三陰乳腺癌組織中p27、survivin的表達及臨床意義

(武漢科技大學附屬天佑醫院，武漢 434000)

三陰乳腺癌(TNBC)是指ER、PR、HER-2免疫組化標記均為陰性的乳腺癌［1］。2010年5月 ～2011年5月，我們采用免疫組化SP二部法檢測TNBC組織中 p27、survivin的表達情況，旨在兩者在TNBC發生、發展中的作用。

1 材料與方法

1.1 材料 選擇我院手術切除的TNBC組織標本(腫瘤組)56份(患者均為女性，年齡25～72歲，平均60.2歲，其中≤50歲20例);腫瘤直徑≤2 cm 32例，淋巴結轉移34例。按WHO乳腺臨床TNM分期標準(2003)，Ⅰ～Ⅱ期30例，Ⅲ～Ⅳ期26例。另選非特殊類型乳腺浸潤性導管癌(浸潤組)及良性乳腺增生癥(增生組)組織標本各56份作為對照。各組一般資料無統計學差異。p27、survivin抗體購于上海長島生物技術開發有限公司(即用型)。

1.2 p27、survivin表達檢測 采用SP二步法做免疫組化染色。所有操作按試劑盒說明書進行，采用已知陽性片做陽性對照，同時用磷酸鹽緩沖液(PBS)替代第一抗體作陰性對照。結果判定標準:采用雙盲法，所有病理切片均由兩位醫師進行評價，p27表達于細胞核，見圖1a;survivin表達于胞質，見圖1b。每張切片隨機觀察10個高倍視野(×200)，每個高倍視野計數100個癌細胞，計數陽性細胞百分數。按陽性細胞所占百分比記分:陽性細胞數＜10%為“－”，10% ～25%為“+”，25% ～50%為“++”，＞50%為“+++”。

圖1 p27、survivin在TNBC中的表達(SP×400)

1.3 統計學方法 采用SPSS11.5統計軟件，應用χ2檢驗及Spearman等級相關分析檢驗。檢驗水準α =0.05。

2 結果

2.1 p27、survivin表達 腫瘤組、浸潤組、增生組p27 陽性表達率分別為 41.1%、67.8%、91.1%，腫瘤組明顯低于其余兩組，浸潤組明顯低于增生組(P均 ＜0.01);survivin 陽性率分別為 69.6%、60.7%、5.3%，腫瘤組及浸潤組明顯高于增生組(P均＜0.01)。

2.2 p27、survivin表達與TNBC臨床病理參數的關系 見表1。

2.3 相關性分析 p27與survivin在TNBC中表達呈負相關關系(r= －0.401，P ＜0.01)。

3 討論

文獻報道，TNBC發病率占浸潤性乳腺癌的10% ～17%［1］，本研究 TNBC占浸潤性乳腺癌的10.5%，與文獻報道相近。

p27是Polyak等［2］在1994年發現的一種存在于細胞中的熱穩定蛋白原，人p27cDNA長594 bp，含198個氨基酸，相對分子質量27 kDa，是高度保守的蛋白分子。具有限制性調節細胞周期進程的作用，主要抑制細胞周期蛋白E-CDK2和D-CDK4等G1期激酶復合物，阻斷細胞S期增殖［3］。p27低表達可加速腫瘤細胞由G1期向S期轉化，腫瘤細胞合成增多，促進腫瘤發展。研究發現，p27蛋白的降低與乳腺癌的增殖、高級別以及ER、PR陰性的狀態密切相關［4，5］。p27存在于大多數哺乳動物白細胞中，組織中發現缺失、突變或重排的事件非常罕見。本研究腫瘤組p27陽性表達率明顯低于浸潤組及增生組，表明腫瘤惡性程度越高，p27的表達缺失的情況越普遍。本研究還發現，p27表達與TNBC患者年齡、腫瘤直徑、臨床分期及淋巴結轉移有關，說明p27表達的缺失與腫瘤的惡性程度及預后息息相關。

