雙黃燒傷膏對大鼠燒傷、燙傷的治療作用研究

朱曉紅，凌 磊，王 楊，王 強

燒傷為平時及戰時常見外傷，隨著高技術武器如燃料空氣炸彈、氣浪彈、新型燃燒武器等的發展，燒傷的發生率較以往戰爭不斷增加。在燒傷的治療中，外治療法居多，外用藥物在治療燒傷中具有重要地位［1］。理想的燒傷外用治療藥物應具備良好的抗感染及促進創面愈合的功效。雙黃燒傷膏為在充分分析現有燒傷藥物的優缺點，挖掘民間治療燒傷的特效藥物，反復進行篩方、組方的基礎上研制的療效高、不良反應少、使用方便、平戰時都適用的燒傷制劑。本文通過建立大鼠燙傷、燒傷感染動物模型，進一步研究其藥效，為臨床應用提供依據。

1 材料與方法

1.1 藥品與試劑 雙黃燒傷膏由我院制劑室提供(批號:20110818);京萬紅，天津達仁堂京萬紅藥業有限公司(批號:211803);注射用硫噴妥鈉，中國醫藥工業公司(批號:09036884);注射用水(5 mL)，沈陽志鷹制藥廠(批號:2011051507);硫化鈉(分析純)，沈陽市新西試劑廠(批號:05007);膏狀固體酒精，沈陽市東凌化工廠(批號:081643)。

1.2 儀器 SW-CJ-2FD 型雙人單面凈化工作臺，蘇州凈化設備有限公司。

1.3 動物、菌種及培養基 Wistar 大鼠，上海斯萊克實驗動物有限公司/中國科學院上海實驗動物中心［普通級;許可證號:SCXK(滬)2007-0005;合格證編號:2007000503684、2007000503999;序號:0018890、0019214］;銅綠假單胞菌(10104)、營養瓊脂培養基，我院藥檢微生物室提供。

1.4 實驗方法

1.4.1 皮膚刺激性實驗 隨機取5 只體質量160 ～180 g Wistar 大鼠，實驗前24 h 用脫毛劑(8%硫化鈉溶液［2］)給大鼠背部脫毛，面積約2 cm ×2 cm，用清水洗凈、擦干，以防脫毛劑刺激皮膚，分籠喂養，自由進食、進水。分別在各鼠的背部涂藥。24 h 后用75%酒精去除殘留物，分別于1、24、48、72 h 后觀察皮膚情況，觀察涂藥部位皮膚的紅斑和水腫等情況，并進行評分。

最高總分值為8 分(見表1);按分值高低評價刺激性強度:0 ～0.49 分為無刺激性;0.5 ～2.99 分為輕微刺激性;3.0 ～5.99 分為中度刺激性;6.0 ～8.0 分為強刺激性［3］。

表1 皮膚刺激性強度的評分標準

1.4.2 大鼠燙傷實驗 將21 只體質量160 ～180 g Wistar 大鼠，按體質量隨機分為雙黃燒傷膏實驗組、京萬紅陽性對照組和空白對照組，每組7只。實驗前24 h 用脫毛劑(8%硫化鈉溶液)給大鼠背部脫毛，用清水洗凈、擦干，分籠喂養，自由進食、進水。24 h 后腹腔注射2% 硫噴妥鈉(2 mL/kg)麻醉，75%酒精消毒，將脫毛消毒后的背部皮膚置于一孔洞直徑為1.5 cm 圓孔的厚紙板上，紙板下置一盛水燒杯，電爐加熱產生水蒸汽，利用水蒸汽灼燙大鼠背部6 s，造成Ⅱ°燙傷［3］。0.5 h 后分別在燙傷部位涂抹給藥，連續8 h 以保持創面濕潤。以后2 次/d 給藥至創面愈合為止，以結痂脫落、新皮長好為愈合標準。記錄創面變化情況及愈合時間，見表2。

1.4.3 大鼠的燒傷感染實驗［4］于實驗前24 h用脫毛劑(8%硫化鈉溶液)給大鼠背部脫毛，用清水洗凈、擦干，以防脫毛劑刺激皮膚，分籠喂養，自由進食、進水。24 h 后腹腔注射2%硫噴妥鈉(2 mL/kg)麻醉，將燒傷背部皮膚75%酒精消毒，將膏狀固體酒精均勻涂抹于預燒傷區，燒傷面積1.5 cm×1.5 cm，立即點火燃燒25 s，然后用濕布將火撲滅，造成Ⅲ°燒傷［5］。銅綠假單胞菌經16 ～24 h的培養，用生理鹽水制成含4 ×108CFU/mL(相當于0.375 倍的濁度為0.5 麥氏比濁標準)的細菌懸液，各取1 mL 注入Ⅲ°燒傷創面上［6］。0.5 h 后分別在燒傷部位涂抹給藥，連續8 h 以保持創面濕潤。以后每天給藥2 次，連續給藥6 d，給藥后第9天檢查各組大鼠燒傷創面感染情況，見表3。

