豬Dlx5基因多態性及其與豬體尺和胸椎數的關系

邢晉祎 戈新 王建華 孫力

摘要：為探討豬遠端缺失基因５（ｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓ ｈｏｍｅｏｂｏｘ ５，Ｄｌｘ５）的多態性、群體分布特性及其與體尺和胸椎數的關系，采用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ方法檢測了豬Ｄｌｘ５基因ｇ．３９４Ｃ＞Ｔ位點在６個中外豬品種中的多態性分布，并分析了該位點與豬體尺和胸椎數的關系。檢測結果表明，經ＨｈａⅠ酶切后在６個豬品種群體均發現了ＣＣ、ＣＴ和ＴＴ ３種基因型，其中Ｃ等位基因在萊蕪黑豬中為優勢等位基因，而Ｔ等位基因在里岔黑豬、魯萊黑豬、杜洛克豬、大約克豬和長白豬中占優勢。在該多態性位點，萊蕪黑豬、里岔黑豬、魯萊黑豬、杜洛克和長白豬群體均處于哈代—溫伯格平衡（Ｐ＞０．０５），而大約克豬群體偏離平衡狀態（Ｐ＜０．０５）；基因型在群體間的分布差異極顯著（Ｐ＜０．０１）。群體遺傳特性分析表明，有效等位基因數在１．２５４～１．９９１之間；杜洛克豬的多態信息含量為０．１８２，屬于低度多態，其余品種均在０．２５４～０．３７４之間，屬于中度多態。關聯分析結果表明，該多態性位點對萊蕪黑豬體長、體高、屠前活重、腹圍、胸圍、腿臀圍和胸椎數以及里岔黑豬胸椎數的影響均不顯著（Ｐ＞０．０５）。Ｄｌｘ５基因ｇ．３９４Ｃ＞Ｔ位點在豬群中存在多態，基因型分布在萊蕪黑豬與其他豬種間不同，與豬體尺和胸椎數無顯著關聯。

關鍵詞：豬；遠端缺失基因５（ｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓ ｈｏｍｅｏｂｏｘ ５，Ｄｌｘ５）；多態性；體尺；胸椎

中圖分類號：Ｓ８２８．８＋９文獻標識碼： Ａ 文章編號：0439－８114（２０12）03－0552-04

Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ ｏｆ Ｄｉｓｔａｌ－lｅｓｓ Ｈｏｍｅｏｂｏｘ ５ （Ｄlx５） Ｇｅｎｅ ｉｎ Ｐｉｇｓ ａｎｄ Ｉｔｓ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｗｉｔｈ Ｂｏｄｙ Ｓｉｚｅｓ ａｎｄ Ｔｈｏｒａｃｉｃ Ｓｐｉｎｅ Ｎｕｍｂｅｒｓ

