新診斷2型糖尿病患者血清脂肪甘油三酯脂酶及抵抗素與胰島素抵抗的關系研究

潘佳秋，姜飛飛，劉 靜

有研究者指出脂代謝異常是2型糖尿病 (T2DM)的原發性病理生理事件，常先于T2DM發生數年前就存在，且在T2DM發生、發展中起著主導作用，會影響機體能量的平衡，進而引發肥胖和胰島素抵抗。2004年Zimmermann等［1］報道了一種新的脂肪酶，命名為脂肪甘油三酯脂酶 (adipose trigl-gceride lipase，ATGL)［2］。ATGL是脂肪組織中參與脂肪分解的酶，有研究表明它在啟動脂肪細胞脂肪動員過程中起重要作用。抵抗素 (resistin)是新近發現的一種脂肪細胞分泌的多肽類激素，具有升高血糖、抗胰島素的作用。鑒于目前有關兩種脂肪因子之間的相互關系及其在T2DM患者胰島素抵抗發生中的作用研究不多，本研究對此進行初步探討。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2009年10月—2010年6月佳木斯大學第一附屬醫院內分泌科初診T2DM患者55例 (T2DM組)，其中男28例，女27例;平均年齡 (51.5±13.3)歲;平均病程3個月。病例入選標準為:(1)符合1999年世界衛生組織(WHO)糖尿病診斷標準;(2)起病年齡＞25歲;(3)入組前均未使用任何降糖及降脂藥物治療，從入組到隨訪結束無嚴重急性感染及糖尿病急性并發癥。排除:使用地塞米松治療、急性肺炎、肺膿腫、風濕性關節炎等影響ATGL、抵抗素水平測定的因素。另選取同期在我院健康體檢者30例為正常對照組，其中男16例，女14例;平均年齡 (46.9±14.3)歲。

1.2 方法

1.2.1 臨床資料收集 所有受檢者禁食10 h后于次日清晨空腹采集肘靜脈血5 ml，離心分離血清，測定血糖、血脂、胰島素等。另取一份血離心后存入－40℃冰箱用于血清ATGL、抵抗素水平的測定。同時測量身高、體質量，計算體質指數(BMI)。

1.2.2 檢測方法 空腹血糖 (FPG)、血脂等用酶法在日本OLYMPUS公司Au－2700全自動生化分析儀上進行檢測。用電化學發光免疫法測定血清空腹胰島素 (FINS)，試劑盒購自德國羅氏公司，批內 CV＜2.0%，批間 CV＜2.5%。采用ELISA法測定血清ATGL、抵抗素水平，人類抵抗素試劑盒為美國adipobioscience公司生產，均由北京愛迪博生物科技有限公司提供，批內CV＜4%，批間CV＜8%。胰島素抵抗指數(HOMA－IR)計算公式:HOMA－IR=FPG×FINS/22.5;胰島素敏感性指數 (ISI) =1/〔log(I。) +log(G。)〕，G。為FPG，I。為FINS;公式中FPG單位均為mmol/L，FINS單位均為mU/L。

1.3 統計學方法 采用SPSS 17.0統計分析軟件對結果進行處理。正態分布的計量資料以表示;ATGL為偏態分布，進行自然對數轉換后再進行統計學分析。兩組均數間的比較采用t檢驗。單因素相關分析采用Pearson相關分析。指標間的關系判定采用多元線性逐步回歸分析。p＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 觀察指標比較 T2DM組患者總膽固醇 (TC)、低密度脂蛋白 (LDL)、FINS水平與正常對照組比較，差異均無統計學意義 (P＞0.05);而兩組受檢者BMI、三酰甘油 (TG)、高密度脂蛋白 (HDL)、ATGL、FPG、HOMA－IR、抵抗素、ISI比較，差異有統計學意義 (p＜0.05，見表1)。

