復合微生態制劑與氟苯尼考對肉雛雞免疫器官指數和組織變化的影響

張建梅 李 丹 徐海燕 辛國芹 汪官保 谷 巍

(山東寶來利來生物工程股份有限公司，山東泰安271000)

飼用抗生素的濫用嚴重干擾了整個養殖業的健康可持續發展。據統計，2007年美國有占生產總量70%的抗生素作為添加劑添加到飼料中。由于濫用飼用抗生素所造成的細菌耐藥性、農產品藥物殘留、疾病難防難控、大規模疫病群發和動物免疫力下降、疾病易感性上升等一系列問題引起了全球公共衛生組織的高度關注。2010年，世界衛生組織發出了“combat with drug resistance，no action today，no cure tomorrow”的呼吁，越來越多的發達國家和地區全面禁止了飼用抗生素的使用。然而在中國，由于現代畜牧業發展相對落后、養殖模式比較復雜、養殖戶認識不到位以及相關的立法和規章制度不成熟，導致中國廣大養殖戶對飼用抗生素的弊端缺少正確的認識，認為養殖離不開飼用抗生素，認為抗生素不但具有防病功能，還具有促生長的功效，忽視了飼用抗生素所帶來的弊端，導致疫病越來越嚴重，越來越難防控，結果進入“越用藥越厲害、越厲害越用藥”的惡性循環。

而今，越來越多的人錯誤地認為，預防疾病應該從幼齡動物開始,動物一出生就給它用開口藥清理凈化，這樣可以讓動物以后少得病，其實不然。幼齡動物一出生正是快速建立腸道菌群平衡、建立自身免疫系統的重要階段,而抗生素在這時使用,正是殺滅有益菌的元兇,會嚴重干擾幼齡動物腸道菌群平衡的建立。而越來越多的研究表明,抗生素的使用會抑制免疫器官的發育,降低免疫細胞的活性。因此，抗生素作為開口藥是不科學的。預防動物得病，必須從幼齡動物的生理特點出發，而增強幼齡動物的免疫力，提高其抗病力，通過啟動幼齡動物自身的免疫系統達到防病抗病的目的是首選。研究表明，益生素不僅具有促進營養物質消化吸收的功能，還具有增強免疫力和抗感染的功效。本研究以復合微生態制劑與飼用抗生素氟苯尼考在肉雛雞上進行試驗，以期為健康養殖業提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

飼用抗生素為市售氟苯尼考。

復合微生態制劑是由益生菌及其代謝產物、維生素A、維生素C、多種電解質、載體等成分組成。其中益生菌由乳酸菌和芽孢桿菌組成，活菌總數≥5×108cfu/g。

雞大腸桿菌O26為實驗室試驗自行分離鑒定后保存的菌株。

160只1日齡的黃羽肉雞，購自泰安市東岳種禽公司。全價飼料采用玉米-豆粕型飼糧，其配制參照NRC（1994），基礎飼糧組成及營養水平見表1。

1.2 試驗設計及飼養管理

將體重均勻、健康狀況基本相同的160只1日齡黃羽肉雞隨機分成4個組，每組2個重復，每個重復20只，分別為對照組（CK）、復合微生態制劑組（717）、氟苯尼考正常劑量組（FB1×組，氟苯尼考的添加量為3 g/20 kg水）、氟苯尼考10倍劑量組（FB 10×組，氟苯尼考的添加量為3 g/kg水），以不含抗生素的全價飼料為基礎日糧。717組按使用說明飲用產品，即：第1～4 d按0.1 g/只的量飲水添加，第5～7 d按0.2 g/只的量飲水添加；抗生素組每天分兩次飲用，每次3 h，連飲5 d。對照組自由飲水，各組皆自由采食，其它飼養條件相同。試驗期為9 d。

