波爾山羊腹腔內窺鏡鮮胚移植試驗

竇玉鳳 孫延星

（新疆生產建設兵團農五師獸醫站，博樂 833400）

胚胎移植技術是繼人工受精之后被廣泛采用繁殖新技術，可以充分發揮優秀母畜在家畜品種改良和群體擴繁中的最大潛力，有效縮短時代間隔，加快遺傳進展，并在品種資源保存上具有重要意義。近年來，全國許多地方都引進了波爾山羊，同時為了提高其繁殖效率相繼開展波爾山羊胚胎移植工作。本試驗使用了2種超排藥物對波爾山羊進行超排處理并運用“腹腔內窺鏡技術”進行沖卵和鮮胚移植。

1 材料與方法

1.1 供體和受體

供體為成年經產波爾山羊40只，年齡3～4歲。受體為當地成年經產山羊399只，年齡4～5歲。供、受體均健康無病。

1.2 藥物和器械

FSH：中國農科院畜牧所（批號：20020619）。

OVAGEN：新西蘭2001年生產。

LH：杭州市動物藥品廠（批號：020112）。

氯前列烯醇：上海市計劃生育科學研究所（批號：990629）。

PMSG：寧波市激素制品有限公司（批號：20020718）。羊用陰道海綿栓：每只含氟孕酮35mg。

羊用手術沖卵和移植器械：1套（新疆農墾科學院畜牧所研制）。腹腔內窺鏡：1臺（西德）。

體視顯微鏡：1臺（北京光學儀器廠）。

1.3 供體超排處理

供體羊隨機分5組，每組8只。1～4組羊放置陰道海綿栓后第12 d開始用FSH進行超排處理，每只羊按總劑量6份，分3 d隔12 h藥量遞減肌肉注射（1.5、1.5；1、1；0.5、0.5）mg，第14 d上午去栓，發情羊靜脈注射LH 100 U，采用自然交配至發情結束。第5組羊放置陰道海綿栓后第12 d開始用OVAGEN進行超排處理，每只羊按總劑量10mg分3 d間隔12 h藥量遞減肌肉注射（2、2；1.5、1.5；1、1）mg，第14 d上午去栓并肌注氯前列烯醇0.1mg，第15 d試情。發情羊采用自然交配至發情結束。

1.4 受體同期發情處理

受體羊隨機均分為5組，與供體同步放置海綿栓、同步去栓肌注PMSG500IU。第15 d試情，發情羊打號備用。

1.5 沖胚與移植

配種后第7 d，通過腹腔內窺鏡手術從子宮回收胚胎，在體視顯微鏡下檢出致密桑椹期與囊胚期的正常胚胎用腹腔內窺鏡手術進行鮮胚移植。

1.6 妊娠鑒定

受體移植20 d后開始試情，2個情期不返情者視為妊娠。

2 結果與分析

2.1 超排處理與胚胎回收

對40只成年經產波爾山羊進行超排處理，有2只未表現發情。共回收胚胎388枚，可用胚311枚，平均胚胎數10.21枚，平均可用胚數8.18枚。

2.2 受體羊同期發情

同期處理受體羊399只，發情320只，同期率80.20%。

2.3 不同藥物處理效果

FSH+LH處理供體32只，OVAGEN+氯前列烯醇處理供體8只，結果詳見表1。

表1 不同藥物超排效果統計表

OVAGEN+PG超排獲得平均胚胎數和可用胚數均略高于FSH+LH，但差異不顯著（P＞0.05）。

2.4 鮮胚移植

移植受體2 6 7只，其中雙胚4 4只。妊娠率5 6.1 8%（150/267）。

3 討論

（1）使用2種方法對供體羊進行超排處理，結果差異不顯著，但每頭份OVAGEN+氯前列烯醇價格高出FSH+LH近200元，因此用FSH+LH處理更為經濟合算。

（2）使用腹腔內窺鏡技術可以直接在腹腔內觀察到供、受體卵巢排卵情況，若供體羊卵巢上黃體數量小于4，或供、受體卵巢黃體發育不好，則無須進一步手術。同時在沖卵和移植手術過程中內窺鏡技術比傳統的小挑法手術切口小，無須將卵巢牽引出體外，因此對羊只傷害較輕，利于術后盡快恢復。

[1] 趙曉娥，武浩，權富生等.波爾山羊胚胎移植試驗研究[J].西北農業學報，2002，11（4）：92～94

[2] 郭志勤.家畜胚胎工程[M].北京：中國科學技術出版社，1998

[3] 桑潤滋.動物繁殖生物技術[M].北京：中國農業出版社，2002