火焰原子吸收光譜法測定兒童全血中鐵、鋅、鈣的含量

譚 昆 王書安 胡 焰 劉衛東 王 健

徐州市醫學科學研究所，江蘇 徐州 221006

微量元素是占人體總重量的1/10000以下，每人每日需要量在100 mg以下的元素。其含量雖微，但對機體代謝起著極其重要的作用。嬰幼兒微量元素缺乏對智力、免疫功能、生長發育等有較大影響[1-2]。目前，我國嬰幼兒微量元素缺乏較為普遍。王冬蓮等[3]研究表明臺州地區兒童微量元素缺鐵達到17.5%，缺鋅達到32%，缺鈣達到29.6%。火焰原子吸收光譜法測定微量元素直接采集末梢血稀釋、測定，結果準確、可靠，適用于臨床檢驗的需要。本研究通過對徐州市鼓樓區部分幼兒全血直接稀釋，用火焰原子吸收光譜法測定微量元素含量，旨在分析本地區幼兒體內微量元素水平，為臨床提供一定的理論依據，以便于早期預防。

1 對象與方法

1.1 研究對象

徐州市鼓樓區2011年2月1171名0～6歲正常體檢兒童，其中 0～1歲組 191名，2～3歲組 382名，4～6歲組 598名。

1.2 主要儀器設備及試劑

AA-6300C原子吸收分光光度計（日本島津），鐵、鋅、鈣空心陰極燈；鐵、鋅、鈣標準儲備液1 mg/mL（國家標準物質研究中心），稀釋液為0.5%曲拉通X-100（國藥集團化學試劑廠）；超純水。所用的容器均用HNO3處理過。

1.3 方法學評價

所有檢測均是在儀器正常維護保養、檢測結果在控的情況下進行的。

1.3.1 標準曲線的繪制 用含1%HNO3的0.5%曲拉通X-100依次稀釋鐵、鋅、鈣標準儲備液，稀釋后的各標準濃度如下，鐵：0、0.50、1.00、1.50、2.00、3.00 mg/L；鋅：0、0.10、0.25、0.50、0.75、1.00 mg/L；鈣：0、0.20、0.40、0.60、0.80 mg/L。 以各溶液濃度 C（mg/L）為橫坐標，吸光度A為縱坐標，在常規條件下檢測，繪制標準曲線。

1.3.2 批內及批間精密度測定 取多份標本充分混合，連續測定20次，計算批內精密度，再用該份標本每天測一次，連續測20 d，計算批間精密度，計算其平均值（x）、標準差（S）及變異系數（CV）。

1.3.3 回收率試驗 隨機抽取1份標本，按樣品分析方法測標本中的鐵、鋅、鈣的含量，同時做加標回收試驗，鐵元素測定加入濃度為100 mg/L，鋅元素測定加入濃度為10 mg/L，鈣元素測定加入濃度為50 mg/L，平行測5次。

1.4 樣品的采集和處理

采集兒童左手無名指腹內側指端末梢血40 μL加到1.56 mL含1%HNO3的0.5%曲拉通X-100稀釋液中混勻（稀釋40倍），用移液器吸取500 μL加入到2.0 mL0.5%曲拉通X-100稀釋液中混勻（稀釋5倍），總稀釋200倍，待測。

1.5 樣品測定

用AA-6300C原子吸收分光光度計在常規條件下測定鐵、鋅、鈣元素，根據稀釋倍數和標準曲線計算元素的含量。

2 結果

2.1 血樣品中各元素線性回歸結果

結果顯示，各元素回歸曲線線性良好，回歸方程如下，鐵： A=0.99728C，r=0.9984； 鋅：A=0.065018C，r=0.9919；鈣：A=0.063859C，r=0.9998。

2.2 方法的精密度測定結果

通過實驗測定計算出批內變異系數Fe：3.7%，Zn：1.9%，Ca：1.5%，批間變異系數 Fe：4.5%，Zn：2.5%，Ca：2.7%。 見表1。

表1 血樣品中元素含量均值及變異系數

2.3 測定微量元素回收率結果

各微量元素回收率的測定結果，見表2。2.40～6歲兒童微量元素異常分布情況

表2 樣品分析及回收率結果

結果顯示，該方法測定徐州市鼓樓區正常兒童1171名全血鐵、鋅、鈣的含量，正常人全血微量元素的參考值為，鐵：421～662 mg/L；鋅：4.9～9.8 mg/L；鈣：46～84 mg/L。 微量元素異常分布結果，見表3。

