復方中草藥對西伯利亞鱘親魚血清生化指標的影響

齊 茜，劉曉勇，劉紅柏，張 穎，張永旺，張洪玉，彭 翔，孫大江

（1.中國水產科學研究院鱘魚繁育技術工程中心，北京 100070；2.中國水產科學研究院黑龍江水產研究所，哈爾濱 150070；3.中國水產科學研究院，北京 100141）

鱘魚屬亞冷水性魚類[1-2]。我國的鱘魚養殖業發展迅速，隨著養殖規模的擴大，夏季高溫季節親魚發病率升高，保護親魚安全度夏顯得尤為重要。中草藥相對于抗生素與化學藥物，具有毒副作用小、無殘留、安全性好、不會造成環境污染等特點，逐漸成為預防和治療動物疾病的理想選擇[3]。采用中草藥作為飼料添加劑增強鱘親魚免疫力和抗病力，最大限度地減少魚病發生，是生產綠色無公害水產品發展的需要，也是養殖戶為保證養殖效益經常采取的措施。現已發現200多種中草藥具有免疫促進作用[4]，關于中草藥促進鱘魚機體免疫力提高的研究較多，劉紅柏等針對施氏鱘(Acipenser schrenkii)進行多種復方及單方研究[5-8]，但此方面未見西伯利亞鱘的相關研究報道。本文基于生產實際，針對夏季養殖戶可能采取的鱘親魚疾病預防措施，以我國重要的繁殖養殖品種之一西伯利亞鱘（Acipenser baeri）為研究對象，初步研究常用清熱解毒類中草藥板藍根和甘草復方對西伯利亞鱘親魚血液生化指標的影響，旨在為高溫季節鱘親魚的疾病預防提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

實驗用中草藥來自北京鑫洋水產高新技術有限公司。健康非免疫狀態下的西伯利亞鱘親魚來自中國水產科學研究院鱘魚繁育技術工程中心，魚齡為7+齡，平均體重為9～11 kg。

1.2 方法

1.2.1 中草藥方劑及添加方式

復方中草藥由甘草和板藍根原材料微粉按照1:1的比例組成，以1%的劑量用520淀粉粘合劑添加入全價配合飼料，對照組投喂普通全價配合飼料。

1.2.2 試驗魚的養殖

試驗在生產條件下進行，試驗用池為4個半徑4 m的圓形水泥池，每組2個平行，每組120尾。養殖水源為河水、井水混合水，水溫25～28℃，pH 7.8。每天按魚體重的0.5%投喂，一天2次。試驗期為24 d。

1.2.3 樣品采集

投喂24 d后，分別在對照組和試驗組隨機挑選雌雄魚各6尾于尾動(靜)脈處采集肝素抗凝血，4℃下以3 500 r·min-1離心20 min，取血清。將血清立即置-40℃保存。

1.2.4 生化指標的檢測

白蛋白、溶菌酶、堿性磷酸酶、超氧化物歧化酶、丙二醛、過氧化氫酶、谷草轉氨酶和谷丙轉氨酶檢測采用南京建成生產的試劑盒，總膽固醇和甘油三脂檢測采用長春回力生產的試劑盒。

1.2.5 數據的統計處理

試驗數據采用SPSS11.5統計軟件中的單因子方差分析進行統計。

探索建立積極有效的質量標準研究激勵機制，充分調動和發揮藥品生產企業和科研機構的積極性，有效借助各方力量、鼓勵多方投資參與，加大藥品標準的研究力度，促進藥品標準提高和藥品質量提升。

2 結果與分析

2.1 死亡率

試驗期間，西伯利亞鱘親魚的死亡率為0。

2.2 中草藥對血清ALB、TG和CHOL含量影響

由表1可知，試驗組西伯利亞鱘雌、雄親魚血清ALB、CHOL和TG較對照組差異不顯著（P＞0.05）。

2.3 中草藥對血清LSZ及AKP活性變化影響

由表2可知，試驗組西伯利亞鱘雌、雄親魚血清溶菌酶和堿性磷酸酶較對照組顯著升高（P＜0.05），LSZ分別升高71.80%、459.28%，AKP升高62.61%、33.33%。

2.4 中草藥復方對血清MDA、SOD和CAT含量影響

由表3可知，試驗組西伯利亞鱘雌、雄親魚血清中SOD含量較對照組稍有降低，差異不顯著；血清MDA含量較對照顯著升高（P＜0.05）；血清CAT含量較對照組顯著降低（P＜0.05）。

表1 中草藥對血清白蛋白、甘油三酯和總膽固醇含量的影響Table 1 Effects of Chinese herb on the ALB、TG and CHOL contents in serum of Acipenser baeri

表2 中草藥對血清溶菌酶和堿性磷酸酶含量的影響Table 2 Effects of Chinese herb on the LSZ and AKP contents in serum of Acipenser baeri

表3 中草藥對血清丙二醛、超氧化物歧化酶及過氧化氫酶含量的影響Table 3 Effects of Chinese herb on the MDA、SOD and CAT contents in serum of Acipenser baeri

2.5 中草藥復方對血清GOT和GPT含量的影響

結果見表4。

由表4可知，試驗組雌、雄西伯利亞鱘親魚血清中的GOT和GPT較對照組顯著升高（P＜0.05），雄魚較對照組分別升高了144.79%、47.95%，雌魚較對照組分別提高了76.07%、18.20%。

