番鴨呼腸孤病毒感染雛番鴨的病理學觀察

周 麗 溫納相 宋永峰 周 全 魯俊鵬

（廣東溫氏食品集團有限公司 廣東 新興 527400）

番鴨呼腸孤病毒病近幾年該病在本市的流行勢態日趨嚴重，已成為危害養鴨業發展的疫病之一。番鴨呼腸孤病毒（muscovy duck reovirus，MDRV）是由呼腸孤病毒科正呼腸孤病毒屬番鴨呼腸孤病毒引起的一種急性傳染病。1997年以來，在我國南方等地流行。臨床上以軟腳為主要癥狀，以肝和脾表面有大量灰白色壞死點為主要病理變化，發病日齡多為3～20日齡，以7～10日齡的雛鴨最為嚴重；發病率為30%～70%，死亡率為30%～90%，病愈鴨成為僵鴨[1，2]。

目前對該病感染雛番鴨后的病理變化方面的研究不多。因此，本研究為雛鴨感染番鴨呼腸孤病毒的致病機制及探討該病的防制措施提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 病毒 本室分離鑒定和保存的番鴨呼腸孤病毒強毒。

1.2 試驗動物 1日齡非免疫雛番鴨30只，由廣東溫氏云城公司提供。

1.3 試驗設計 30只雛鴨隨機分為感染組（A）和對照組（B）各15只。其中A組雛鴨于5日齡經肌肉注射番鴨呼腸孤病毒強毒病毒液0.5Ml/只；B組雛鴨給予相同劑量0.01mol/L的無菌PBS。隔離飼養，連續觀察20d，詳細記錄試驗動物的臨床及病理變化，并與自然發病死亡番鴨進行對比。發病死亡前雛鴨快速采取心、肝、肺、腎、腦、胰腺、脾、腔上囊、十二指腸、空腸、回腸和盲腸，經10%中性福爾馬林溶液固定48h后，修切成2～3mm厚組織塊，經過流水沖洗，梯度乙醇脫水，二甲苯透明，常規石蠟包埋，制成4μm切片，HE染色，光學顯微鏡下觀察。

2 結果

2.1 臨床癥狀 5日齡雛番鴨肌肉注射MDRV分離株第3天后開始出現堆積、排白綠色稀糞，趾關節和跗關節周圍紅腫。第4天開始出現死亡，持續5～11d，死亡率達95%；對照組無明顯臨床表現。

2.2 病理剖檢 病死番鴨主要病變為：肝臟、脾臟腫大呈深褐色，表面有大量針尖大的白色壞死點；心臟出現纖維素性心包炎，腎腫大，色澤變淡并有出血，外觀呈斑駁狀。

2.3 病理組織學變化 肝臟：肝細胞顆粒變性、水泡變性、部分壞死呈空泡狀；中小淋巴細胞、網狀細胞在靜脈周圍浸潤，匯管區、在肝小葉內局灶性增生；門管區動脈內皮增生，肌層透明變性；肝細胞壞死處有淋巴細胞集聚。脾臟：大量脾小體中心溶解壞死；脾小體壞死團塊周邊殘存細胞腫脹、呈空泡；淋巴細胞核碎裂、邊集，并見核分裂相狀鞘動脈周圍、淋巴小結內淋巴細胞大量流失，剩余網狀細胞。心臟：纖維素性心外膜炎。腎臟：腎小管上皮細胞顆粒變性、水泡變性、細胞壞死；腎小管間散在淋巴細胞和紅細胞。腸道、肺臟、小腦和大腦未發現異常。法氏囊：髓質區淋巴細胞壞死崩解；皮質區有嗜中性粒細胞浸潤。

3 討論

（1）MDRV感染很可能是首先影響感染雛鴨的免疫系統，進而誘發多器官的自身免疫性反應，免疫器官的病理性損傷導致機體免疫功能下降呈現嚴重的免疫抑制，從而引發全身各器官組織的損傷，最終可能導致感染雛鴨的死亡[3，4]。（2）MDRV毒力變化較大，不同地方分離到的毒株導致的臨床癥狀和大體病變也不同，大體病變較明顯的主要在肝臟和脾臟。發病番鴨臨床上表現為精神萎靡，擁擠成群，食欲下降，羽毛蓬松、直立且無光澤，呼吸急促，跛行，糞便呈綠色或白色，腳軟，生長緩慢，易激發混合感染[5，6]。（3）MDRV引起的病理組織學變化具有診斷價值。此次病理組織學觀察發現，MDRV的主要病變在肝臟、脾臟、心臟、法氏囊和腎臟等組織局灶性壞死，壞死灶中心是細胞碎片，灶內及外圍均有吞噬細胞和淋巴樣細胞分布，其中以肝、脾尤為顯著，肝組織和脾白髓結構遭到嚴重破壞；肝細胞、心肌纖維和腎小管上皮細胞顆粒變性；法氏囊淋巴細胞變性和壞死。說明MDRV對鴨的免疫系統具有較強的破壞作用[7，8]。本研究結果表明，MDRV有一定的抗原相關性，對番鴨組織器官或細胞的親嗜性出現了明顯改變，在導致宿主多部位感染的同時，也使肝、脾組織細胞大量死亡；肝、脾組織結構和免疫功能受到嚴重影響[9]。（4）MDRV的診斷有時非常不典型，應當綜合多種因素進行診斷。如該場的免疫程序、免疫方法、生產記錄、病史、臨床癥狀和大體剖檢病理變化等作出初步診斷。有條件，應當進一步血清學、病理組織學、分子生物學等手段進行確診[10]。