ＸＩＮＧ Ｊｉｎ－ｙｉ１，ＧＥ Ｘｉｎ２，ＷＡＮＧ Ｊｉａｎ－ｈｕａ２，ＳＵＮ Ｌｉ３

（１． Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ， Ｌｉｎｙｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｌｉｎｙｉ ２７６００５， Ｓｈａｎｄｏｎｇ， Ｃｈｉｎａ； ２． Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ａｎｉｍａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ of Qingdao， Ｑｉｎｇｄａｏ ２６６１００，Ｓｈａｎｄｏｎｇ，Ｃｈｉｎａ； ３． Ｓｔａｔｉｏｎ ｏｆ Ａｎｉｍａｌ Ｈｕｓｂａｎｄｒｙ ａｎｄ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｍｅｄｉｃｉｎｅof Qingdao， Ｑｉｎｇｄａｏ ２６６０７１，Ｓｈａｎｄｏｎｇ，Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｔｈｉｓ ｓｔｕｄｙ ｗａｓ ｃｏｎｄｕｃｔｅｄ ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ， ｇｅｎｅｔｉｃ ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ ｏｆ ｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓ ｈｏｍｅｏｂｏｘ ５ ｇｅｎｅ （Ｄlx５） ｉｎ ｐｉｇｓ ａｎｄ ｉｔｓ ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎｓ ｗｉｔｈ ｂｏｄｙ ｓｉｚｅｓ ａｎｄ ｔｈｏｒａｃｉｃ ｓｐｉｎｅ ｎｕｍｂｅｒｓ． Ｔｈｅ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ ｏｆ ｇ．３９４Ｃ＞Ｔ ｌｏｃｉ． ｉｎ Ｄｌｘ５ ｇｅｎｅ ｏｆ ６ ｂｒｅｅｄｓ ｏｆ ｐｉｇｓ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｙ ＰＣＲ－ＲＦＬＰ ａｎｄ ｔｈｅ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｂｅｔｗｅｅｎ ｔｈｅ Ｄｌｘ５ ｇｅｎｏｔｙｐｅｓ ａｎｄ ｂｏｄｙ ｓｉｚｅｓ ａｎｄ ｔｈｏｒａｃｉｃ ｓｐｉｎｅ ｎｕｍｂｅｒｓ ｗｅｒｅ ａｎａｌｙｚｅｄ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅｒｅ were ｔｈｒｅｅ ｇｅｎｏｔｙｐｅｓ ｓｕｃｈ ａｓ ＣＣ， ＴＣ ａｎｄ ＴＴ ｉｎ ｔｈｅ ６ ｐｉｇ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ found ｂｙ ｅｎｚｙｍｅ ｄｉｇｅｓｔｉｏｎ ｏｆ ＨｈａⅠ． Ａｌｌｅｌｅ Ｃ ｗａｓ ｄｏｍｉｎａｎｔ ｉｎ Ｌａｉｗｕ ｂｌａｃｋ ｐｉｇｓ， ａｎｄ ａｌｌｅｌｅ Ｔ ｗａｓ ｄｏｍｉｎａｎｔ ｉｎ Ｌｉｃｈａ ｂｌａｃｋ ｐｉｇｓ， Ｌｕｌａｉ ｐｉｇｓ， Ｄｕｒｏｃ ｐｉｇｓ， Ｙｏｒｋｓｈｉｒｅ ｐｉｇｓ ａｎｄ Ｌａｎｄｒａｃｅ ｐｉｇｓ， ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ． Ａ ｃｈｉ－ｓｑｕａｒｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｇｅｎｏｔｙｐｅ ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ ｉｎ ｔｈｉｓ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ ｌｏｃｉ． ｉｎ Ｌａｉｗｕ ｂｌａｃｋ ｐｉｇｓ， Ｌｉｃｈａ ｂｌａｃｋ ｐｉｇｓ， Ｌｕｌａｉ Ｂｌａｃｋ ｐｉｇｓ， Ｄｕｒｏｃ ｐｉｇｓ ａｎｄ Ｌａｎｄｒａｃｅ ｐｉｇｓ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ ｗｅｒｅ ｉｎ Ｈａｒｄｙ－Ｗｅｉｎｂｅｒｇ ｅｑｕｉｌｉｂｒｉｕｍ （Ｐ＞０．０５）， ｗｈｅｒｅａｓ ｗａｓ ｎｏｔ ｉｎ Ｙｏｒｋｓｈｉｒｅ ｐｉｇｓ （Ｐ＜０．０５）． Ｔｈｅ ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ ｏｆ ＣＣ， ＴＣ ａｎｄ ＴＴ ｇｅｎｏｔｙｐｅｓ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ （Ｐ＜０．０１） ａｍｏｎｇ ｓｉｘ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ． Ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ ｇｅｎｅｔｉｃｓ ａｎａｌｙｓｉｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ａｌｌｅｌｅｓ ｗｅｒｅ ｒａｎｇｅｄ ｆｒｏｍ １．２５４ ｔｏ １．９９１． Ｔｈｅ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｃｏｎｔｅｎｔ （ＰＩＣ）ｉｎ Ｄｕｒｏｃ ｐｉｇｓ ｗａｓ ０．１８２ ｗｈｉｃｈ ｗａｓ ｉｎ ｌｏｗ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ， ｗｈｉｌｅ ｉｔ ｗａｓ ｒａｎｇｅｄ ｆｒｏｍ ０．２５４～０．３７４ ｉｎ ｏｔｈｅｒ ｐｉｇｓ ｗｈｉｃｈ ｗａｓ ｉｎ ｍｏｄｅｒａｔｅ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ． Ｔｈｅ ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ａｎａｌｙｓｉｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ Ｄｌｘ５ ｇ．３９４Ｃ＞Ｔ ｍｕｔａｔｉｏｎ ｗａｓ ｎｏｔ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｂｏｄｙ ｌｅｎｇｔｈ， ｈｅｉｇｈｔ ａｔ ｗｉｔｈｅｒｓ， ｌｉｖｅ ｗｅｉｇｈｔ， ａｂｄｏｍｉｎａｌ ｃｉｒｃｕｍｆｅｒｅｎｃｅ， ｃｈｅｓｔ ｃｉｒｃｕｍｆｅｒｅｎｃｅ， ｈｉｐ ｃｉｒｃｕｍｆｅｒｅｎｃｅ ａｎｄ ｎｕｍｂｅｒｓ ｏｆ ｔｈｏｒａｃｉｃ ｓｐｉｎｅ ｏｆ Ｌａｉｗｕ ｂｌａｃｋ ｐｉｇｓ ａｎｄ ｎｕｍｂｅｒｓ ｏｆ ｔｈｏｒａｃｉｃ ｓｐｉｎｅ ｏｆ Ｌｉｃｈａ ｂｌａｃｋ ｐｉｇｓ（Ｐ＞０．０５）． Ｉｔ ｉｎｄｉｃａｔｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅｒｅ ｔｈｅ ｇ．３９４Ｃ＞Ｔ ｌｏｃｉ ｉｎ Ｄｌｘ５ ｇｅｎｅ ｗｅｒｅ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ ｉｎ ｔｈｅ ｓｉｘ ｐｉｇ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ ａｎｄ ｔｈｅ ｇｅｎｏｔｙｐｅ ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ ｉｎ Ｌａｉｗｕ ｂｌａｃｋ ｐｉｇｓ ｗｅｒｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｗｉｔｈ ｏｔｈｅｒ ｂｒｅｅｄｓ． Ａｎｄ ｎｏ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｗａｓ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｅｔｗｅｅｎ ｔｈｅ ｌｏｃｉ. ａｎｄ ｂｏｄｙ ｓｉｚｅｓ ａｎｄ ｔｈｏｒａｃｉｃ ｓｐｉｎｅ ｎｕｍｂｅｒｓ ｉｎ ｐｉｇｓ．

Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： pｉｇ； dｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓ ｈｏｍｅｏｂｏｘ ５ ｇｅｎｅ； pｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ； bｏｄｙ ｓｉｚｅｓ； tｈｏｒａｃｉｃ ｓｐｉｎｅ

遠端缺失基因（Ｄｉｓｔａｌ－ｌｅｓｓ ｈｏｍｅｏｂｏｘ，Ｄｌｘ）主要調控動物遠近軸的發育。其中，脊椎動物Ｄｌｘ基因編碼一種保守性較高的轉錄因子，在軟骨和骨骼的形成中可能發揮一定作用。Ｄｌｘ５在骨骼發育的早期開始表達，能直接激活骨骼形成和間接激活骨骼吸收以及促進骨折愈合，是骨骼更新的重要調控子［１，２］。研究發現，豬Ｄｌｘ５基因外顯子１存在一個單核苷酸多態性（ＳＮＰ）（ＥＵ１６８２７２： ｇ．３９４Ｃ＞Ｔ），豬群中存在ＴＴ、ＴＣ和ＣＣ ３種基因型，與豬的部分胴體性狀有關［３］。但該多態位點與胸椎數及其相關性狀的關系未見報道。因此，本研究分析了該多態性位點在６個中外豬種中的多態性，并分析了其與萊蕪黑豬體尺和胸椎數以及與里岔黑豬胸椎數的關系，以期為闡明Ｄｌｘ５在豬重要經濟性狀形成中的作用奠定基礎，為發掘地方豬種的基因資源及培育新品系提供理論依據。

１材料與方法

１．１試驗材料

本試驗所用的３個山東地方／培育豬種，分別為萊蕪黑豬２６頭和魯萊黑豬（大約克♂×萊蕪黑豬 ♀）３０頭（采自山東省萊蕪黑豬原種豬場），里岔黑豬７５頭（采自山東省膠州市里岔黑豬育種中心）。３個引進豬種分別為杜洛克豬７０頭、大約克豬６２頭和長白豬３９頭（采自山東省農業科學院畜牧研究所良種豬育種中心）。所有試驗豬飼喂同一日糧、自由采食，飼養管理、防疫措施一致。采集豬耳組織放入７０％乙醇中，－２０ ℃保存。

１．２試驗方法

１．２．１ＤＮＡ提取豬耳組織中基因組ＤＮＡ提取按常規苯酚／氯仿方法進行，０．８％瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測基因組的濃度和純度，－２０ ℃保存。

１．２．２性能測定對達到３６５日齡的２６頭萊蕪黑豬測定體長、屠前活體質量、腹圍、胸圍、腿臀圍和胸椎數，測定方法根據《種豬測定原理與方法》進行［４］。對達到１００ ｋｇ左右的７５頭里岔黑豬屠宰，記錄胸椎數。

