氟環唑30%懸浮劑在葡萄和土壤中的殘留動態研究

蘭騰芳　鄭尊濤　李俊凱　陳立　方祖凱　杜鐵鋼

摘要：分析了氟環唑（Epoxiconazole）30%懸浮劑在不同地區葡萄中的殘留消解動態以及收獲期葡萄中的最終殘留量，為制定氟環唑在葡萄上合理使用提供科學依據。建立了乙酸乙酯或乙腈超聲提取，經弗羅里硅土柱凈化，采用反相高效液相色譜法分析氟環唑殘留的方法。該懸浮劑在葡萄和土壤中的半衰期分別為15.9 ～17.2 d和21.2～32.5 d；在最后一次施藥后30 d和40 d時葡萄中的殘留量為0.05 ～0.33 mg/kg。結果表明，按推薦劑量施藥，每季最多使用3次，距最后一次施藥30 d時葡萄中的殘留量低于0.5 mg/kg，推薦氟環唑在葡萄上的最高殘留限量為 0.5 mg/kg。

關鍵詞：氟環唑（Epoxiconazole）；消解動態；葡萄；土壤

中圖分類號：S482.2；O657.7文獻標識碼：A文章編號：0439-8114（2012）20-4613-03

氟環唑（商品名：歐博；英文通用名：Epoxiconazole），是一種內吸性三唑類殺菌劑，由德國巴斯夫公司1983年開發[1]。它可抑制病菌麥角甾醇的合成，阻礙病菌細胞壁的形成，提高幾丁質酶活性，導致真菌吸器的收縮，抑制病菌侵入。對一些禾谷類作物病害具有較好防效[2]，可用于防治香蕉、芹菜、韭菜的葉斑病，瓜類豆類的白粉病，葡萄的炭疽病、白腐病、立枯病等[3]。目前，已有氟環唑殘留分析的報道。孫海濱等[4]研究了氟環唑在香蕉和土壤中的消解動態，氣相色譜-氮磷檢測器進行定量分析。汪紅等[5]使用乙腈進行提取，弗羅里硅土固相萃取小柱進行凈化及GC-ECD檢測，該方法的回收率高，重現性好。沈偉健等[6]報道了氣相色譜-負化學離子源質譜測定大豆和玉米中氟環唑等12種三唑類殺菌劑的殘留量。關于氟環唑在葡萄上的消解動態研究目前國內尚未見到報道。本研究選擇北京和杭州進行兩年田間試驗，采用超聲波輔助提取，弗羅里硅土小柱凈化，高效液相色譜-紫外檢測器，建立了氟環唑的液相色譜分析方法，為準確分析葡萄中的氟環唑殘留提供參考。

1材料與方法

1.1儀器與試劑

Agilent 1200型HPLC儀（美國Agilent公司，配紫外檢測器），KQ-600型超聲波清洗器（昆山市超聲儀器公司），OSB-2000型旋轉蒸發儀（上海愛朗儀器有限公司），TDL-40B型離心機（江蘇瑞江離心機廠），PICO-17型離心機（美國Thermo Fisher科技公司），弗羅里硅土小柱（艾杰爾 1 000 mg/6 mL）。

純度≥99%的氟環唑標準品由上海市農藥研究所提供；乙腈為色譜純，其他試劑均為分析純試劑。

1.2方法

1.2.1氟環唑在葡萄上殘留消解動態試驗葡萄生長至半果大時，以375 mg.a.i/kg（制劑800倍稀釋）的劑量噴霧1次，于施藥后0、1、3、5、7、10、14、21、30和45 d，采集葡萄樣品，測定氟環唑在葡萄上的殘留消解半衰期。

1.2.2氟環唑在土壤中殘留消解動態試驗選15 m2白地，以200 mg.a.i/m2噴霧施藥1次，于施藥后0、1、3、5、7、10、14、21、30、45和60 d，采集0～10 cm表層土，測定氟環唑在土壤中的殘留消解半衰期。

1.2.3最終殘留的田間試驗在葡萄幼果期以后，以100.0～187.5 mg.a.i/kg（制劑333.3～625.0 mg/kg，3 000～1 600倍稀釋），噴霧2～3次，施藥間隔10 d，于施藥后30 d和40 d采收葡萄樣品。

1.2.4標準曲線的制作稱取氟環唑標準品于25 mL容量瓶中，乙腈溶解，配制成1 000 mg/L母液，并稀釋成不同濃度的標準工作液，4 ℃保存待用。

1.2.5葡萄樣品的提取與凈化 準確稱取10.00 g葡萄樣品于50 mL塑料離心管中，加入20 mL乙酸乙酯，渦旋1 min，超聲提取10 min，3 500 r/min離心3 min，取上清液10 mL于100 mL 茄形瓶中，旋蒸近干；過弗羅里硅土小柱凈化。小柱分別先用5 mL 重蒸石油醚∶丙酮7∶3（V/V）和5 mL石油醚淋洗，再用15 mL重蒸石油醚∶丙酮7∶3（V/V）溶解殘渣，收集洗脫液，濃縮近干，乙腈定容至2.5 mL，過膜，待測。

