我院產超廣譜β-內酰胺酶大腸埃希菌的耐藥性分析

李玉強萬忠林

（1河南省平頂山市第一人民醫院，河南 平頂山467000；2平高集團有限公司醫院）

我院產超廣譜β-內酰胺酶大腸埃希菌的耐藥性分析

李玉強1萬忠林2

（1河南省平頂山市第一人民醫院，河南 平頂山467000；2平高集團有限公司醫院）

目的：了解我院產超廣譜β-內酰胺酶（ESBLs）大腸埃希菌（ECO）的耐藥現狀，為臨床合理用藥提供依據。方法：將1999年1月-2011年9月我院分離ECO的藥敏試驗結果，應用WHONET 5.5軟件進行統計學分析；產ESBLs菌株采用雙紙片協同實驗測定并經美國臨床實驗室標準化協會確證試驗確認。結果：ECO和產ESBLs ECO的分離率為21.6%和63.9%。產ESBLs菌株的耐藥率遠高于非產ESBLs菌株。產ESBLs ECO除對亞胺培南、阿米卡星、呋喃妥因和頭孢哌酮鈉舒巴坦鈉敏感率較高外，對其他抗菌藥物耐藥嚴重。結論：我院應重視對產ESBLs菌株的監控，臨床應合理應用抗菌藥物；碳青霉烯類是治療產ESBLs ECO最有效的藥物。

大腸埃希菌；超廣譜β-內酰胺酶；耐藥性

大腸埃希菌（Escherichia coli，ECO）是臨床感染中最常見的致病菌。近年來ECO中產超廣譜β-內酰胺酶（ESBLs）菌株所占的比例越來越高[1]，且產ESBLs ECO耐藥嚴重，由其導致的各類感染臨床治療困難[2]。為了解ECO的耐藥現狀，指導臨床有效控制ECO感染，對我院1999-2011年分離的ECO進行了回顧性分析。

1 資料與方法

1.1 菌株來源

1999年1月 -2011年 9月我院微生物實驗室從各種送檢標本中培養分離的2 746株ECO，剔除重復菌株。

1.2 細菌鑒定和藥敏試驗

細菌培養按 《全國臨床檢驗操作規程》（第3版）進行；細菌鑒定采用API（Analytic Products INC，API）鑒定系統（購自法國生物梅里埃公司）；藥敏試驗采用紙片瓊脂擴散法（K-B法），紙片購自北京天壇藥物生物技術開發公司；結果按美國臨床實驗室標準化協會 （Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI）標準判定。質控菌株為大腸埃希菌ATCC25922，購自河南省臨床檢驗中心。

1.3 ESBLs檢測

將鑒定后的ECO常規做雙紙片協同試驗并經CLSI確證試驗確認。確證試驗如下：分別使用頭孢他啶（30 μg）、頭孢噻肟（30 μg）紙片和頭孢他啶 /克拉維酸（30 μg/10 μg）、頭孢噻肟 /克拉維酸（30 μg/10 μg）的復合劑紙片進行試驗，當任何一種復合劑紙片抑菌圈直徑大于或等于其單獨藥敏紙片抑菌圈直徑5 mm，可確證該菌株產ESBLs。

1.4 數據分析

數據采用WHONET 5.5軟件進行統計學分析，耐藥率間的比較采用χ2檢驗。

2 結果

2.1 分離率

13年中共分離出12 727株病原菌，其中ECO的分離率為21.6%（2 746株），臨床分離率有下降趨勢。ECO中產ESBLs菌株的檢出率為63.9%（1 755株），臨床分離率有升高趨勢。見表 1。

表1 1999-2011年ECO及產ESBLsECO的分離率（n=2746）

2.2 分布特征

菌株的來源按標本分為：痰 （28.2%），尿液（24.6%），膿液（17.8%），胸腹水（8.9%），分泌物（8.5%），血液（7.2%），其他（4.8%）；按科室分：呼吸內科（19.7%），ICU（15.6%），血液腫瘤科（11.6%），腎內科（9.4%），泌尿外科（8.9%），普外科（8.2%），內分泌科（5.9%），老年病科（4.2%），婦產科（3.9%），神經內科（3.1%），其他（9.5%）。

2.3 耐藥性

ECO在13年中耐藥率以第三、四代頭孢菌素類藥物升高明顯。產ESBLs菌株比非產ESBLs菌株的耐藥率顯著增高。見表2、3。

表21999-2011 年ECO中產ESBLs菌株的耐藥率(%)

3 討論

ESBLs是ECO等細菌產生的一種絲氨酸蛋白酶衍生物，可破壞含β-內酰胺結構的藥物，使其降解失效，為ECO產生耐藥的主要方式之一。目前將ESBLs分為TEM、SHV、OXA、CTX-M及其他型5類。我國以CTX-M為主，其可通過質粒在細菌間傳播，且ESBLs編碼質粒上可以攜帶氨基糖苷類、氟喹諾酮類等抗菌藥物的耐藥基因，導致多重耐藥[1]。外排泵為ECO耐藥的另一重要機制[3]。

從表1可以看出，13年中ECO在致病菌中的分離率呈下降趨勢，由1999年的41.7%降至2011年的18.9%，但仍高于全國平均10.0%的水平[4]。但產ESBLs菌株從ECO中的分離率上升趨勢明顯，已從1999年的26.4%升至2011年的79.8%，遠高于全國平均35.3%的水平[5]。出現這種現象的原因可能與地區差異有關。