１．２．３ＰＣＲ擴增引物參照Ｃｈｅｎｇ等［３］序列，由上海生工生物工程技術有限公司合成。引物序列為：Ｆ：５′－ＧＣＣＡＣＣＧＣＣＡＧＴＧＡＡＴＧＡ－３′，Ｒ：５′－ＴＡＴＣＴＧＴＣＣＣＣＡＣＣＣＣＣＡＣ－３′。ＰＣＲ反應體系：１０×ＰＣＲ Bｕｆｆｅｒ ２．５ μＬ，ＭｇＣｌ２（２５ ｍｍｏｌ／Ｌ）２ μＬ，ｄＮＴＰｓ（各２．５ ｍｍｏｌ／Ｌ）２ μＬ（ＴａＫａＲａ），上下游引物（２５ μｍｏｌ／Ｌ）各０．４ μＬ，ｒＴａｑ ＤＮＡ聚合酶（５ Ｕ／μＬ）０．２ μＬ（ＴａＫａＲａ），基因組ＤＮＡ（５０～１００ ｎｇ／μＬ）１ μＬ，滅菌超純水加至２５ μＬ。ＰＣＲ擴增程序：９４ ℃ ４ ｍｉｎ，然后９４ ℃ ３０ ｓ，６０ ℃ ３０ ｓ，７２ ℃ ４０ ｓ，進行３５個循環，７２ ℃ １０ ｍｉｎ。ＰＣＲ產物用１．５％瓊脂糖凝膠電泳檢測。

１．２．４ＰＣＲ－ＲＦＬＰ在４ μＬ ＰＣＲ產物中加入４ Ｕ的ＨｈａⅠ內切酶（ＴａＫａＲａ），１０×M Bｕｆｆｅｒ １ μＬ，滅菌超純水加至１０ μＬ，３７ ℃水浴消化６ ｈ，１．５％瓊脂糖凝膠電泳檢測，觀察和記錄酶切結果，判斷個體的基因型。

１．２．５ＰＣＲ產物測序經ＨｈａⅠ內切酶酶切后，對不同基因型個體的ＰＣＲ產物用柱式膠回收試劑盒回收純化，回收后的ＰＣＲ產物送上海生工生物工程技術服務公司直接測序。

１．３統計分析

統計ＨｈａⅠ酶切后的各種基因型，用ＰｏｐＧｅｎ３２軟件計算基因頻率、遺傳純合度（Ｈ０）、遺傳雜合度（Ｈｅ）、有效等位基因數（Ｎｅ），并作χ２適合性和獨立性檢驗；用軟件ＰＩＣ＿Ｃａｌｃ ０．６計算多態信息含量（ＰＩＣ）。根據固定效應模型，用ＳＡＳ ８．２軟件ＧＬＭ程序對萊蕪黑豬不同基因型個體體尺和胸椎數以及里岔黑豬胸椎數的最小二乘均值進行估計和顯著性檢驗。統計分析模型為：Ｙｉｊ＝μ＋Ｇｉ＋Ｓｊ＋ｅｉｊ，其中Ｙｉｊ為性狀表型值，μ為群體平均值，Ｇｉ為基因型效應，Ｓｊ為性別效應，ｅｉｊ為殘差效應。

２結果與分析

２．１Ｄｌｘ５基因ＰＣＲ擴增和ＨｈａⅠ酶切結果

以豬耳組織ＤＮＡ為模板，經ＰＣＲ擴增，得到１條３９９ ｂｐ的特異性條帶（圖１），與根據ＧｅｎＢａｎｋ登錄序列計算的片段大小相同。ＰＣＲ產物經ＨｈａⅠ限制性內切酶酶切后，得到３種基因型（圖１），分別為ＴＴ（３９９ ｂｐ），ＴＣ（３９９／２２２／１７７ ｂｐ），ＣＣ（２２２／１７７ ｂｐ）。

２．２不同基因型的序列差別

測序結果表明，豬Ｄｌｘ５基因３９４位堿基Ｃ→Ｔ，通過與人、小鼠、大鼠和雞Ｄｌｘ５基因比對發現，這些物種在該位點均為Ｃ，３種基因型測序結果如圖２所示。

２．３不同豬種Ｄｌｘ５基因的基因型和基因頻率及群體χ２檢驗

根據ＨｈａⅠ內切酶酶切結果，統計６個豬群的基因型和基因頻率分布見表１。從表１可知，每個群體均檢測到３種基因型，在萊蕪黑豬中Ｃ為優勢等位基因，而魯萊黑豬Ｔ為優勢等位基因，ＴＣ在這兩個豬種中均為優勢基因型；在里岔黑豬、杜洛克豬和大約克豬中Ｔ為優勢等位基因，ＴＴ為優勢基因型；在長白豬中也是Ｔ為優勢等位基因，ＴＴ和ＴＣ均為優勢基因型，其基因型頻率均為０．４３６。

