土茯苓中藥復方制劑與大蒜油對小鼠的排鉛作用比較

張建琴，唐 祥，余 玉，李 彩，白 云，朱云芳，王一心

（大理學院基礎醫學院，云南大理 671000）

鉛廣泛存在于自然界中，具有廣泛的用途，是工業生產中普遍應用的化學物質，隨著現代工業化的不斷發展，人們接觸到鉛的機會也越來越多。許多研究表明，鉛對人體有較強的毒性作用〔1〕。目前在驅鉛治療中，常用的是螯合劑和抗氧化劑，但螯合劑大都有副作用，而抗氧化劑的療效也正處于研究探索階段，因此，探索新的具有拮抗鉛毒性和驅鉛效果的功能性物質具有實際意義。國內外采用中藥排鉛與食物排鉛的報道較少，且深入機理還有待進一步研究。

本文擬通過對鉛中毒造模小鼠采用土茯苓中藥復方制劑、大蒜油、乙二胺四乙酸（EDTA）驅鉛治療，觀察并監測小鼠存活率以及造模前、造模后、驅鉛治療后小鼠血鉛含量、體重的變化，探討比較土茯苓中藥復方制劑、大蒜油的排鉛效果。

1 材料與方法

1.1實驗動物雄性健康成年小鼠48只（由本校實驗動物中心提供），重35～42 g。

1.2主要器材與試劑電子分析天平（日本島津）、石墨爐原子吸收分光光譜儀（日本島津AA-6200）；苦味酸、氯化鈉、肝素鈉，TritonX-100、醋酸鉛（40 mg/L）、EDTA均為國產的優級純；大蒜油：由生蒜經水提取、濃縮制成，劑量相當于0.2 g生藥提取。土茯苓中藥復方制劑：由金銀花、土茯苓、甘草、綠豆、大青葉混合加水煎制而成。

1.3鉛中毒模型的建立以40 mg/L的醋酸鉛溶液按0.01 mL/g體重劑量灌胃造模，1次/d，連續15 d制成鉛中毒模型〔2〕。

1.4小鼠的分組及標記將小鼠隨機分成4組，即土茯苓中藥復方制劑組、大蒜油組、EDTA組和中毒不治療組，每組12只，每只小鼠分籠飼養。各組均采用苦味酸染色法對小鼠進行標記。

1.5驅鉛治療方法實驗第16天，土茯苓中藥復方制劑組用土茯苓中藥復方制劑以0.12 mL/10 g灌胃，1次/d，連續治療15 d。大蒜油組用大蒜油以0.12 mL/10 g灌胃〔3〕，1次/d，連續治療15 d。EDTA組每天給予EDTA12.9 mg/kg〔4〕，1次/d，連續治療15 d。中毒不治療組用0.12 mL/10 g蒸餾水灌胃，1次/d，連續15 d。

1.6血鉛含量、體重測定采用自身對照的實驗方法，分3個階段對小鼠進行血鉛含量及體重測定。第1階段：造模前，測定小鼠體重并采用尾部采血法，于清晨取0.1 mL尾部全血用以測定造模前的血鉛含量。第2階段：實驗第16天，測定小鼠體重并采用尾部采血法，于清晨取0.1 mL尾部全血用以測定造模后的血鉛含量。第3階段：實驗第31天，測定小鼠體重并采用尾部采血法，于清晨取尾部全血0.1 mL用以測定驅鉛治療后的血鉛含量。

1.7統計學處理采用SPSS11.5處理軟件、q檢驗、H檢驗、χ2檢驗對實驗結果進行統計學處理及分析。

2 結果

2.1土茯苓中藥復方制劑、大蒜油、EDTA對造模小鼠血鉛含量的影響造模前，小鼠血鉛含量各組間比較，差異無統計學意義（P＞0.05）。造模后，小鼠血鉛含量各組間比較，差異無統計學意義（P＞0.05）。驅鉛治療后，土茯苓中藥復方制劑組、大蒜油組、EDTA組分別與中毒不治療組的血鉛含量比較，差異有統計學意義（P＜0.01）；土茯苓中藥復方制劑組、大蒜油組、EDTA組的血鉛含量兩兩比較，差異有統計學意義（P＜0.01）。驅鉛治療后各組的血鉛含量為：土茯苓中藥復方制劑組＜EDTA組＜大蒜油組。見表1。

2.2土茯苓中藥復方制劑、大蒜油、EDTA對造模小鼠體重的影響造模前小鼠體重各組間比較，差異無統計學意義（P＞0.05）。造模后小鼠體重各組間比較，差異無統計學意義（P＞0.05）。驅鉛治療后，土茯苓中藥復方制劑組、大蒜油組分別與中毒不治療組的體重比較，差異有統計學意義（P＜0.05）；土茯苓中藥復方制劑組與大蒜油組的體重比較，差異有統計學意義（P＜0.05）；土茯苓中藥復方制劑組的體重＞大蒜油組的體重。見表2。

