三七皂苷對猴子上肢缺血再灌注的臨床應用

陳麗玲 劉汝文 劉宗平

（1.云南省昆明醫學院實驗動物學部，昆明 650031；2.江蘇省揚州大學獸醫學院，揚州 225009）

三七是五加科人參屬，從中提純的有效活性成分三七總皂苷（PNS），是我國傳統的珍貴藥材具。經過長期的探索三七皂苷（PNS）具有一定的中樞抑制、抗心律失常、抗心肌缺血、縮小心肌梗塞范圍、抗血小板聚集、阻止鈣離子內流、增加腦組織中SOD 的含量、對急性腦缺血的保護等作用；并且能增加血管血流量和降低其阻力，從而改善微循環[1]。臨床用于通脈活絡止血、活血、散瘀、消腫止痛之功效[2]。其藥理機制與抑制脂質過氧化反應、保護組織抗氧化能力、擴張血管、改善微循環、影響自由基生成等有關[3]。對肢體缺血-再灌注的損傷及其后遺癥有確切療效。臨床上局部組織器官缺血（ischemia），將會導致實質器官的損害，其損傷程度與缺血時間長短及殘存血流量的多少有關，短期不完全性缺血只引起可逆性損害，然而長時間的完全性缺血或嚴重缺血會導致梗死[4]。十多年來我們的籠養實驗猴前臂鉗在籠底板15例，缺血高達6h、水腫后無法伸縮。臨床中利用三七皂甙來改善血循環，特別在動物臨床上應用較少，作者用三七皂苷治療9例猴（獼猴5只，食蟹猴4只）前肢缺血再灌注，常規治療6例猴（獼猴3只，食蟹猴3只）前肢缺血再灌注，作用效果比較明顯，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

多年籠養實驗獼猴8只、食蟹猴7只SCXK（滇）2008-0001，共15例，前肢從籠底板伸出被卡住，缺血、水腫直徑超過1倍，無法縮回，用電鋸切開后拉出手臂。

藥品：三七皂苷，規格：0.6g（云南云科藥業有限公司）批號：060103；青霉素：哈藥集團制藥總廠，批號：C04110416，鹽酸普魯卡因注射液：（江西四環生物股份有限公司）

國藥準字H32023582 批號：080623；地塞米松磷酸鈉注射液：（天津金耀氨基酸有限公司）批號：0903031；肝素鈉注射液：（江蘇萬邦生化醫藥股份有限公司）國藥準字h32020612 批號：0104030

1.2 方法

拉出手臂，用繃帶扎住近心端，用肝素鈉從遠心端封閉，10 min慢慢松開繃帶，再用5%葡萄糖100 ml稀釋0.6 g三七皂苷靜脈滴注，連用3 d后，手臂完全恢復。另一組常規用藥未加三七皂苷，治療效果比較詳見表1。抽血涂片瑞士染色看用藥前后細胞凋亡情況。染色及判斷細胞：用瑞氏染色，凋亡細胞的染色質濃縮、邊緣化，核膜裂解、染色質分割成塊狀和凋亡小體等典型的凋亡形態凋亡細胞的體積變小、變形，細胞膜完整但出現發泡現象，細胞凋亡晚期可見凋亡小體。貼壁細胞出現皺縮、變圓、脫落。細胞凋亡過程中細胞核染色質的形態學改變分為3期：Ⅰ期的細胞核呈波紋狀（rippled）或呈折縫樣（creased），部分染色質出現濃縮狀態；Ⅱa期細胞核的染色質高度凝聚、邊緣化；Ⅱb期的細胞核裂解為碎塊[5]，所數細胞都屬第Ⅱb期產生凋亡小體細胞，凋亡率詳見表1。

表1 實驗動物藥效比較表

2 結果

用SPSS11.0軟件處理統計，結果詳見表1。從表中可以看出：三七總皂苷（PNS）對缺血-再灌注有明顯的保護作用，猴前肢主靜、動脈血管的無意阻斷時間超過2 h以上再灌注，用三七皂苷治療9只猴子，4 d治療后治愈5只，死亡1只；常規治療6只猴子，4 d后治愈2只，死亡2只，剖解見手臂水腫、淤血，潰爛、心肌有部分蒼白梗死區。治療組總有效率與對照組比較差異顯著（p＜0.05）。用三七皂苷治療的猴子取全血圖片觀察細胞凋亡核裂解率4%，常規用藥的凋亡率6%，三七皂苷治療組與常規組比較（p＞0.05），說明三七對細胞凋亡有一定保護作用。

3 討論

資料顯示大鼠腹主動脈阻斷后1 h肢體損傷程度輕，可恢復，阻斷大于1 h后各種指標變化幅度大，骨骼肌細胞損傷程度嚴重，可能會影響肢體功能，但經三七總皂苷（PNS）治療組再灌注后的損傷比非治療組輕[5]。維持這一反應進行的底物過氧化氫來源于中性粒細胞NADPH氧化酶，產生的超氧化物的歧化淋巴中性粒細胞參與骨骼肌、心臟、小腸、腦、肺等組織器官的缺血再灌注損傷過程[3]，依據：（l）粒細胞在缺血再灌注組織中積聚；（2）清除循環中性粒細胞可以大大減輕缺血再灌注微血管和實質細胞的功能障礙；（3）防止中性粒細胞激活和/或淋巴細胞-內皮細胞粘附的制劑可以有效的減輕缺血再灌注所致組織損傷[3]。激活的中性粒細胞和內皮細胞釋放的活性氧在缺血再灌注誘導的中性粒細胞聚集中起作用。毛細血管后靜脈暴露于外源性過氧化氫或超氧化物可以促進中性粒細胞-內皮細胞粘附，而且超氧化物歧化酶和過氧化氫酶均可抑制缺血再灌注后靜脈內的中性粒細胞粘附。三七皂苷（PNS），具有止血祛淤，止痛活血等多種療效。PNS在靜脈注射后濃度極高，在體內具有抗氧化和鈣通道阻滯樣作用。本臨床應用證實它對肢體缺血再灌流損傷有明顯保護作用，減少心、腦梗塞的出現。

[1]周小玲，李永偉，程建祥 三七總皂貳抗大鼠失血性休克及對腸系膜微循環的影響[J].廣西醫科大學學報，2000，23（4）：60-61

[2]唐旭東，姜建青，劉寶玉等三七總皂昔對心肌缺血再灌注損傷保護作用的分子機制[J].安徽中醫學院學報，2003，22（l）：34-38

[3]俞恩珠.三七總皂貳對心腦血管系統的藥理作用[J].浙江中西醫結合雜志，2000，10（4）：66-67

[4]肖敏，樊均明 三七總皂苷在腎間質纖維化中的藥理作用[J].中國臨床康復，2006，10（31）：139-141

[5]王東吉，武凡 三七皂甙單體Rb1 對大鼠腦缺血再灌注時腦細胞凋亡及cPLA2 蛋白表達的影響[J]中國康復醫學雜志，2007，5（5）：414-417