2.2 ATGL、抵抗素與各觀察指標的Pearson相關分析 結果顯示，ATGL與 ISI呈正相關 (p＜0.01)，而與 FPG、BMI、HOMA－IR、抵抗素呈負相關 (p＜0.05);血清抵抗素與FPG、BMI、HOMA－IR呈正相關 (p＜0.05)，而與ISI呈負相關 (p＜0.01，見表2)。

表1 T2DM組與正常對照組觀察指標比較Table 1 Comparison of clinical data between the T2DM and NC groups

表1 T2DM組與正常對照組觀察指標比較Table 1 Comparison of clinical data between the T2DM and NC groups

注:BMI=體質指數，TG=三酰甘油，TC=總膽固醇，HDL=高密度脂蛋白，LDL=低密度脂蛋白，ATGL=脂肪甘油三酯脂酶，FPG=空腹血糖，FINS=空腹胰島素，HOMA－IR=胰島素抵抗指數，ISI=胰島素敏感性指數

組別 例數 BMI(kg/m2) TG(mmol/L) TC(mmol/L) HDL(mmol/L) LDL(mmol/L)T2DM組 55 25.0±3.1 23.52±10.60 5.91±2.23 1.47±0.94 3.03±1.02正常對照組 30 20.8±1.2 21.22± 0.42 4.87±1.23 1.22±0.19 2.98±0.95 t 值6.799 3.801 2.743 1.922 0.232 P值 0.000 0.000 0.607 0.040 0.817組別 ATGL(μg/L) FPG(mmol/L) FINS(mU/L) HOMA－IR 抵抗素 (μg/L) ISI T2DM組 23.59±3.94 12.59±4.23 11.42±6.89 5.52±2.54 8.97±5.73 0.49±0.05正常對照組 31.20±2.05 5.66±2.40 4.14±2.04 1.01±0.87 7.41±1.88 0.78±0.11 t 值 －11.70 9.637 7.372 11.735 13.7±5.4 0.537 P值0.000 0.000 0.463 0.000 0.000 0.000

表2 ATGL及抵抗素與其他因素的Pearson相關分析Table 2 Single－factor correlation analysis of ATGL，resistin and other factors

2.3 ATGL和抵抗素與觀察指標的多元回歸分析 分別以ATGL和抵抗素為因變量，以 BMI、TG、TC、FPG、HDL、FINS、HOMA－IR為自變量，進行多元逐步回歸分析。結果顯示，HOMA－IR和ISI最后進入回歸方程 (r值分別為2.85和－2.85，P均＜0.05)，常數項為零。

3 討論

胰島素抵抗是多種疾病的共同發病基礎，如T2DM、肥胖癥、高血壓、冠心病等，它們既各自獨立又相互聯系，這個內在的聯系就是胰島素抵抗及其所致糖、脂代謝紊亂［3］。本研究結果顯示:T2DM患者血清ATGL水平較健康者顯著降低，而血清抵抗素水平則較健康者顯著升高。同時發現T2DM患者BMI、HOMA－IR較健康者顯著升高，ISI較健康者顯著下降。ATGL的主要作用是水解TG成甘油二酯和游離脂肪酸(FFA)，是脂肪代謝的關鍵酶，且胰島素作為脂解作用的主要抑制劑，在近年來ATGL的研究中也越來越受到關注。抵抗素是一種由脂肪細胞和巨噬細胞分泌的多肽類激素，最近Pagano等［4］證實了人脂肪細胞中抵抗素表達的存在。動物研究表明:胰島素下調ATGL在3T3－L1細胞中的表達，在糖尿病－肥胖模型小鼠 (ob/ob和db/db)中ATGL的表達下降了50%，提示在胰島素抵抗狀態下ATGL的表達降低［5］;而在肥胖狀態下，脂肪組織中的抵抗素表達增加。