從表2和表3可以看出，ECO中產ESBLs菌株對大多數抗菌藥物耐藥率較高，產ESBLs菌株比非產ESBLs菌株的耐藥率高得多，除亞胺培南和呋喃妥因外兩者之間存在顯著性差異 （P＜0.05）。尤以第三、四代頭孢菌素類藥物差異明顯，所有第三、四代頭孢類抗菌藥物對產ESBLs菌株完全耐藥，而對非產ESBLs菌株的耐藥率在6.5%以下。鑒于目前ECO中產ESBLs菌株的分離率高達79.8%，不含酶抑制劑的青霉素類及第三、四代頭孢菌素類抗菌藥物用于ECO經驗性治療常無效，因此，一旦明確產ESBLs菌株感染，應立即給予有效藥物治療，必要時可首選亞胺培南[6]。目前對產ESBLs ECO較為有效的抗菌藥物有亞胺培南、阿米卡星、哌拉西林鈉三唑巴坦鈉和頭孢哌酮鈉舒巴坦鈉。

表31999-2011 年ECO中非產ESBLs菌株的耐藥率(%)

我院嚴格按照《抗菌藥物臨床應用指導原則》的要求認真落實，強化圍手術期抗菌藥物的管理，認真執行抗菌藥物分級管理，定期督導、檢查和評比抗菌藥物使用情況，促進臨床合理應用抗菌藥物?？刂扑幤肥杖胝坚t院總收入的40%以下。抗菌藥物管理取得了明顯的成效。2004年之前抗菌藥物耐藥率上升勢頭較快，2005-2006年上升勢頭已減緩，2007年以后有所下降。我院細菌耐藥性的變遷與楊玉霞等[7]報道的一致。在控制細菌耐藥方面瑞典的經驗很值得我們借鑒[8]。

高齡、免疫力低下、長期住院患者是產ESBLs ECO易感對象，應用糖皮質激素、化療、介入治療是產ESBLs ECO感染的高危因素。因此，對產ESBLs ECO感染重在預防，加強無菌觀念、嚴格消毒隔離防范措施、減少侵入性操作、合理應用抗菌藥物，是預防和減少產ESBLs細菌感染和傳播的有效措施。

[1] 羅燕萍，張秀菊，徐雅萍，等.產超廣譜β-內酰胺酶肺炎克雷伯菌和大腸埃希菌的分布及其耐藥性研究[J].中華醫院感染學雜志，2006，16（1）：101-104.

[2] 肖永紅.細菌耐藥：挑戰與對策[J].中國執業藥師，2011，8（6）：3-8.

[3] 翁幸鐾，糜祖煌.大腸埃希菌尿液分離株7種抗菌制劑外排泵基因研究[J].中華醫院感染學雜志，2010，20（6）：759-762.

[4] 文細毛，任南，吳安華，等.全國醫院感染監控網醫院感染病原菌分布及變化趨勢[J].中華醫院感染學雜志，2011，21（2）：350-355.

[5] 肖永紅，王進，趙彩云，等.2006-2007年Mohnarin細菌耐藥監測[J].中華醫院感染學雜志，2008，18（8）：1051-1056.

[6] 羅燕萍，李琴春，葉麗艷，等.104株大腸埃希菌對3種氟喹諾酮類藥物突變抑制濃度的比較研究[J].中華醫院感染學雜志，2009，19（17）：2242-2244.

[7] 楊玉霞，欒斌，馬麗娜.2000-2010年下呼吸道感染病原菌構成變遷及耐藥性分析[J].中華醫院感染學雜志，2011，21（16）：3509-3511.

[8] 肖永紅.瑞典控制細菌耐藥戰略項目介紹[J].中國執業藥師，2011，8（6）：42-44.

Analysis of Drug Resistance of Extended Spectrum Beta-Lactamases Producing Escherichia Coli in Hospital

Li Yuqiang1，Wan Zhonglin2(1 The First People’s Hospital of Pingdingshan,Henan Pingdingshan 467000, China;2 Hospital of Pinggao Group Co.Ltd.)

Escherichia coli；Extended Spectrum Beta-lactamases；Drug Resistance

10.3969/j.issn.1672-5433.2012.03.002

2011-11-19）

李玉強，男，副主任藥師。研究方向：醫院藥學、臨床藥學。E-mail：lyqmyl@163.com

ABSTRACTObjective：To investigate the current situation of drug resistance of extended spectrum beta-lactamases (ESBLs)producing Escherichia coli(ECO)in our hospital with the aim of providing reference for clinical rational drug use in our hospital.Methods：The data of drug susceptibility tested during 1999 to 2011 in our hospital were analyzed by WHONET 5.5 software.ESBLs producing strains were tested by the double disk test and confirmed by CLSI confirmatory test.Results：The isolated ratios of ECO and ESBLs producing ECO were 21.6%and 63.9%respectively during 1999-2011.The resistance rates of ESBLs producing strains were much higher than those of non-ESBLs producing strains.ESBLs producing ECO was sensitive to imipenem,amikacin,nitrofurantoin,cefoperazone sodium and sulbactam sodium but presented high resistance to the other antibiotics.Conclusion：Attention should be paid by our hospital to monitor the ESBLs producing strains.Antibiotics should be used rationally in clinics.Carbopenem was proved as the most effective antibiotics to treat the infection caused by ESBLs producing strains.