注射Rho(D)免疫球蛋白后血清中是否檢測出抗D及抗體的量與抽樣檢測時間有很大關系。

[1]葉應嫵,王毓三,申子瑜.血型血清學檢查[M]//全國臨床檢驗操作規程.3版.南京:東南大學出版社,2006:246-270.

[2]朱傳福,王玫.Rh(D)陰性孕產婦IgG抗體檢測分析[J].中國輸血雜志,2006,19(2):128-129.

[3]黃飛.靜脈注射Rho(D)免疫球蛋白可成功地防止Rh引起的同種免疫[J].國外醫學輸血及血液學分冊,1999,22(4):276.

R446.11

A

1003—6350(2012)08—107—02

10.3969/j.issn.1003-6350.2012.08.050

2011-10-10)

蔡于旭(1976—)，男，海南省?？谑腥?，技師，學士。

注射Rho(D)免疫球蛋白是Rho(D)陰性血型產婦在生產、流產或羊水穿刺后避免產生Rho(D)抗體的有效手段，筆者嘗試用常規血清學方法檢測孕婦血清中注射的Rho(D)免疫球蛋白，探討建立一種較為簡單有效的協助診斷的檢測方法。