2 結果

2.1 皮膚刺激性實驗 去除受試藥物后1、24、48、72 h，肉眼觀察涂藥部位有無紅斑和水腫等情況，并按表1 評分，結果5 只大鼠評分均小于0.5分，說明雙黃燒傷膏對皮膚無毒、無刺激性。

2.2 大鼠燙傷實驗 見表2。由表2 可知，大鼠實驗性燙傷實驗組在第3 天、第5 天、第10 天創面面積變化較小;第15 天創面結痂面積明顯減小，脫痂愈合時間縮短，與陽性對照組、空白對照組比較，差異有統計學意義(P ＜0.05、P ＜0.01);第20天創面面積與陽性對照組相比差異無統計學意義(P ＞0.05)，與空白對照組相比差異有統計學意義(P ＜0.01)，說明雙黃燒傷膏對創面的愈合具有良好的促進作用，明顯縮短愈合時間，療效確切。

表2 雙黃燒傷膏對大鼠實驗性燙傷的影響(n=7，±s)

表2 雙黃燒傷膏對大鼠實驗性燙傷的影響(n=7，±s)

注:與實驗組比較，* P ＜0.05，＊＊P ＜0.01

組別原始面積(cm2)涂藥后各時相點創面殘留面積A(cm2)3 d5 d10 d15 d20 d愈合時間(d)1.31 ±1.190.72 ±0.4920.28 ±4.41陽性對照組 8.28 ±0.8110.92 ±1.518.63 ±1.417.74 ±1.891.59 ±0.46*0.63 ±0.2823.22 ±1.61*空白對照組 8.61 ±0.7510.23 ±1.199.12 ±1.148.25 ±1.454.57 ±1.36＊＊2.81 ±1.29＊＊ 25.78 ±1.19實驗組8.78 ±1.5211.32 ±2.2111.72 ±1.6911.78 ±1.65＊＊

2.3 大鼠燒傷感染實驗 見表3。結果表明，大鼠實驗性燒傷感染實驗組在第9 天燒傷感染只數與陽性對照組相比差異無統計學意義，與空白對照組相比差異有統計學意義(P ＜0.01)，說明雙黃燒傷膏對燒傷感染創面具有抗炎作用，療效確切。

表3 雙黃燒傷膏對大鼠實驗性燒傷感染的影響(n=7，±s)

表3 雙黃燒傷膏對大鼠實驗性燒傷感染的影響(n=7，±s)

組別感染只數(第9 天)實驗組1陽性對照組1空白對照組6

3 討論

雙黃燒傷膏對創面具有較強的收斂作用，能夠促進創面結痂愈合，防止組織液滲出，抗炎消腫止痛，有效促進皮膚附件及周圍皮膚生長增殖，對深Ⅱ度燒傷有明顯的治愈作用。實驗中大鼠的燙傷模型主要分為水燙傷和水蒸汽燙傷2 種，水燙傷創面不易控制，所以本實驗中采用水蒸汽燙傷法制備大鼠的燙傷模型。實驗組、陽性對照組、陰性對照組第3 天面積與原始面積比較明顯增大，說明水蒸汽燙傷法制備燙傷模型仍然有其不足之處。水蒸汽穿透力較強，易擴散，使得燙傷面積在制備模型后的第2 天或第3 天才完全呈現，與制備模型當天相比有所增加。所以燙傷水蒸氣量和時間的控制，膏狀固體酒精涂布的面積及厚度是模型成功的關鍵。涂布給藥時，盡量嚴格控制局部藥物濃度，濃度太高，粘稠度增加，導致流動性和滲透性降低，使藥物難于進入大鼠體內，同時高濃度的藥物阻止了炎性滲出液的滲出，從而使效果受到影響。

綜合實驗結果，雙黃燒傷膏治療燙傷、燒傷的作用機制有以下3 個方面:(1)保護創面，收濕斂痂，促進結痂。本藥劑型為油劑，可以在創面形成一層保護膜，起到保護創面的作用;同時可以使創面保持濕潤，促進結痂。(2)活血、生肌、消腫。本藥中含有的當歸、蜂蠟等具有活血、生肌、消腫的功效，促進上皮生長，加快創面愈合。(3)抗菌抗感染。本藥中含有的黃連、黃柏、蒼術、地榆等均具有較強的抗菌作用，特別是對與皮膚、黏膜感染有關的致病菌有明顯的抑制作用。雙黃燒傷膏對皮膚無毒、無刺激性;治療局部燙傷、燒傷具有收斂、利于創面保濕、加快創面愈合等作用。本研究結果為雙黃燒傷膏治療局部燙傷、燒傷提供了藥效學依據。

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