表1 p27、survivin表達與TNBC臨床病理參數的關系

survivin是凋亡抑制因子，具有抑制細胞凋亡、調節細胞分裂的雙重功能［6］。本研究腫瘤組 survivin明顯高于增生組，說明survivin發揮了抗凋亡的功能，使細胞失去了正常細胞增殖周期中凋亡檢驗點的限制，細胞分裂異常，造成癌細胞分裂增殖，形成原發腫瘤附近侵犯和遠處轉移灶的形成;同時survivin的異常表達還能促進腫瘤新生血管、淋巴管的形成，降低放、化療誘導的凋亡。這些因素直接導致survivin陽性表達者乳腺癌患者生存率降低。國內外許多研究表明，凋亡抑制因子survivin與多種腫瘤的預后密切相關［7］。TNBC中Notch1信號增強和survivin過度表達使腫瘤細胞分化降低，凋亡減少并易產生耐藥性，預后不良［8］。陳剛等［9］發現，在乳腺癌組織中survivin蛋白表達與臨床分期和淋巴結轉移有關。王麗等［10］發現，survivin在有淋巴結轉移乳腺癌組織中的表達明顯高于無淋巴結轉移者，而在其他臨床病例因素組中未見差異。毛杰等［11］、桑占發等［12］報道，survivin 的表達與腫瘤的臨床分期、淋巴結轉移呈正相關，也提示survivin陽性表達的乳腺癌患者預后不良。岳喜成等［13］指出，survivin的表達與stat-3的表達呈正相關關系(P＜0.05)。由于stat-3與survivin在乳腺癌表達的特異性，提示阻斷stat-3/survivin可以作為臨床不同分期的乳腺癌治療靶點［14］。本研究顯示，survivin與TNBC的患者年齡、腫瘤直徑有關。p27與survivin在TNBC中表達呈負相關關系，提示p27的低表達與survivin的高表達在TNBC的演進過程中起一致作用。

總之，p27、survivin的異常表達可能與TNBC的發生、發展及預后密切相關。

［1］皋嵐湘，楊光之，丁華野，等.基底細胞樣性浸潤性乳腺癌病理形態觀察［J］.中華病理學雜志，2008，37(2):83.

［2］Polyak K，Kato JK，Solom on MJ，et al.p27 Kip 1，a cyclin-Cdk inhibing links transforming growth factorbeta and contact inhibing to cell cycle arrest［J］.Genes Dev，1994，8(1):9-22.

［3］Bear HD，Aaderson S，Brown A，et al.The effect on tumor response of adding sequential preoperative docetaxel to preoperative doxorubicin and cyclophosphamide:preliminary results from National Surgical Adjuvant Breast and Bowel Project Procotol B-27［J］.J Clin Oncol，2003，21(22):4165.

［4］Barnes A，Pinder SE，Bell JA，et al.Expression of p27Kip1 in breast cancer and its prognostic significance［J］.Pathology，2003，201(3):451-459.

［5］Porter PL，Barlow WE，Yeh IT，et al.p27Kip1 and cyclin E expression and breast cancer survival after treatment with adjuvant chemotherapy［J］.Natl Cancer Inst，2006，98(23):1723-1731.

［6］Deveraux QL，Reed JC.IAP family protein-suppressiors of apoptosis［J］.Genes Dev，1999，13(3):239-252.

［7］Youssef NS，Hewedi IH，Abd Raboh NM，et al.Immunohistochemical expression of surviving in breast carcinoma:relationship with clinicopathological parameters，proliferation and molecular classification［J］.J Egypt Natl Canc Inst，2008，20(4):348-357.

［8］Dogu GG，Ozkan M，Ozturk F，et al.Triple-negtive breast cancer inmmunohistochemical correlation with basaloid markers and prognostic value of survivin ［J］.Med Oncol，2010，27(1):34-39.

［9］陳剛，周福祥，高霞，等.Survivin在乳腺癌中的表達及其與Caspase-3、PCNA 表達的關系［J］.實用腫瘤學雜志，2005，19(5):340-343.

［10］王麗，衛建平，李靈敏，等.浸潤性乳腺癌中TRAIL與Survivin的表達及意義［J］.山西醫科大學學報，2009，40(1):47-48.

［11］毛杰，海健，舒衡平，等.乳腺癌組織中Survivin、p53蛋白的表達與預后的關系［J］.中國普通外科雜志，2005，14(4):265-268.

［12］桑占發，王興，齊玉新，等.乳腺癌組織Survivin表達與細胞增殖的關系［J］.現代腫瘤醫學，2009，17(8):1479-1481.

［13］岳喜成，李德群.Stat-3與Survivin在乳腺癌中的表達與意義［J］.蚌埠醫學院學報，2009，34(7):585-587.

［14］Nam S，Buettner R，Turkson J，et al.Indinubin derivatives inhibit Stat3 signaling and induce apoptosis in human cancer cells［J］.Proc Natl Acad Sci，2005，102(17):5998-6003.