不同產地金櫻子根、莖、果中多糖含量的比較研究

譚宏韜

金櫻子為薔薇科植物金櫻子RosalaevigataMichx.的干燥成熟果實，味酸、甘、澀，性平，歸腎、膀胱、大腸經。具有固精縮尿，澀腸止瀉的功效，現代藥理研究發現金櫻子具有抗氧化、抑菌和抗炎、抑脂、免疫活性、致突變等作用，還能誘導細胞凋亡，臨床上主要用于治療遺尿、尿頻，腹瀉，遺精、早泄，子宮下垂，慢性支氣管炎，以及作為肥胖糖尿病的食療方[1]。

藥食兼備的金櫻子因其風味獨特、營養價值豐富的特點倍受青睞，作為制藥企業生產多種保健品的重要原料和疾病治療不可缺少的藥物，金櫻子藥材資源需求量越來越大。但由于社會產量少、市場庫存薄弱、用途日益拓寬的原因，金櫻子藥材商品貨少價揚[2]，因此，研究提高金櫻子藥材資源的方法為當務之急。席許林等[3]以金櫻子根為主自擬中草藥方運用于2型糖尿病患者，結果治療前后血糖明顯下降。劉佩沂等[4]通過總結近幾年金櫻子根的研究進展，得出金櫻子根已廣泛應用于臨床的結論，但關于其化學成分及藥理研究報導甚少。賴岳曉等[5]通過研究得出金櫻子根、莖多糖具有抑菌作用，說明多糖是金櫻子根和莖的主要藥效成分，但是否能夠代替金櫻子果入藥，目前尚無相關研究報導。

《中國藥典》2005版規定，金櫻子肉按干燥品計算，含金櫻子多糖以無水葡萄糖計，不得少于25%[6]，金櫻子多糖無疑是金櫻子果肉的主要活性成分之一。本論文研究通過對不同產地的金櫻子根、莖、果中多糖含量進行比較，初步探討金櫻子的根和莖是否能在一定程度上代替果實入藥，為進一步解決金櫻子藥材資源匱乏問題提供科學依據。

1 材料

1.1 藥材采集及處理

于廣西藤縣(2005年10月5日)、湖南長沙(2008年11月24日)、廣東河源(2009年1月16日)、廣東肇慶(2008年10月6日)，各采集3株已成熟金櫻子的根、莖、果實，經廣州中醫藥大學中藥學院中藥資源教研室何國振副教授鑒定為薔薇科植物金櫻子RosalaevigataMichx.的成熟根、莖、果實。將藥材除去雜質，洗凈，60℃烘干，粉碎得粗粉備用。

1.2 儀器

紫外光-可見光吸收光譜儀(UV/Vis Spectrophotometer) (Optizen 2120uv，韓國)；十萬分之一克電子天平 (Sartorius AG BP211D，德國)。

1.3 試藥

濃硫酸(分析純)，苯酚(分析純，重蒸酚)；葡萄糖對照品(批號：110833-200503，中國藥品生物制品檢定所)。

2 方法與結果

2.1 對照品溶液的制備

將葡萄糖對照品打開蓋置小燒杯中，在五氧化二磷減壓干燥器中干燥12 小時，精密稱定0.015 g置25 ml量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得(每ml中含無水葡萄糖0.6 mg)。

2.2 標準曲線的制備

精密量取對照品溶液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 ml分別置50 ml量瓶中，各加水補足至刻度，搖勻。分別精密量取上述溶液2ml，置具塞試管中，迅速滴加4 %苯酚溶液1 ml、濃硫酸7.0 ml，搖勻，置40 ℃水浴中保溫30分鐘，取出置冰浴中放置5分鐘，取出[7]，以蒸餾水為空白，于490 nm的波長處測定吸光度，以吸光度為縱坐標，葡萄糖濃度為橫坐標，繪制標準曲線[6]。

測定結果表明，葡萄糖在0.006～0.030 mg/ml范圍內呈良好線性關系。r=0.9998，A=11.550c-0.01410。其中，A表示吸光度，c為葡萄糖濃度。

2.3 測定法

精密稱定金櫻子根、莖粗粉各1 g，果粗粉0.5 g置錐形瓶中，精密加水50 ml，稱定重量，靜置1小時，水浴回流提取1小時，冷卻至室溫，再稱定重量，用水補足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續濾液1 ml，置100 ml量瓶中，加水補足至刻度，搖勻，精密量取25 ml，置50 ml量瓶中，加水補足至刻度，搖勻，精密量取2 ml置具塞試管中，參照標準曲線的制備項下的方法，自“迅速滴加4%苯酚溶液1 ml、濃硫酸7.0 ml”起，依法測定吸光度，從標準曲線上讀出供試品溶液中金櫻子多糖的重量[6]。

