德宏州人乳頭瘤病毒感染與TCT檢測相關性分析

楊艷秋，段 麗

（大理學院德宏教學醫院，云南芒市 678400）

宮頸癌是女性常見惡性腫瘤之一。據世界衛生組織（WHO）報道，全世界每年約有50萬新發子宮頸癌病例，約有23萬婦女死于宮頸癌，中國宮頸癌的新發病例和死亡人數約占世界的三分之一。人乳頭瘤病毒感染是宮頸癌的主要病因〔1〕。人乳頭瘤病毒是一種小的雙鏈DNA病毒，可特異性地感染人皮膚黏膜的鱗狀上皮細胞，引起多種良性、惡性病變〔2〕。由于宮頸癌存在較長的可逆轉的癌前病變期，早期發現、及時治療，宮頸癌患者五年治愈率可達90%〔3〕。所以宮頸癌的篩查和預防是非常有意義的。液基薄層細胞學（TCT）技術和人乳頭瘤病毒（HPV）檢測是目前宮頸病變篩查中常用的兩種方法，現將兩種方法的相關性進行分析。

1 資料與方法

1.1臨床資料2010年9月至2011年12月到云南省德宏州醫療集團人民醫院就診的門診、住院病人及芒市保健院送檢標本，共1 608例，其中年齡最大者72歲，最小者17歲，平均年齡38.7歲〔1〕。

1.2標本采集方法先用無菌棉簽拭凈宮頸表面分泌物，再用亞能公司生產的宮頸專用采集器嚴格按要求采集宮頸脫落細胞送檢驗科做HPV分型檢測，用云南馳恒科技有限公司提供的宮頸薄層液基細胞配套采集器采集樣本放入細胞保存液內送病理科做TCT檢測。

1.3儀器與試劑

1.3.1 檢測儀器 ABI7500熒光定量PCR檢測儀，韓國Combi分子雜交儀，CytoPrep-1制片機，OLympusBx41顯微鏡。

1.3.2 試劑來源 HPV基因分型檢測試劑由亞能生物技術（深圳）有限公司提供，可同時做18種高危型及5種低危型，其分別為高危型16、18、52、31、58、68、33、45、51、56、35、39、53、66、59、73、83、MM4；低危型6、11、42、43、44。

1.3.3 細胞學診斷 按2004年國際癌癥協會TBS分級系統進行分級報告。

1.3.4 操作方法 HPV基因分型檢測按試劑盒說明書進行HPV－DNA提取、擴增、雜交、洗膜、顯色、讀取結果；TCT診斷按TCT要求采集的標本經振蕩離心處理，并分離沉淀的黏液、血液和炎細胞，余下的細胞經Cyto Prep-1制片機制片，將細胞均勻地制成直經13 mm超薄層細胞于載玻片上，用蘇木素－伊紅染色制片鏡檢，The Bethesda System（TBS）分級系統進行分析。

2 結果

2.1 HPV感染率1 608例宮頸可疑標本經HPV基因分型檢測共檢出645例陽性，陽性率為40.11%，高危型522例，高危率為32.46%，低危型73例，低危率為4.54%，混合型50例，混合率3.11%，18型高危型只有MM4未檢出，5種低危型中44型未檢出。

2.2 TCT檢測人乳頭瘤病毒陽性中有483例同時做了病理TCT檢測，ASCUS者118例，高度病變36例，低度病變24例，炎癥154例，正常125例，其它病變26例。

2.3 HPV各亞型在TCT異常病變中的分布在483例HPV陽性標本中，HPV各亞型分別為16型及16型合并其它亞型者147例，TCT異常55例，異常率30.56%；58型及合并其它亞型者80例，異常34例，異常率18.89%，52型及合并其它亞型者52例，異常18例，異常率10%；33型及合并其它亞型者38例，異常17例，異常率9.44%；18型及合并其它亞型者37例，異常14例，異常率7.78%，43型及合并其它亞型者33例，異常8例，異常率4.44%；31型及合并其它亞型者13例，異常6例，異常率3.33%，低危11型13例，異常3例，異常率1.67%，其它亞型70例，異常25例，異常率13.89%，因在HPV檢測中不僅是單獨感染，還有雙重、三重，最多四重感染。見表1-2。