表4 中草藥對血清谷草轉氨酶和谷丙轉氨酶含量的影響Table 4 Effects of Chinese herb on the GOT and GPT contents in serum of Acipenser baeri

3 討論與結論

生物體內血液生理指標與魚體的新陳代謝、營養狀況以及疾病有密切關系，當魚體受到外界因子影響而發生生理生化或病理變化時，必定會在血液生理生化指標中反映出來[9-10]。研究表明，板藍根含有吲哚類生物堿、芥子苷類化合物等化學成分，具有抗菌、抗病毒、抗內毒素、免疫促進等作用，甘草含有100多種化學成份，可以調和諸藥，具有抗炎癥、抗病毒、解毒等功效[11-12]。本試驗選取甘草和板藍根作為復方添加劑預防夏季疾病，結果顯示1%的甘草和板藍根對機體血液生化指標具有一定的調節作用。

3.1 中草藥復方對血清免疫指標的影響

溶菌酶在魚類的非特異性免疫中起著重要的作用，對革蘭氏陰性菌有強烈的殺菌作用[1]。本研究中，試驗組的溶菌酶較對照組顯著提高，在一定程度上增強了機體的免疫力，這與劉紅柏等對施氏鱘[7]、梁擁軍等對寶石鱸（Scortum barcoo）[14]、周顯清等對中華鱉（Pelodiscus sinensis）[15]研究一致，中草藥成份增強了細胞分泌溶菌酶的能力，進而提高了血清溶菌酶活力。堿性磷酸酶是高等動物體內巨噬細胞溶酶體的標志酶，在體內直接參與磷酸基團的轉移和代謝，是機體生長代謝，維持內環境穩定，維持機體健康所必需的酶，受營養狀況、環境變化、疾病及生長狀況的影響[16]。本研究中，試驗組堿性磷酸酶活性較對照組升高，進一步在一定程度說明受中草藥復方影響機體的免疫力提高。板藍根具有增強免疫力的作用[11]，因此本試驗中機體免疫力的提高可能主要與板藍根有關，具體機理需要進一步試驗驗證。

3.2 中草藥復方對血清抗氧化能力的影響

機體的抗氧化能力強弱與健康程度存在著密切關系。超氧化物歧化酶（SOD）能清除超氧陰離子自由基，保護細胞免受損傷，對機體的氧化與抗氧化水平起至關重要作用。丙二醛（MDA）是機體被自由基氧化后的產物。在正常生理狀態下，機體自由基的產生和清除處于動態平衡。因此，動態檢測SOD、MDA能比較準確地反映機體內自由基的代謝狀況，對判斷魚體健康狀況具有重要價值[14]。本試驗表明，試驗組西伯利亞鱘親魚血清的SOD均值較對照組降低，差異不顯著，MDA較對照組升高，差異顯著，二者在一定程度反映機體抗氧化能力的下降。

CAT廣泛存在于需氧微生物和動植物細胞中，在細胞內主要與線粒體及過氧化物結合，是一種與D-氨基酸氧化酶等一系列需氧脫氫酶相偶聯的酶，它能將細胞代謝產生的毒性物質分解為水和氧。在健康的魚體內，當CAT活性降低時，魚體內自由基過多，可破壞體內一些重要生化過程，導致代謝混亂[17]。本試驗中，CAT的含量較對照組顯著降低，這和MDA含量升高的結果一致，進一步說明機體的抗氧化能力下降。

3.3 中草藥復方對血清生化指標的影響

血漿中白蛋白、甘油三酯、總膽固醇等的含量反應機體營養和代謝狀態。有研究表明甘草具有減少甘油三酯積聚，降低膽固醇作用[11]。但是本試驗中，甘草和板藍根復方對西伯利亞鱘親魚血漿中白蛋白、甘油三酯和總膽固醇含量的影響不顯著，一方面可能和試驗周期及試驗品種的生長階段有關，另一方面可能和中草藥的使用方法有關，本實驗采用微粉直接添加，不利于有效藥物發揮作用，同時可能和鱘魚腸道較短有關，不利于有效藥物的吸收利用，具體機理需進一步單方試驗。

3.4 藥物副作用評價

谷丙轉氨酶（GPT）和谷草轉氨酶（GOT）等血清中的酶類主要分布于機體的肝和腎等組織細胞，在正常情況下，血清中這些酶活性低而且含量相對穩定，而患病魚血清中的含量則顯著高于健康魚。一般認為，這是病魚的肝、腎等組織受到損傷的表現[18-21]。本試驗中，試驗組這兩種酶較對照組相比顯著升高，與劉紅柏等對大黃加甘草的復方研究結果一致[9]，說明某些中藥會對肝功能產生負面影響，但是具體作用機理尚需進一步深入研究。這與吉紅等對黃芩素對鯉魚健康及生長的研究一致[22]。

綜上，中草藥并非絕對安全，其作用可能是雙向的，在增強免疫力的同時，也會給肝臟造成一定負擔。因此在使用中草藥時一定要慎重，以免使用不當造成危害。本試驗對于夏季鱘親魚疾病防控和生產指導具有重要意義。

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