藏藥雪蓮中四種礦質元素含量的測定與分析

盧新生　茍如虎　劉伯渠　張海玲　王亞玲

摘要：對藏藥雪蓮（Saussurea involucrata）試樣進行灰化處理，并采用紙色譜對試樣中礦質元素Co、Ni、Cu和Fe進行分離，采用紫外-可見分光光度法測定其含量，此方法具有操作簡便，準確及可靠等優(yōu)點，符合分析的技術要求。

關鍵詞：雪蓮（Saussurea involucrata）；紙色譜；紫外-可見光譜；礦質元素

中圖分類號：O657.31文獻標識碼：A文章編號：0439-8114（2012）20-4619-02

清代《本草綱目拾遺》中稱雪蓮（Saussurea involucrata）“性大熱，能補精益陽”，《新疆中草藥》稱“雪蓮性溫、微苦，功能祛風除濕”。雪蓮是珍貴的藥用植物，含有揮發(fā)油、生物堿、甾醇、多酚、糖、鞣質、氨基酸、雪蓮內酯以及Fe、Co、Ni和Cu等礦質元素，具有除寒痰、壯陽補血、暖宮散瘀的功效，可治月經(jīng)不調，腎虛腰痛，祛風濕，通經(jīng)活血等癥[1，2]。目前，測定雪蓮中Fe、Co、Ni和Cu等礦質元素主要有原子吸收法[3-5]和絡合滴定法，前者所用儀器昂貴，后者測定結果重現(xiàn)性差。本研究采用紙色譜分離及紫外-可見分光光度法測定雪蓮中Fe、Co、Ni和Cu的含量，為快速分析藏藥雪蓮中的礦質元素提供參考。

1材料與方法

1.1儀器和試劑

752型紫外-可見光柵分光光度計（上海第三分析儀器廠）；馬弗爐（上海必爾得儀器有限公司）；微量毛細滴管，噴霧器。

層析紙：將層析紙與盛有展開劑的燒杯置于干燥器中，蓋嚴，讓層析紙在展開劑飽和的空氣中放置24 h，備用。

展開劑為丙酮∶濃鹽酸∶水（90∶5∶5，V/V），各組分比嚴格控制，相關容器干燥，鹽酸和水量用移液管取。

顯色劑為二硫代乙二酰胺，分別配制濃度為5 μg/mL的CoCl2、NiCl2、CuCl2、FeCl3溶液和它們的混合液。試驗用水均為去離子水，試劑均為AR級。

1.2方法

1.2.1試樣處理稱取1 g 雪蓮，于坩堝中烘干，先置于低溫電爐上炭化后，再轉入550 ℃馬弗爐中灰化2.5 h，取出冷卻，加入3.0 mL 濃HNO3溶解樣品，用去離子水定容至50 mL，備用。

1.2.2紙層析取13 cm × 16 cm濾紙為色譜紙，以16 cm邊為底邊，距離底邊2 cm處用鉛筆畫一條與其平行的基線，將紙折疊成8片，除左右最外兩片以外，在每片鉛筆線的中心位置依次寫上Fe3+、Co2+、Ni2+和Cu2+、混合物和未知樣品。用干凈的專用毛細管分別在色譜紙上點樣，每試樣的斑點直徑小于0.5 cm，自然干燥后，于層析筒內層析，其中展開劑液面應略低于色譜紙上鉛筆線，仔細記錄在層析過程中產(chǎn)生的現(xiàn)象。

1.2.3顯色當展開劑前沿上升離色譜紙頂部2 cm處停止色譜，取出色譜紙，用鉛筆標記展開前沿位置。在通風櫥內自然干燥色譜紙，干燥后在濃氨水瓶口熏5 min，然后噴霧器噴灑二硫代乙二酰胺顯色，層析紙從上到下得到4個清晰的斑點：Fe（棕黃）、Cu（灰綠）、Co（黃）和Ni（深藍）。

1.2.4色譜紙?zhí)幚盹@色后，分別剪下標準和試樣斑點，放入800 ℃的馬弗爐灰化15 min，冷卻后加入5 mL濃硝酸，加熱溶解。

1.2.5吸收曲線繪制分別取5 μg/mL CoCl2、NiCl2、CuCl2和FeCl3標準溶液12 mL，定容至50 mL，分別加入1-亞硝基-2-萘酚-3，6磺酸、丁二酮肟、銅試劑和磺基水楊酸2.5 mL后，以去離子水定容。用1 cm的吸收池，以試劑空白為參比，從460～640 nm每隔10 nm測定吸光度（520～580 nm，每隔5 nm測量1次），以波長為橫坐標，吸光度為縱坐標繪制各溶液的吸收曲線，確定最大檢測波長。

2結果與分析

2.1Co2+、Ni2+、Cu2+和Fe3+的混合液配制

4種標準物質標準溶液的配制不能采用硝酸鹽溶液，須用其氯化鹽溶液，否則各組分的斑點不集中，影響測定判定。

2.2檢測波長的確定

標準溶液在不同波長下測定吸光度見圖1。

從吸收光譜圖可以確定出CoCl2、NiCl2、CuCl2和FeCl3標準溶液測量的最大波長分別為560、580、560和520 nm。

2.3顯色劑的用量選擇

預試驗表明，2.0～3.0 mL的顯色劑可使配合物的吸光度基本恒定，后續(xù)試驗確定顯色劑使用體積為2.5 mL。

2.4標準曲線的繪制

用移液管分別吸取不同體積（0～12 mL）的5 μg/mL CoCl2、NiCl2、CuCl2和FeCl3標準溶液于50 mL容量瓶中，分別加入2.5 mL的1-亞硝基-2-萘酚-3，6磺酸、丁二酮肟、銅試劑和磺基水楊酸顯色劑，分別在560、580、560和520 nm測其吸光度（圖2）。

以吸光度y為縱坐標，以離子濃度x為橫坐標，繪制標準曲線（圖1），其中Co的標準曲線方程為y =0.092 7x-0.095 9（R2=0.999 5）；Ni的標準曲線方程為y=0.107 3x-0.103 6（R2=0.999 8）；Cu的標準曲線方程為y= 0.141 0x-0.136 6（R2= 0.999 9）；Fe的標準曲線方程為y=0.092 9x-0.093 0（R2=1.000 0）；其R2>0.999 0，表明該方法在0～1.2 μg/mL范圍內的線性關系良好。

2.5方法的準確度和精密度

用標準加入法對樣品進行回收試驗，雪蓮試樣平行測定6次，測定其吸光度，計算濃度，平均濃度和相對標準偏差，結果見表1。由表1可知，本方法的準確度高。

3結論

本研究方法所用的儀器常見、操作簡單、準確，符合測定結果和分析的技術要求，適用于藏藥雪蓮等藥物中礦質元素的分離與測定。從測定結果來看，藏藥雪蓮中Fe的含量較高，因此在補血方面具有較好的功效。

參考文獻：

[1] 王俊.保健蔬菜——雪蓮果.中國果菜，2007（2）：45.

[2] 孔祥瑞.必需微量元素的營養(yǎng)、生理及臨床意義[M].合肥：安徽科學技術出版社，1982.51.

[3] 李濤，王元忠，劉鴻高.巨大口蘑中微量元素的光譜測定[J]. 光譜學與光譜分析，2008，28（2）：450-452.

[4] 張虹，白紅麗，王寶森，等.雪蓮果不同部位中微量元素的分析[J].食品科技，2010，35（2）：275-279.

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