丹參酮對大鼠放射性肝損傷保護作用的研究

苑蘭惠，史鴻云，李志剛，楊會彬，蓋曉惠，張戈妹

（河北大學附屬醫院放療科，河北保定 071000）

·論 著·

丹參酮對大鼠放射性肝損傷保護作用的研究

苑蘭惠，史鴻云，李志剛，楊會彬，蓋曉惠，張戈妹

（河北大學附屬醫院放療科，河北保定 071000）

目的研究丹參酮對大鼠放射性急性肝損傷的保護作用。方法健康成年SD大鼠42只，雌雄各半，隨機分為正常組（14只）、模型組（14只）、實驗組（14只）。實驗組于照射前3d起每天給予腹腔注射丹參酮ⅡA磺酸鈉15mg/kg，模型組和正常組同時腹腔注射等量生理鹽水。對模型組、實驗組應用醫科達加速器6Mv-X線照射上腹部，總劑量20Gy，單次照射法造成大鼠放射性急性肝損傷。測定大鼠血丙氨酸氨基轉移酶（alanine aminotransferase，ALT）、丙二醛（malondialdehyde，MDA）及轉化生長因子-β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1）含量。結果正常組和模型組、正常組和實驗組、實驗組和模型組的ALT、MDA、TGF-β1比較，差異均有統計學意義（P＜0.05）。結論丹參酮對大鼠放射性肝損傷具有一定的保護作用，作用機制之一可能與其抗氧化活性有關。

肝腫瘤；丹參酮；放射療法；大鼠

三維適形放射治療為中晚期原發性肝癌患者提供了一條新的治療途徑［1］。在放射治療的同時，放射性肝病是其最主要的并發癥之一，也是影響放射耐受量的最主要因素［1］。本研究通過采用6Mv-X射線照射法建立大鼠放射性急性肝損傷模型，應用丹參酮ⅡA治療一定時間后，考察丹參酮ⅡA對大鼠血丙氨酸氨基轉移酶（alanine aminotransferase，ALT）、血清丙二醛（malondialdehyde，MDA）、轉化生長因子-β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1）水平的變化情況來探討丹參酮對放射性肝損傷的治療保護作用。

1 材料與方法

1.1 實驗動物及分組：健康成年SD大鼠42只，體質量160～180g，雌雄各半，隨機分為正常組（14只）、模型組（14只）、實驗組（14只）。

1.2 大鼠肝損傷模型的建立：所有SD大鼠飼養溫度（23±2）℃，照明時間為12h/d，飼養1周后進行實驗。實驗組于照射前3d起每天給予腹腔注射丹參酮ⅡA磺酸鈉15mg/kg，模型組和正常組同時腹腔注射等量生理鹽水。對模型組、實驗組應用醫科達加速器6Mv-X線照射上腹部。照射范圍，采用1 000kV/25mA狀態CT下定位，大鼠仰臥于體模固定板上給予烏拉坦麻醉（濃度25%，500mg/kg），四足固定，上界至膈頂、下界至肝下緣，左、右側界至腹外側壁，范圍約2cm×4cm，劑量率為1 000 cGy/min，源皮距100cm，計算點深度為3cm，總單次量20Gy。

1.3 數據采集：實驗組和模型組照射后72h，全部大鼠脫頸椎處死后開腹，抽取腹主動脈血約3m L，應用自動生化分析儀檢測ALT、比色法檢測血清MDA，應用酶聯免疫法檢測血清TGF-β1，具體操作嚴格按試劑盒說明書。

1.4 統計學方法：應用SPSS10.0統計軟件包進行統計分析，計量資料以±s表示，兩兩比較采用LSD-t檢驗。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

與正常組相比，模型組經照射后ALT活性明顯增高，MDA和TGF-β1水平增高，差異有統計學意義（P＜0.05），造模成功，出現肝放射損傷。實驗組ALT活性、MDA和TGF-β1水平升高，差異有統計學意義（P＜0.05），應用丹參酮后雖減輕肝損傷，但未達到正常水平。見表1。