1.2.6土壤樣品的提取與凈化準確稱取10.00 g 樣品于50 mL離心管中，加20 mL乙腈，渦旋1 min，超聲10 min提取，準確加入5 g NaCl，手搖1 min，3 500 r/min 離心3 min，取上清液10 mL于100 mL 茄形瓶中，減壓旋蒸近干；過弗羅里硅土小柱凈化，小柱先用5 mL重蒸石油醚∶丙酮7∶3（V/V）活化，5 mL石油醚淋洗，再用重蒸石油醚∶丙酮（7∶3，V/V）15 mL 溶解殘渣，收集洗脫液，濃縮近干，乙腈定容至2.5 mL，過膜，待測。

1.2.7測定條件色譜柱Agilent HC-C18 4.6 mm×250.0 mm，5 μm ，流動相為乙腈∶水=55∶45（V/V），流速為0.8 mL/min；檢測波長215 nm；進樣量20 μL，柱溫為室溫。

2結果與分析

2.1檢測方法的回收率、最小檢出限及線性范圍

分別在空白葡萄及土壤樣品中加入氟環唑標準樣品，添加濃度分別為0.05、0.50和2.00 mg/kg，設3個平行，色譜圖見圖1，3個添加水平氟環唑的回收率為81%～101%，變異系數<9.98%（表1）。氟環唑的最小檢出限為0.005 mg/kg。

在該色譜條件下，對0.05～5.00 mg/L的標準溶液進行測定，氟環唑峰面積與進樣濃度間呈良好線性關系，在葡萄和土壤基質中標準樣品的線性方程分別為：y=87.843x+16.457；y=89.361x+12.205，相關系數分別為0.999 2和0. 999 3，保留時間約為13.8 min。

2.2氟環唑在葡萄和土壤中的殘留消解動態

氟環唑在北京和杭州兩地葡萄中的原始沉積量分別為0.97和1.42 mg/kg，在兩地土壤中的原始沉積量分別為2.48和0.41 mg/kg。數據顯示隨著時間的延長氟環唑的殘留量逐漸下降。藥后間隔期與葡萄和土壤中殘留量呈指數關系，根據殘留動態曲線方程Ct=C0e-kt得到列于表2的消解動態回歸方程。

2.3氟環唑在葡萄和土壤中的最終殘留量試驗

經2011年兩地試驗，氟環唑按推薦劑量和高劑量施藥2和3次，間隔30和40 d采收，檢測結果如下：間隔30 d的葡萄中的殘留量為0.06～0.33 mg/kg，間隔40 d為0.05 mg/kg。土壤中氟環唑殘留量間隔30 d為0.21～0.52 mg/kg，間隔40 d為 0.06～0.25 mg/kg。

3結論

田間試驗結果表明，氟環唑在葡萄中的半衰期分別為17.2 d（北京）和15.9 d（杭州），與在香蕉（半衰期為7.2～9.9 d）、蘋果[7]中（半衰期為8.2～11.5 d）相比，半衰期相對較長，主要原因可能與試驗期間降雨量大小、次數以及光照條件等環境因素有關。

目前，日本規定谷類中氟環唑最高殘留限量值為0.5 mg/kg；澳大利亞規定梨中氟環唑最高殘留允許量值為0.5 mg/kg，香蕉中氟環唑最高殘留允許量值為1.0 mg/kg；新西蘭規定水果中氟環唑最高殘留允許量值為0.1 mg/kg；中國尚未制定氟環唑在葡萄中的最高殘留允許量值。因此，在本試驗的基礎上，參考世界各國對氟環唑的最高殘留允許量值，建議設立葡萄上氟環唑的最高殘留限量為0.5 mg/kg。

參考文獻：

[1] 劉麗秀，張魯新，張亞敏.氟環唑的合成工藝與研究進展[J].山東化工，2009，38（4）：28-30.

[2] 江才鑫，陳祖偉，楊琳榮.氟環唑的合成綜述[J].浙江化工，2006，37（10）：9-10.

[3] 張秀珍.氟環唑在我國的登記情況[J].山東農藥信息，2012（2）：10.

[4] 孫海濱，劉艷，劉景梅.氟環唑在香蕉和土壤中的殘留消解動態[J].農藥，2011，50（3）：206-208.

[5] 汪紅，李瑾，許超，等.氣相色譜測定蔬菜水果中氟環唑的殘留量[J].食品工業科技，2009，30（12）：270-275.

[6] 沈偉健，桂茜雯，余可垚，等.氣相色譜-負化學離子源質譜測定大豆和玉米中12種三唑類殺菌劑的殘留量[J].色譜，2009，27（1）：91-95.

[7] 劉良柱，許應明，黃永春，等.氟環唑在蘋果及土壤中的殘留動態研究[J].現代科學儀器，2007（1）：61-63.