表1 基礎飼糧組成及營養水平（干物質基礎）

1.3 雞大腸桿菌O26的接種方法

雞大腸桿菌O26于肉湯培養基中，37℃、180 r/min，培養24 h，各組于出生后24 h口腔灌服接種雞大腸桿菌 O26（1×108cfu/只）。

1.4 樣品采集及檢測指標

1.4.1 免疫器官指數的測定

分別于3、6、9 d隨機選取各試驗組肉雛雞10只，心臟打氣法處死，立即解剖并分離脾臟和法氏囊，稱重，計算免疫器官指數。

免疫器官指數（mg/g）=免疫器官重量/活體重。

1.4.2 組織切片觀察病理變化

各組分別于9 d隨機選取肉仔雞10只，心臟打氣法處死，無菌分離小腸（回盲竇前后5 cm）、脾臟和法氏囊，bouin's液中保存，石蠟切片法，顯微照相法觀察組織病理變化。

1.5 數據處理

試驗數據采用SPSS13.0進行統計，采用One-way ANOVA進行方差分析，LSD法進行組間多重比較，結果均以“平均數±標準差”表示。

2 結果與分析

2.1 益生菌開口制劑和抗生素開口藥對肉雛雞免疫器官指數的影響

2.1.1 益生菌開口制劑和抗生素開口藥對肉雛雞脾臟指數的影響（見表2）

表2 復合微生態制劑和抗生素對肉雛雞脾臟指數的影響(mg/g)

由表2可知，3日齡717組脾臟指數最高，FB 1×組和FB 10×組均低于對照組和717組，但各組脾臟指數差異不顯著（P＞0.05）。隨著肉雛雞日齡的增加，脾臟迅速發育，6日齡時,各組脾臟指數均較3日齡時明顯提高，但各組之間仍然沒有表現出顯著差異(P＞0.05)。隨著抗生素和益生菌的不斷使用，9日齡時，FB 1×組和FB 10×組脾臟指數較6日齡分別降低27.4%和40%；對照組和717組脾臟指數較6日齡分別提高5.9%和5.4%，9日齡對照組和717組脾臟指數顯著高于 FB 1×組和 FB 10×組（P＜0.05），其中 717組脾臟指數最高，FB 10×組最低。

2.1.2 復合微生態制劑和抗生素對肉雛雞法氏囊指數的影響（見表3）

表3 復合微生態制劑和抗生素對肉雛雞法氏囊指數的影響(mg/g)

從表3可以看出，3日齡對照組法氏囊指數最高，FB 10×組最低，但各組脾臟指數差異不顯著 (P＞0.05)。6日齡時各試驗組法氏囊指數較3日齡均有所提高，對照組、717組、FB 1×組和FB 10×組較3日齡分別提高19.7%、27.6%、13.0%、21.2%，其中717組脾臟指數較3日齡提高最多，6日齡717組法氏囊指數分別高出對照組、FB 1×組和FB 10×組4.3%、23.0%和19.6%，其中717組與FB 1×組、FB 10×組相比差異顯著（P＜0.05）；9日齡時，717組法氏囊指數顯著高于其它 3 組(P＜0.05),分別高出對照組、FB 1×組和 FB 10×組14.4%、19.2%、25.9%，FB 10×組最低。

試驗結果表明,復合微生態制劑對肉雛雞免疫器官的發育有促進作用,尤其是對法氏囊指數的促進效果最明顯,但復合微生態制劑組與對照組相比脾臟指數差異不顯著,這可能與生長前期脾臟不是主要的免疫器官有關。飼用抗生素氟苯尼考作為開口藥對免疫器官的影響結果表明,飼用抗生素氟苯尼考開口藥對免疫器官的生長具有明顯的抑制作用,并且隨著飼喂時間的延長和飼喂劑量的增大,抑制效果越來越明顯。

2.2 益生菌開口制劑和抗生素開口藥對肉雛雞免疫器官組織變化的影響

2.2.1 益生菌開口制劑和抗生素開口藥對肉雛雞法氏囊組織的影響（見圖1）

法氏囊組織切片結果表明，空白對照組在感染大腸桿菌后，個別法氏囊小結髓質內的細胞有缺失和受損現象。與空白對照組相比，FB 1×組和FB 10×組對肉雛雞法氏囊的發育有明顯的抑制作用，使用氟苯尼考組法氏囊小結變得瘦長，淋巴細胞數量少、細胞排列疏松，皮質和髓質空隙變大，呈現出明顯的萎縮現象，并且FB 10×組較FB 1×組法氏囊受損更嚴重。復合微生態制劑組法氏囊小結較對照組和氟苯尼考組發育好，法氏囊小結比較飽滿，淋巴細胞排列均勻，皮質和髓質結合緊密。

