CD3700血細(xì)胞分析儀復(fù)檢規(guī)則的建立與應(yīng)用評(píng)價(jià)

潘 婉，陳曉丹，李 霞，覃 西*

(1.海南醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，海南 海口 570102；2.海南醫(yī)學(xué)院熱帶醫(yī)學(xué)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)院，海南 海口 571101)

隨著各類型的血細(xì)胞分析儀廣泛應(yīng)用于臨床，全血細(xì)胞分析的精密度和檢驗(yàn)效率大大提高。但是，血細(xì)胞分析儀在形態(tài)學(xué)檢查方面只能作為一種過篩手段，遇到可疑情況仍需要人工進(jìn)行顯微鏡鏡檢[1-2]。目前國內(nèi)各級(jí)醫(yī)院實(shí)驗(yàn)室都有各自的復(fù)檢規(guī)則，但規(guī)則內(nèi)容不盡相同。2005年國際血液學(xué)復(fù)檢專家組通過對13 298份血標(biāo)本進(jìn)行詳細(xì)分析后，提出了41條自動(dòng)血細(xì)胞分析和分類復(fù)檢規(guī)則[3-4]。由于中國人群的血細(xì)胞分析參考范圍不同于西方人群，國內(nèi)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用該規(guī)則時(shí)存在一些問題，有必要制定適用我國人群的血細(xì)胞分析儀復(fù)檢規(guī)則。此外，由于不同廠家生產(chǎn)的血細(xì)胞分析儀的檢測原理、性能特點(diǎn)和測定參數(shù)不盡相同，也有必要結(jié)合儀器的自身特點(diǎn)而制定相應(yīng)的規(guī)則[5]。因此，我們參考國際血細(xì)胞分析儀復(fù)檢規(guī)則結(jié)合CD3700全自動(dòng)血細(xì)胞性能特點(diǎn)、檢測原理和測定參數(shù)，建立適合CD3700全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀使用的復(fù)檢規(guī)則。并根據(jù)儀器檢測結(jié)果和旗標(biāo)信息提示與顯微鏡結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，以評(píng)估制訂的規(guī)則。

1 資料與方法

1.1 儀器和試劑 CD3700全自動(dòng)血細(xì)胞分析及其配套試劑，校準(zhǔn)物由美國雅培公司提供，質(zhì)控物由美國伯樂公司提供；雙目生物顯微鏡購自日本奧林巴斯公司；瑞氏-姬姆薩染液按標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程自行配置。

1.2 標(biāo)本來源 隨機(jī)收集2011年4月份海南醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院門診及住院病人EDTA-K2抗凝靜脈血654份。

1.3 方法 所有標(biāo)本按臨床標(biāo)本的檢測流程和方法在采血后2 h內(nèi)進(jìn)行全血細(xì)胞分析儀檢測。每份標(biāo)本分別推制厚薄適宜的血涂片各兩張，按《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》[6]進(jìn)行瑞氏染色、沖洗、涼干用于血細(xì)胞形態(tài)學(xué)鏡檢分析和血細(xì)胞分類計(jì)數(shù)。顯微鏡鏡檢法采用雙盲法，在顯微鏡油鏡下，做全片觀察，記錄有無血細(xì)胞大小、形態(tài)、結(jié)構(gòu)異常；瘧疾等寄生蟲等情況。并分別計(jì)數(shù)兩張血涂片，按細(xì)胞形態(tài)特征分類計(jì)數(shù)100個(gè)白細(xì)胞，取平均值為靶值。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 根據(jù)設(shè)定的復(fù)檢方案，評(píng)估儀器檢測結(jié)果的真陽性、假陽性、真陰性、假陰性及與涂片鏡檢結(jié)果的符合性。真陽性為觸發(fā)了任意復(fù)檢規(guī)則，同時(shí)涂片鏡檢結(jié)果陽性；假陽性為觸發(fā)了任意復(fù)檢規(guī)則，但涂片鏡檢結(jié)果為陰性；真陰性為未觸發(fā)復(fù)檢規(guī)則，同時(shí)涂片鏡檢結(jié)果為陰性；假陰性為未觸發(fā)復(fù)檢規(guī)則，但涂片鏡檢結(jié)果為陽性。首先參考“41條”規(guī)則，再根據(jù)實(shí)際情況調(diào)整和優(yōu)化復(fù)檢方案，對儀器檢測結(jié)果的評(píng)價(jià)以真陽性率、假陽性率、符合率、復(fù)檢率及漏診率來表示，復(fù)檢率=真陽性率+假陽性率，漏診率=假陰性率，符合率指血細(xì)胞分析儀檢測結(jié)果與涂片鏡檢結(jié)果的一致性[7]。

2 結(jié)果

采用“41條”規(guī)則，通過對654份標(biāo)本進(jìn)行分析，CD3700全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀的假陰性即漏診率為1.8%(12/654)，真陽性率為24.9%(163/654)，假陽性率為 27.7%(181/654)，真陰性率為 45.6%(298/654)，符合率為70.5%(461/654)，復(fù)檢率為52.6%(344/654)，無血液惡性腫瘤漏診。

結(jié)合CD3700全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀的性能特點(diǎn)、檢測原理和測定參數(shù)，優(yōu)化“41條”規(guī)則，針對本科室的具體情況制訂出符合本科室使用的血細(xì)胞計(jì)數(shù)和分類復(fù)檢規(guī)則，見表1。對654份標(biāo)本進(jìn)行檢測和分析，其真陽性率為15.3%(100/654)，假陽性率為11.0%(72/654)，真陰性率為69.4%(454/654)，假陰性率即漏檢率上升為3.8%(25/654)，符合率為84.7%(554/654)，復(fù)檢率下降為26.3%(172/654)，無血液惡性腫瘤漏診。