表1 483例HPV陽性與178例TCT異常病變中HPV亞型分布情況

表2 178例TCT異常病變者與年齡的分布情況

3 討論

上述資料顯示云南省德宏州1 608份宮頸脫落細胞HPV檢測中陽性645例，陽性率為40.11%，與國內蘇光〔4〕等報告的37.23%較一致，而與國外Munoz〔5〕等報導的57.4%有一定差距，可能與篩查對象和我州特殊的地理環境有關；其高危型522例，高危率為32.46%，低危型73例，低危率為4.54%，混合型50例，混合率3.11%；我州是一個地處西南邊陲，與緬甸相毗鄰的少數民族地區，經濟和文化知識都比較落后，對自身保健意識不是很高，目前國家對這方面的投入較少，病人只能自費檢查，所以臨床癥狀較輕的及農村病人不愿做TCT檢測，在645例HPV陽性病患中只有483例同時做了病理TCT檢測，其中ASCUS者118例，高度病變36例，低度病變24例，將高度病變、低度病變及ASCUS視為TCT異常者共178例，炎癥154例，正常125例，其它病變26例，本次實驗還顯示178例不正常TCT結果中HPV亞型分布較高的依次為16型，共檢出147例，TCT異常55例，異常率30.89%是所有亞型中檢出率及病變率都較高的一型，與相關報道一致；其次是58型80例，TCT異常34例，異常率19.10%，52型52例，異常18例，異常率10.11%；33型38例，TCT異常17例，異常率9.55%；18型37例，TCT異常14例，異常率7.86%，43型33例，TCT異常8例，異常率4.49%；31型13例，TCT異常6例，異常率3.37%，低危11型13例，TCT異常3例，異常率1.69%，其它亞型70例，TCT異常25例，異常率14.04%，與國外報到的HPV16和HPV18是宮頸癌中最常見型別，其次是HPV58、HPV52、HPV56亞型〔6〕不完全一致；HPV各亞型在各民種族及民族中的差異可能與每個地區的種族和民族的遺傳特點有關〔7〕。此次178例TCT異常病變患者中30歲以下及50歲以上因就診患者相對較少，HPV檢出率及組織學病變率也較低，30～50歲齡段HPV檢出率及TCT異常病變率都是最高的，但在ASCUS患者中年齡最小者僅17歲，是16型感染所致，說明HPV感染和宮頸組織學病變都存在年輕化趨勢。雖然低危型主要只引起外生殖器尖銳濕疣和宮頸良性病變，在本次研究中低危型以11型檢出率相對較高，檢出13例，在13例陽性患者中有3例發生了TCT結果異常，所以低危型感染者臨床不能輕視。

宮頸癌的發生、發展是一個由量變到質變、漸變到突變的過程，此過程需要多年，這是早期發現宮頸癌及癌前病變的絕好時機〔8〕。如能定期進行婦科檢查，及時發現和治療宮頸癌前病變，落實防治措施，宮頸癌的治愈率很高〔9〕。

目前，對HPV感染進行分型分布的研究在宮頸癌篩查及癌前病變病情隨訪監測中有著重要的意義〔10〕，使流行病學的研究更深入化，在篩查、防治過程中發揮著重要作用，定期、及時的進行HPV基因分型診斷及監測是預防宮頸癌的有效途經〔2〕。HPV基因分型檢測較TCT更敏感，檢出率更高，但操作復雜，費用高，臨床可結合使用。

〔1〕吳有利，陸學東，劉鍵，等，膜雜交多重檢測技術在HPV基因分型中的應用〔J〕.中華微生物學和免疫學雜志，2005，25（12）：1048.

〔2〕吳意，吳正林，周曉梅，等.HPV基因分型與宮頸組織病變的相關性〔J〕.中國婦幼保鍵，2009，24（26）：3724-3726.

〔3〕段麗，楊繼華，趙中晟，等，2280例宮頸TCT防癌普查結果分析〔J〕.大理學院學報，2007，6（S1）：147-148.

〔4〕蘇光，錢莉蕓，劉陽，等，多重人乳頭瘤病毒感染檢測在宮頸病變診斷中的價值〔J〕.中國實用婦科與產科雜志，2007，23（9）：706.

〔5〕Munoz N，Bosch FX，Castellsague X，et al.Againstwhich human papillomavirus types shall we vaccineate and screen?The internationall perspective〔J〕.Cancer，2004，111（2）：278-285.

〔6〕An HJ，Cho NH，Lee SY，et al.Correlation of cervical carcinoma and precancerous lesions with human papillomavirus（HPV）genotypes detected with the HPV DNA chip microbaray meehod〔J〕.Cancer，2003，97（7）：1672-1680.

〔7〕LO KW，Wong YF，Chan MK，et al.prevalence of human papillomavirus in cervical cancer：a multicenter study in China〔J〕.Int J Cancer，2002，100（3）：327.

〔8〕Denny L，Kuhn L，Pollack A，et al.Evaluation of alternative methods of cervical cancer screening for resource-poor settings〔J〕.Cancer,2000,89（4）：826-833.

〔9〕鄒倩，濮德敏，周利千.液基超薄細胞技術及TBS系統檢2635例宮頸涂片的臨床分析〔J〕.中國實用婦科與產科雜志，2008，22（4）：268-270.

〔10〕Guyot A，Karim S，Kyi MS，et al.Evaluation of adjunction HPV testing by hybrid captuerll in woman with minor cytological abnormalities for CIN2/3 and cost comparison with colposcopy〔J〕.BMC Infect Dis，2003（3）：23.