圖1 益生菌開口制劑和抗生素開口藥對肉雛雞法氏囊組織的影響

2.2.2 益生菌開口制劑和抗生素開口藥對肉雛雞脾臟組織的影響（見圖2）

從脾臟的組織切片可以看出，對照組脾臟在感染大腸桿菌后，有一定的炎癥反應和少量的紅細胞滲出現象，而飼喂復合微生態制劑之后，這種現象得到明顯改善，脾臟內沒有明顯肉眼可見的散在紅細胞存在，淋巴細胞數量多且排列均勻。而飼喂氟苯尼考組，脾臟實質受到明顯的影響。

圖2 益生菌開口制劑和抗生素開口藥對肉雛雞脾臟組織的影響

正常劑量的氟苯尼考可見淋巴細胞明顯減少現象，同時有紅細胞滲出，而飼喂高劑量即10倍的氟苯尼考，則不僅有細胞的減少，還呈現出有大量的紅細胞滲出現象。

試驗結果表明，抗生素對肉雛雞免疫器官組織的影響比較明顯，能夠抑制法氏囊的正常發育，導致一些炎癥的發生，而復合微生態制劑與抗生素氟苯尼考相比，具有明顯的優勢，能夠促進免疫器官的正常發育。

3 討論

法氏囊是禽類特有的中樞免疫器官，能產生大量的漿細胞和各種特異性的B細胞，脾臟則是禽類最大的外周免疫器官，是產生抗體的主要器官，參與全身細胞免疫和體液免疫，免疫器官的發育狀況直接決定著機體的免疫水平。免疫器官指數相對增加，說明機體的免疫水平增強。張春揚等(2002)研究表明，益生菌制劑能顯著提高AA肉雞免疫器官的生長發育，28 d可分別提高脾臟、法氏囊指數18.47%、6.42%。本試驗中，9日齡時復合微生態制劑組的脾臟指數最高，與對照組相比差異不顯著，這可能與雛雞自身的免疫特點，即法氏囊在生長前期發揮主要的免疫功能有關。復合微生態制劑組脾臟指數與氟苯尼考正常劑量組和氟苯尼考10倍劑量組差異顯著（P＜0.05）。9日齡時法氏囊指數的變化與脾臟指數變化一致，復合微生態制劑組法氏囊指數顯著高于其它3組（P＜0.05），分別高出對照組、FB 1×組和 FB 10×組 14.4%、19.2%、25.9%，FB 10×組最低。抗生素對免疫系統的抑制作用也早已引起廣大學者的關注，本試驗更加證實飼用抗生素氟苯尼考的添加能夠引起脾臟和法氏囊的發育不良，而抗生素的不規范高劑量使用更是嚴重抑制了對肉雛雞免疫器官的發育，FB 10×組脾臟指數從3日齡到9日齡表現為先驟增后驟減的變化趨勢，說明高濃度的氟苯尼考可能先引起脾臟的水腫，之后可能引起脾臟的萎縮，而脾臟和法氏囊等免疫器官的不正常發育會使動物的免疫力降低，增加疾病的易感性。

因此，避免添加和使用抗生素，尤其避免不規范使用飼用抗生素，應該使用復合微生態制劑逐步取代飼用抗生素，回歸抗生素的治療功效，對提高動物的免疫性能、促進動物的健康水平意義重大。

4 結論

使用抗生素作為開口藥能夠顯著抑制脾臟和法氏囊的正常發育，降低免疫器官指數；抗生素使用的濃度越高，對肉雛雞免疫器官的抑制作用越明顯；在幼齡動物上使用復合微生態制劑與使用飼用抗生素相比，具有明顯的優勢，可以促進肉雛雞的免疫器官發育，防止免疫器官受損，增強肉雛雞的免疫力。

[1]張春揚，牛鐘相，常維山，等.益生菌劑對肉用仔雞的營養、免疫促進作用[J].中國預防獸醫學報,2002,24(1):51-54.

[2]馮國華，梁雪霞.益生素、寡聚糖在肉雞生產中對抗生素替代能力的研究[J].糧食與飼料工業,2000(8):30-31.