經χ２適合性檢驗發現，除了大約克豬外，其余群體基因型分布均達到了哈代—溫伯格平衡（Ｐ＞０．０５）（表１）。經χ２獨立性檢驗，不同基因型在群體間的分布差異極顯著（Ｐ＜０．０１，χ２＝６１．６６＞χ２０．０１（１０）＝２３．２０９）（表２）。由表２可知，萊蕪黑豬與里岔黑豬、杜洛克豬、大約克豬差異極顯著（Ｐ＜０．０１）；里岔黑豬與魯萊黑豬、杜洛克豬和大約克豬差異極顯著（Ｐ＜０．０１）；魯萊黑豬與杜洛克豬差異極顯著（Ｐ＜０．０１），與大約克豬差異顯著（Ｐ＜０．０５）；杜洛克豬與大約克豬和長白豬差異極顯著（Ｐ＜０．０１）；大約克豬與長白豬之間差異極顯著（Ｐ＜０．０１），其余豬種之間差異均不顯著（Ｐ＞０．０５）。

２．４Ｄｌｘ５基因的遺傳特性分析

Ｄｌｘ５基因在６個豬群的遺傳特性分析見表３。結果表明，所檢測各群體的雜合度（Ｈｅ）較大，雜合度由低到高依次為杜洛克、里岔黑豬、大約克豬、長白豬、魯萊黑豬、萊蕪黑豬。多態信息含量（ＰＩＣ）分析結果表明，除杜洛克豬ＰＩＣ＜０．２５０，處于低度多態外，其余各群體ＰＩＣ均在０．２５0～０．５０0之間，表明該位點在這５個豬種中均處于中度多態。

２．５Ｄｌｘ５基因不同基因型與萊蕪黑豬體尺和胸椎數的關聯分析

在對萊蕪黑豬Ｄｌｘ５基因ｇ．３９４Ｃ＞Ｔ位點多態性檢測的基礎上，對２６頭萊蕪黑豬體尺和胸椎數與該位點多態性的關系進行了分析（表４）。結果顯示，３種基因型ＴＴ、ＴＣ和ＣＣ對萊蕪黑豬體尺和胸椎數影響均不顯著（Ｐ＞０．０５）。

２．６Ｄｌｘ５基因不同基因型與里岔黑豬胸椎數的關聯分析

對７５頭里岔黑豬胸椎數關聯分析結果表明（表5），ＴＴ、ＴＣ和ＣＣ ３種基因型對里岔黑豬胸椎數影響同樣未達到差異顯著的水平（Ｐ＞０．０５）。

３討論

３．１Ｄｌｘ５基因多態性在不同豬群中的遺傳分析

研究表明Ｄｌｘ５基因的失活可以使小鼠顱面骨、中軸骨和附肢骨骼異常，導致圍產期小鼠死亡［５］，所以Ｄｌｘ５基因對于調節哺乳動物肢體的發育起著非常重要的作用。本研究對同源盒基因Ｄｌｘ５外顯子１的多態性在不同豬群中的分布進行了檢測，在所檢測的６個豬群中均發現了３種基因型，但等位基因Ｔ和Ｃ在不同豬群存在一定差異。在萊蕪黑豬中Ｃ等位基因占優勢，但在其他豬種中均是Ｔ等位基因占優勢，而Ｃｈｅｎｇ等［３］在所檢測的３１０頭大約克豬×梅山豬的雜交Ｆ２代中卻是Ｃ等位基因占優勢。經序列分析發現在人（ＧｅｎＢａｎｋ Ｎｏ：ＮＭ＿００５２２１．５）、小鼠（ＧｅｎＢａｎｋ Ｎｏ：ＮＭ＿１９８８５４．１，ＮＭ＿０１００５６．２）、大鼠（ＧｅｎＢａｎｋ Ｎｏ：ＮＭ＿０１２９４３．１）和雞（ＧｅｎＢａｎｋ Ｎｏ： ＮＭ＿２０４１５９．１）Ｄｌｘ５基因的該位點也是Ｃ等位基因占優勢。本研究之所以與上述研究和其他動物Ｄｌｘ５基因在該位點存在差異，可能與動物品種有關。