關于抵抗素與肥胖的關系，Kim等［6］發現抵抗素可以抑制前體脂肪細胞系3T3－L1向成熟脂肪細胞的分化，在無抵抗素的培養基中3T3－L1可以分化為含有大量脂肪的成熟脂肪細胞，在加入抵抗素的培養基中前體脂肪細胞并未出現廣泛的脂肪轉化，同時這些脂肪細胞標志物的表達，如過氧化物酶體增殖物激活受體、脂肪酸合成酶等比無抵抗素的對照組低80%。而本研究選取的是初診T2DM患者，從BMI上看，大多數患者存在肥胖。本研究結果顯示:T2DM患者血清ATGL水平與抵抗素呈負相關，分析其原因可能為T2DM患者出現高TG血癥的同時常伴有 FFA 水平的增高［7］，Palanivel等［8］證實抵抗素可降低脂肪酸的攝取和骨骼肌的代謝，尤其是通過一磷酸腺苷 (AMP)活性蛋白酶的靶向作用。抵抗素在肝臟和骨骼肌中通過減低胰島素功能而影響葡萄糖代謝。本研究結果顯示:血清ATGL、抵抗素的水平變化可能與改善胰島素抵抗有關。胰島素抵抗時會影響胰島素信號傳遞系統，從而還會使肝糖代謝異常，導致FFA升高。有研究指出，肥胖人群胰島素抵抗和高胰島素血癥的程度，成為獨立影響ATGL蛋白和mRNA表達水平的因素［9］。人抵抗素作用于肝臟，減弱胰島素的肝糖輸出作用;作用于骨骼肌，降低葡萄糖轉運蛋白4的活性;作用于脂肪細胞，調節脂肪細胞的分化、增殖和能量代謝。抵抗素的生物學作用主要是對抗胰島素的作用，引起胰島素抵抗。這也進一步提示ATGL、抵抗素在胰島素抵抗的形成中具有重要作用，且在以胰島素抵抗為基礎的糖尿病、代謝綜合征等的發生、發展中有重要影響。

總之，本研究初步揭示ATGL、抵抗素可能在胰島素抵抗和糖尿病的發生、發展中發揮著一定作用。但ATGL的確切生理功能并不十分清楚，值得進一步研究。

1 Zimmermann R，Straussj G，Haemmerle G，et al.Fat mobilization in adipose tissue is promoted by adipose triglyceride lipase ［J］ .Science，2004，306(5700):1383－1386.

2 Villena JA，Roy S，Sarkadi－ Nagy E，et al.Desnutrin，an adipocyte gene encoding a novel patatin domain－containing protein，is induced by fasting and glucocorticoids:ectopic expression of desnutrin increases triglyceride hydrolysis［J］ .J Biol Chem，2004，279(45):47066 －47075.

3 Li R，Wei SQ.Type 2 diabetes mellitus and insulin resistance syndrome［J］ .Sichuan Medical Journal，2002，23(9):894.

4 Pagano C，Marin O，Calcagno A，et al.Increased serum resistin inadults with Prader－Willisyndrome is related to obesity and not to insulin resistance［J］ .Clin Endocrinol Metab，2005，90(7):4335 －4340.

5 Paolisso Q，Howard BV.Role of nonesterified fatty acid sin the pathogenesis of type 2 diabetes［J］ .Diabet Med，1998，15(5):360 －366.

6 Kim KH，Lee K，Moon YS，et al.A cysteine－rich adipose tissuespecific secretory factor inhibits adipocyte differentiation ［J］ .J Biol Chem，2001，276(14):11252－11256.

7 Jocken JW，Langin D，Smit E，et al.Adipose triglyceride lipase and hormone－sensitive lipase protein expression is decreased in the obese insulin－resistant state［J］ .J Clin Endocr－inol Metab，2007，92(6):2292－2299.

8 Palanivel R，Sweeney G.Regulation of fatty acid uptake and metabolism in L6 skeletal muscle cells by resistin ［J］ .FEBS Lett，2005，579(22):5049－5054.

9 Villena JA，Roy S，Sarkadi－ Nagy E，et al.Desnutrin，an adipocyte gene encoding a novel patatin domain－containing protein，is induced by fasting and glucocorticoids:ectopic expression of desnutrin increases triglyceride hydrolysis［J］ .J Biol Chem，2004，279(45):47066 －47075.