表1 CD3700復(fù)檢規(guī)則

3 討 論

從結(jié)果中可發(fā)現(xiàn)如按“41條”進(jìn)行復(fù)檢的話，復(fù)檢率為52.6%，將會(huì)增加檢驗(yàn)科的工作量，而且有時(shí)候有的標(biāo)本不需要進(jìn)行復(fù)檢。因此結(jié)合CD3700全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀的性能特點(diǎn)、檢測原理和測定參數(shù)，優(yōu)化“41條”規(guī)則，針對本科室的具體情況制訂出CD3700全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀復(fù)檢規(guī)則如表1所示，其復(fù)檢率為26.3%，符合率高達(dá)84.7%，且無血液惡性腫瘤疾病漏診。

CD3700血細(xì)胞分析儀具有自動(dòng)化程度高、性能良好，檢測參數(shù)結(jié)果準(zhǔn)確可靠等優(yōu)點(diǎn)，充分利用其在快速、準(zhǔn)確進(jìn)行各類血細(xì)胞計(jì)數(shù)和對成熟的、特征明顯的白細(xì)胞分類方面的優(yōu)勢，及時(shí)篩選出大部分符合標(biāo)準(zhǔn)無需復(fù)檢的標(biāo)本，及時(shí)報(bào)告結(jié)果。但由于血細(xì)胞的多樣性和復(fù)雜性，特別是在病理情況下，儀器不能完全識(shí)別細(xì)胞而造成錯(cuò)誤的檢測結(jié)果。分析其假陰性樣本的分布情況，主要為異型淋巴細(xì)胞為16.7%(2/12)，血小板聚集為8.3%(1/12)，有核紅細(xì)胞為16.7%(2/12)，晚幼粒細(xì)胞為8.3%(1/12)，細(xì)胞形態(tài)異常50.0%(6/12)。為了避免假陰性，除急待儀器性能的進(jìn)一步提高，做好復(fù)檢復(fù)片工作的同時(shí)還應(yīng)不斷完善復(fù)檢規(guī)則。

CD3700血細(xì)胞分析儀為了不遺漏潛在的異常結(jié)果，儀器報(bào)警系統(tǒng)的靈敏度都調(diào)得很高，以旗標(biāo)進(jìn)行提示，提示操作者可能存在的形態(tài)異常、儀器無法識(shí)別的異常細(xì)胞和幼稚細(xì)胞，以及血小板聚集、細(xì)胞碎片、有核紅細(xì)胞等。然而過高的靈敏度引起可疑旗標(biāo)的增多，使復(fù)檢率居高不下。本實(shí)驗(yàn)檢測真陽性占總例數(shù)的15.2%，而假陽性率為11%，假陰性率即漏檢率為3.8%，低于國際標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)血液專家制定的5%的最大允許范圍。如完全按照儀器旗標(biāo)提示進(jìn)行顯微鏡復(fù)檢，不僅耗時(shí)費(fèi)力，而且沒有必要。按照“41條”規(guī)則，所選的654例標(biāo)本中，淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞分類異常報(bào)警的標(biāo)本有172例，在對這部分標(biāo)本進(jìn)行顯微鏡鏡檢分類時(shí)，發(fā)現(xiàn)只有20例標(biāo)本與儀器報(bào)警相符合，占總數(shù)的3.0%，即該大部分標(biāo)本為假陽性報(bào)警。因此，在白細(xì)胞計(jì)數(shù)正常且其他參數(shù)未異常的情況下，白細(xì)胞分類異常報(bào)警的標(biāo)本不需要復(fù)檢。異型淋巴細(xì)胞、有核紅細(xì)胞、原始細(xì)胞、桿狀細(xì)胞、未成熟粒細(xì)胞等的符合率都不高，其中有核紅細(xì)胞報(bào)警系統(tǒng)的靈敏度調(diào)得很高。在所選654例標(biāo)本中，有核紅細(xì)胞報(bào)警的標(biāo)本有284例，對這部分標(biāo)本進(jìn)行顯微鏡鏡檢，發(fā)現(xiàn)只有18份標(biāo)本與儀器報(bào)警相符合，占總數(shù)的2.7%。因此，在白細(xì)胞計(jì)數(shù)正常且未有其他參數(shù)報(bào)警的情況下，有核紅細(xì)胞單獨(dú)報(bào)警時(shí)，一般不進(jìn)行顯微鏡鏡檢，如伴有異型淋巴細(xì)胞、原始細(xì)胞、桿狀細(xì)胞、未成熟粒細(xì)胞等報(bào)警時(shí)，均需進(jìn)行顯微鏡鏡檢避免血液科疾病的漏診。高潔等[8]報(bào)道血細(xì)胞分析儀白細(xì)胞分類與人工分類不符的病例，目前的血細(xì)胞分析儀檢測血液細(xì)胞的方法與顯微鏡鏡檢觀察細(xì)胞形態(tài)的方法不同，還不能完全替代顯微鏡鏡檢。因此，血細(xì)胞分析儀檢測形態(tài)異常細(xì)胞時(shí)的作用仍然是篩選，對提示檢測結(jié)果異常的標(biāo)本仍應(yīng)按照操作規(guī)程認(rèn)真進(jìn)行顯微鏡鏡檢。

目前各種檔次的血細(xì)胞分析儀廣泛應(yīng)用于臨床，但均不能完全替代顯微鏡鏡檢，為了既保證血細(xì)胞分析儀的分析質(zhì)量，又能減少不必要的工作負(fù)擔(dān)，各臨床實(shí)驗(yàn)室有必要根據(jù)自己所用儀器的特點(diǎn)制定出合理的復(fù)檢規(guī)則。

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