表3 0～6歲兒童微量元素異常分布

由表3可知，缺鐵、缺鋅在0～1歲嬰兒較嚴重，缺鈣的百分率相對缺鐵、缺鋅稍低，3個年齡組隨著年齡的增長所缺乏的微量元素逐漸好轉。

3 討論

目前，微量元素常用的檢測方法有分光光度法、電感耦合等離子體發射光譜法、原子吸收光譜法等。分光光度法操作簡單，易于推廣，但靈敏度較低，選擇性不佳；電感耦合等離子體發射光譜法靈敏、準確快速、干擾小，可同時檢測多種元素，但儀器價格昂貴，結構復雜，很難在臨床推廣。原子吸收分光光度法由于特異性高、精密度好、檢出限低、操作簡便、分析速度快等特點成為微量元素檢測的推薦方法。全血檢測采血量小，操作簡便，易于為家長和兒童所接受，成為臨床實驗室檢測嬰幼兒微量元素最常用的方法。本研究通過對鐵、鋅、鈣元素檢測進行方法學評價，表明原子吸收光譜法線性好、精密度佳，準確度可靠。

微量元素的檢測是為了研究微量元素在疾病的發生、發展過程中與疾病的相互關系，現已證實，許多疾病與各種微量元素的代謝密切相關[4]。因此準確地檢測體內微量元素含量對疾病的診斷、治療和預防有重要的意義[5]。

鐵是人體含量最高的微量元素，主要合成血紅蛋白，運輸和貯存氧，構成細胞色素酶、過氧化物酶等人體必需酶類，參與能量代謝和調節免疫功能等[1]。缺鐵易導致貧血，注意力不集中、倦怠乏力、煩躁等。本次調查顯示1歲以下兒童缺鐵較嚴重，缺乏率達37%，隨年齡增長，鐵缺乏逐漸得到糾正。加強幼兒保健，合理喂養，對較大兒童糾正偏食，多吃一些禽類、黑色食品、葉菜類、菌類、動物血等可有效補充鐵元素。

鋅主要通過十二指腸和空腸吸收分布至全身，由糞便、尿、汗、頭發等排泄，以視網膜、胰腺及前列腺含鋅量高。鋅促進機體生長發育，是體內多種酶的功能成分，在蛋白質、脂肪、糖和核酸代謝中發揮重要作用。兒童生長發育迅速，鋅的需求量大，再加上嬰兒較小，吃的食物較單一，易導致鋅的缺乏[6]。缺鋅易導致消化功能減退、免疫力降低、厭食、生長發育遲緩、毛發枯黃、智力水平發展低下等[7-8]。缺鋅的防治可采用飲食及鋅劑來治療，如多食瘦肉、蛋黃、動物肝臟等，葡萄糖酸鋅由于口感柔和，適合兒童口味，是兒童補鋅的首選鋅劑。

鈣鹽是體內含量最多的無機鹽，主要存在于骨骼和牙齒中。兒童長期缺鈣易患佝僂病、骨軟化病等。近年來，全民補鈣的意識在增強，缺鈣的兒童在減少，結果顯示，隨著兒童年齡的增長，攝入食物的多樣化，缺鈣情況好轉，這與家長的合理膳食有關。

因此，了解兒童體內微量元素的含量，對糾正偏食挑食，加強兒童合理膳食，適時補充微量元素有指導作用。

[1]周新，涂植光.臨床生物化學和生物化學檢驗[M].3版.北京：人民衛生出版社，2004：177-186.

[2]劉世洪，張青翠，吳曉宏.1660例少兒指血微量元素檢測結果分析[J].中國醫學創新，2010，4（10）：61-62.

[3]王冬蓮，阮奕，周君.臺州市兒童微量元素調查情況分析[J].實驗與檢驗醫學，2008，26（1）：85-86.

[4]龔得朋，徐建敏，章輝.微量元素的檢測及實際意義[J].生物醫學工程學進展，2010，31（1）：47-49.

[5]王琰.臨床生物化學和生物化學檢驗[M].3版.北京：人民衛生出版社，2003：195-197.

[6]陳學成.我國兒童營養所存在的問題[J].中華兒童保健雜志，1993，1（1）：23.

[7]蘭曉霞.鋅缺乏與嬰幼兒健康[J].國外醫學：婦幼保健分冊，2003，14（1）：49-50.

[8]張偉淳.微量元素鋅在兒童生長發育中的作用[J].當代醫學，2011，11（3）：41-41.