與模型組相比，實驗組應用丹參酮治療后，ALT活性明顯下降，MDA和TGF-β1水平下降，差異有統計學意義（P＜0.05），肝損傷程度減輕，治療有效，見表1。

表1 3組ALT、MDA、TGF-β1的比較

3 討 論

肝組織中含有豐富的ALT，在肝組織受到損害或壞死時，血清ALT活性明顯升高。在本研究中模型組造模成功，能達到肝臟明顯損傷，應用丹參酮腹腔注射后可明顯降低ALT的水平，可減輕肝損傷程度，可達到保護作用。

丹參酮ⅡA是從活血化瘀中藥丹參中提取的脂溶性有效成分，丹參酮類化合物通過與自由基結合生成高穩定性的復合物，降低自由基活性，從而發揮抗氧化作用。Niu等［2］研究認為丹參酮ⅡA能夠有效防止低密度脂蛋白的氧化和抑制細胞脂質過氧化。續潔琨等［3］研究發現丹參酮類化合物對應激負荷等原因引起肝損傷的保護作用，可能與其清除自由基、減少氧自由基介導的細胞損害，抑制脂質過氧化損傷的過程有關。本研究模型組大鼠ALT水平顯著升高，脂質過氧化產物MDA含量顯著增高，肝臟受損明顯。而實驗組ALT、MDA含量降低，差異有統計學意義，可見丹參酮能阻止自由基對肝細胞膜中不飽和脂肪酸的氧化損傷，保護了肝細胞，減少了ALT、MDA的釋放。劉永剛等［4］在考察丹參酮ⅡA對CCl4和D-半乳糖胺引起的小鼠肝損傷的保護作用時也證明丹參酮ⅡA能顯著降低血清ALT水平和肝組織勻漿MDA含量。王宇等［5］研究丹參對原位肝移植肝臟的缺血再灌注損傷有保護作用，從而減輕氧自由基及脂質過氧化，保護細胞膜，改善肝功能。

TGF-β1是公認的致肝纖維化的最主要的細胞因子之一［6］，它與肝組織損傷密切相關。Seong等［7］觀察正常肝組織照射后受損傷肝組織表達TGF-β1mRNA早期升高。本研究中，模型組TGF-β1明顯高于正常組，而實驗組的TGF-β1水平明顯下降，結果表明在放射反應中丹參酮可降低TGF-β1的水平，減輕肝損傷的程度，對治療過程中的輻射損傷具有一定作用。

電離輻射對肝臟損傷的主要并發癥是放射性肝炎及纖維化，其發生機制尚未完全闡明。它不僅限制了治療的實施，也降低了患者療效和生存質量。本研究初步得出丹參酮對放射性肝損傷有一定的治療保護作用，希望能進一步應用于臨床，使患者從中受益。

［1］ 曾昭沖.肝細胞癌的放射治療［J］.實用腫瘤雜志，2007，22（5）：380-384

［2］ NIU XL，ICHIMORIK，YANG X，et al.TanshinoneⅡA inhibits low density lipoprotein oxidation in vitro［J］.Free Radic Res，2000，33（1）：305-312.

［3］ 續潔琨，栗原博，鄭潔靜等丹參酮類化合物對小鼠應激性肝損傷的保護作用［J］藥學學報，2006，41（7）：631-635.

［4］ 劉永剛，陳厚昌，蔣義平.丹參酮對小鼠肝損傷的保護作用［J］中藥材，2001，24（8）：588.

［5］ 王宇，周杰，蔣曉青.丹參對原位肝移植大鼠供肝冷保存再灌注損傷的保護作用［J］.中國組織工程研究與臨床康復，2008，12（5）：801-804.

［6］ ZHANG LJ，YU P，LI D，et al.Effect of cytokines on carbon tetrachloride-induced hepatic fibrogenesis in rat［J］.World J Gastroeaterol，2004，10（1）：77-81.

［7］ SEONG J，KIM SH，CHUNG EJ，et al.Early alteration in TGF-beta mRNA expression in irradiated rat liver［J］.Int J Radiat Oncol Biol Phys，2000，46（3）：639-643.

（本文編輯：趙麗潔）

R735.7

B

1007-3205（2012）03-0339-02

2011-09-26；

2011-10-31

苑蘭惠（1973-），女，河北保定人，河北大學附屬醫院副主任醫師，醫學碩士，從事腫瘤放射治療研究。

10.3969/j.issn.1007-3205.2012.03.038