表1 造模前、造模后、驅鉛治療后血鉛含量比較

表2 造模前、造模后、驅鉛治療后小鼠體重變化比較（±s，g）

表2 造模前、造模后、驅鉛治療后小鼠體重變化比較（±s，g）

注：驅鉛治療后，經q檢驗，**：與EDTA組比較，P＜0.05；△△：與中毒不治療組比較，P＜0.05；##：與土茯苓中藥復方制劑組比較，P＜0.05。

小鼠體質量/g造模前 造模后 驅鉛治療后土茯苓中藥復方制劑組 39.80±1.76 39.34±1.6939.02±0.83**△△大蒜油組 39.34±3.10 38.47±2.5937.08±0.91△△##EDTA 組 38.98±5.50 38.25±5.2136.40±1.33△△##中毒不治療組 39.53±3.35 38.44±4.01 34.54±2.30**##組別

2.3土茯苓中藥復方制劑、大蒜油、EDTA對造模小鼠存活率的影響土茯苓中藥復方制劑組、大蒜油組分別與中毒不治療組的存活率比較，差異有統計學意義（P＜0.01）；土茯苓中藥復方制劑組與大蒜油組的存活率比較，差異無統計學意義（P＞0.05）。見表3。

表3 四種方案對造模小鼠的存活率比較

3 討論

近年來，鉛中毒成為了研究熱點，許多學者致力于中藥驅鉛的研究，如趙英環等〔5〕用土茯苓、木瓜、當歸、扁豆、烏梅、甘草等組方對110例鉛中毒患者進行系統治療，取得了較好的療效。也有報道大蒜及其產品對鉛中毒大鼠有解毒功能〔6〕?？梢姡承┲兴帯⑹澄锞哂序屻U效果。

鉛中毒是常見的重金屬中毒之一。關于建立鉛中毒模型的方法報道較多，本實驗參考相關研究資料，每天以40 mg/L的醋酸鉛溶液，按0.01 mL/g體重劑量灌胃造模，連續15 d，通過對造模前與造模后的血鉛含量進行統計學分析，差異有統計學意義（P＜0.01），表明造模成功。

EDTA是螯合劑的代表性物質，能和堿金屬、稀土元素和過渡金屬等大多數金屬離子形成穩定的水溶性絡合物，從而發揮排解重金屬中毒的作用。EDTA同樣也是臨床上普遍采用的驅鉛藥物之一。本實驗對土茯苓中藥復方制劑進行加減來探討其對小鼠血鉛含量的促排作用，實驗結果表明，本土茯苓中藥復方制劑的驅鉛功效強于EDTA和大蒜油，因此本土茯苓中藥復方制劑治療鉛中毒有顯著療效。本土茯苓中藥復方制劑由金銀花、土茯苓、甘草、綠豆、大青葉等配制而成，綠豆和大青葉可降低鉛中毒小鼠的血鉛值，緩解鉛中毒所致的ZPP升高，減少鉛對機體的毒害作用〔7〕；中醫理論認為金銀花、土茯苓、甘草具有清熱解毒、利水滲濕的功效，本土茯苓中藥復方制劑驅鉛作用可能是因為這些藥物中含有多種有機酸，如甘草中含有甘草酸，土茯苓中含有茯苓酸等〔8〕，這些有機酸可以與鉛絡合形成絡合物，促進鉛的排泄，降低腦鉛和血鉛；除了以上機制外，土茯苓、甘草、金銀花復方制劑中含有豐富的鈣離子〔9〕，補充鈣離子進入機體后，可以通過競爭機制，促進鉛的排泄，降低腦鉛、血鉛水平，升高腦鈣水平，可能是其作用機制之一。由于植物中藥物成分相當復雜，是何種成分起關鍵作用或聯合作用，尚有待進一步探討。

此次科研結果進一步驗證大蒜油有一定的驅鉛效果。已有文獻報道大蒜提取物具有促進鉛排泄的作用〔10〕。大蒜本身含有能直接與鉛反應的物質，如果膠、半胱氨酸、葫蒜素、三硫醚等；某些含硫化合物如硫醚、硫肽等進入人體后，可釋放出活性的巰基物質，這些巰基物質再與鉛反應生成配合物，這些配合物通過尿液或糞便排出體外，從而達到排鉛目的〔11〕。

以土茯苓為主的中藥復方制劑與大蒜油都有排鉛作用，本實驗初步證實二者驅鉛功效為：以土茯苓為主的中藥復方制劑＞大蒜油。如果二者聯合用藥可能會獲得更顯著的驅鉛效果，有待于進一步研究。

〔1〕魏校敏，楊波，李真真，等.3090例兒童全血鉛含量檢測與分析〔J〕.中國初級衛生保健，2006，20（7）：33.

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〔3〕莫生瓊，張樹球，吳詩章，等.海爾?？诜候屻U效果的實驗研究〔J〕.現代中西醫結合雜志，2005，26(5):3064-3065.

〔4〕陳玲玲，陳萍萍，王旗，等.水蘇糖對小鼠血鉛水平的影響〔J〕.工業衛生與職業病，2005，31（5）：310-312.

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〔7〕趙琳，劉寧，孫子重.綠豆和大青葉對鉛毒性的拮抗作用〔J〕.中國公共衛生，2004，20（8）：966.

〔8〕馬清鈞，王淑玲.常用中藥現代研究與臨床〔M〕.天津：天津科技翻譯出版公司，1995:642.

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〔10〕尹華，包其高.大蒜提取物排鉛效果的研究〔J〕.中國安全科學學報，1999，9（4）:27-30.

〔11〕尹華.大蒜排鉛的機理研究〔J〕.浙江中醫學院學報，1992，23（1）:61.