2.4 精密度試驗

同一供試品溶液，各精密稱取5份，參照標準曲線制備項下的方法，依法測定吸光度為0.193、0.193、0.194、0.193、0.193，RSD=0.23%(n=5)，精密度良好。

2.5 重復性試驗

同一批樣品，各精密稱取5份，參照測定法項下的方法測定吸光度，從標準曲線上讀出供試品溶液中金櫻子多糖的重量，計算出樣品中金櫻子多糖的含量，分別為15.47%、14.95%、15.53%、14.34%、13.85%，RSD=4.92%(n=5)，重復性良好。

2.6 回收率試驗

根據重復性試驗中測定的5份樣品金櫻子多糖含量的平均值，計算0.25 g樣品中含有金櫻子多糖的重量。取同一批樣品，各精密稱取5份，參照測定法項下的方法測定吸光度，從標準曲線上讀出供試品溶液中金櫻子多糖的重量，計算平均回收率為98.64%，RSD值為1.80%。

2.7 樣品含量測定及統計分析

每個樣品重復3次，參照測定法項下的方法，從標準曲線上讀出供試品溶液中金櫻子多糖的重量，計算出樣品中金櫻子多糖的含量，分別對廣西藤縣、湖南長沙、廣東河源、廣東肇慶4個不同采收地點的金櫻子的多糖含量進行測定，結果見表1。

運用SPSS 11.5軟件的One-Way ANOVA 過程進行方差分析，對比不同產地金櫻子根、莖與果之間的多糖含量，結果示4個產地金櫻子的根與果、莖與果多糖含量均存在顯著性差異(P<0.05)；廣西藤縣、湖南長沙、廣東肇慶3個產地金櫻子根與莖多糖含量存在顯著性差異(P<0.05)，而廣東河源金櫻子的根與莖多糖含量之間無顯著性差異(P>0.05)。

表1 不同產地的金櫻子不同部位多糖含量比較

3 分析與討論

4個產地金櫻子根、莖的多糖含量都比果實的多糖含量低，且具有顯著性差異，因此，不能以金櫻子的根和莖代替果實入藥。且《中國藥典》2005版規定，金櫻子肉按干燥品計算，含金櫻子多糖以無水葡萄糖計，不得少于25%[6]，而實測值均低于該標準，除卻操作誤差，主要因為藥用植物的生長發育及產品器官的形成、有效物質的合成與累積受自身遺傳特征、自然環境、采收等多方面的影響[8]。當藥用植物所處的外界環境條件發生了變化，其體內的代謝活動就會受到影響，從而使有效物質的含量發生變化，結果影響到藥材的內在質量，因此對中藥材實施GAP種植顯得尤為重要。另外也說明金櫻子在入藥前必須經過一些炮制加工，才可以達到較好的臨床療效。

目前國內學者對金櫻子已經進行了大量研究，這些工作可以為本研究提供可靠的基礎。根、莖、果之間的比較屬于同一植株的縱向比較，可消除外界干擾因素；多糖的測定方法來源于藥典，科學而穩定。本研究通過測定比較金櫻子根、莖、果中主要活性成分——金櫻子多糖的含量，跟以往的研究僅局限于藥材化學成分、藥理作用、臨床應用和制劑工藝不同，從新的角度研究解決藥材貨源不足的現狀，具有重要意義。

參考文獻

[1] 閔俊，李燕燕，余華．金櫻子化學成分、藥理作用及臨床應用研究進展[J]．環球中醫藥，2008，1(2)：16-18.

[2] 尹平孫.幾種中藥材熱銷品種行情點評[J].特種經濟動植，2008，14(8)：24-25.

[3] 席許林，張新國.古老中藥方治療2型糖尿病的秘方[J].中國醫藥指南，2011，9(5)：147-148.

[4] 劉佩沂，田素英，梅全喜.金櫻根研究進展[J].海峽藥學，2010，22(1)：98-99.

[5] 賴岳曉，王艷，盤昌盛，等.金櫻子根和莖多糖的抑菌作用研究[J].中國藥房，2009，20(24)：1857-1858.

[6] 國家藥典委員會．中華人民共和國藥典[M]．一部．北京：化學工業出版社，2005：153-154.

[7] 羅毅，潘細貴，劉剛，等.苯酚-硫酸法測定多糖含量顯色方式的優選[J].中國中醫藥信息雜質，2005，12(1)：45-46.

[8] 黃堅航.影響中藥質量的因素[J].海峽藥學，2005，17(3)：189-192.