３．２Ｄｌｘ５基因多態性與萊蕪黑豬體尺和胸椎數的關系

研究表明，Ｄｌｘ５基因能直接調節谷氨酸脫氫酶的表達和促進ＧＡＢＡｅｒｇｉｃ（ｇ－ａｍｉｎｏｂｕｔｙｒｉｃ ａｃｉｄ ｅｒｇｉｃ）神經元的分化［６］，并且已經證明Ｄｌｘ５在人類淋巴母細胞核和大腦組織中具有印記效應［７］，但Ｋｉｍｕｒａ等［８］認為在小鼠腦中不存在印記效應。最近的研究表明，Ｄｌｘ５基因在雜交豬的骨骼肌、脂肪、肺、胃和小腸中呈母性表達，而在心、肝、腎、子宮、卵巢、睪丸或者垂體中不存在印記效應［３］。而印記基因在調控哺乳動物胎兒生長、發育和胎盤的功能以及出生后的行為方面具有重要的功能。Ｄｌｘ５基因外顯子１Ｃ→Ｔ的突變導致丙氨酸變為纈氨酸，這可能改變蛋白質的結構，而蛋白質結構的變化可能影響到骨骼的發育和生長激素的分泌［３］。

豬體長與胸椎和腰椎的數量有關，其胸腰椎骨數一般在２０枚左右，一般每增加１枚椎骨數，體長可以增加１．８４ ｃｍ。豬椎骨數的遺傳力為０．７５，胴體長與椎骨數有強的遺傳相關［９］。本試驗中萊蕪黑豬ＴＣ基因型個體胸椎數多于ＴＴ和ＣＣ基因型個體，而里岔黑豬ＴＴ基因型胸椎數稍多于ＴＣ基因型，但均未達到差異顯著水平（Ｐ＞０．０５），是否ＴＴ或者ＴＣ基因型對豬的脊椎發育起著一定的作用，尚需進一步研究。此前，Ｃｈｅｎｇ等［３］發現雜交豬（大白豬×梅山豬）Ｆ２代資源家系的不同基因型胴體長、骨骼百分比、平均背膘厚等性狀呈極顯著差異，而本研究不同基因型其體尺差異卻不顯著，可能與樣本含量較少有關。另外，最近研究發現ＢＭＰ－２蛋白能促進Ｄｌｘ５ ｍＲＮＡ表達水平增高［１０］，而屬于ＢＭＰｓ亞家族的ＧＤＦ１１基因在確立骨骼模式中起著重要作用，ＧＤＦ１１基因缺失的小鼠表現為胸腰脊椎數增加［１１，１２］。豬ＢＭＰ－２、ＧＤＦ１１與Ｄｌｘ５間的關系值得進一步探討。

致謝：在試驗過程中得到２００９屆畢業生王留強和胡劉巖同學以及２００８級生物技術專業賈坤航同學的幫助，在此表示感謝！

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［１２］ ＭＣＰＨＥＲＲＯＮ Ａ Ｃ， ＬＡＷＬＥＲ Ａ Ｍ， ＬＥＥ Ｓ Ｊ． Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ａｎｔｅｒｉｏｒ／ｐｏｓｔｅｒｉｏｒ ｐａｔｔｅｒｎｉｎｇ ｏｆ ｔｈｅ ａｘｉａｌ ｓｋｅｌｅｔｏｎ ｂｙ ｇｒｏｗｔｈ ／ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｆａｃｔｏｒ １１ ［Ｊ］． Ｎａｔ Ｇｅｎｅｔ，１９９９，２２（３）：２６０－２６４．

（責任編輯曾德芳）

收稿日期：２０１１－０７－０７

基金項目：山東省青島市基礎研究計劃項目（０９－１－３－６４－ｊｃｈ）；臨沂大學博士啟動基金項目（ＢＳ０８０１９）

作者簡介：邢晉祎（１９６８－），男，山東曹縣人，副教授，博士，主要從事動物分子遺傳研究，（電話）１５８６４９９２８０７（電子信箱）ｊｙｘｉｎｇ０２＠ｇｍａｉｌ．ｃｏｍ；

通訊作者，戈新（１９５７－），研究員，主要從事畜禽育種與技術推廣工作，（電話）１５５０５３２１６３９（電子信箱）ｑｄｘｇ１９９３＠１２６．ｃｏｍ。