王仁翠 (山東省諸城市舜王畜牧獸醫管理站 262233)
豬旋毛蟲病是由旋毛線蟲(Trichinella spiralis)引起的人畜共患的寄生蟲病,流行于哺乳類動物間,人因生吃或半熟食含旋毛蟲包囊的豬肉等而感染。主要臨床表現為胃腸道癥狀、發熱、肌痛、水腫和血嗜酸粒細胞增多等。本文對豬旋毛蟲病的危害及診斷作了簡單介紹。
旋毛蟲為一種很小的、前細后粗的白色小線蟲,雄蟲長 1.4~16mm,雌蟲長3~4mm,肉眼勉強可以看到。寄生在小腸的腸壁上。它的生活史特點是:同一動物既是終宿主,又是中間宿主。當人或動物吃了含有旋毛蟲幼蟲包囊的肉后,包囊被消化,幼蟲逸出鉆入十二指腸和空腸的粘膜內,約經1.5~3d即發育為成蟲,交配后,雄蟲死亡,雌蟲鉆入腸腺或黏膜下淋巴間隙中產幼蟲。大部分幼蟲隨血流散布到全身。橫紋肌是旋毛蟲幼蟲最適宜的寄生部位。剛進入肌纖維的幼蟲是直的,隨后迅速發育增大,逐漸卷曲并形成包囊。犬體內的包囊呈圓形,大小為0.25~0.3mm×0.4mm,眼觀呈白色針尖狀。包囊內含有囊液和1~2條卷曲的幼蟲,個別可達6~7條。包囊在數月或1~2年內開始鈣化,鈣化包囊的幼蟲仍能存活數年。
輕度感染者常無癥狀,重度感染者其臨床表現復雜多樣。典型臨床表現為感染48h后有胃腸道癥狀,以后出現發熱、水腫及明顯的肌肉疼痛為本病的三大特征。
1.3 病程
1.3.1 潛伏期 潛伏期長短隨幼蟲侵入數量多少和人體免疫力的強弱而異。最短的僅為12h,最長的46d。多數在7~14d。
1.3.2 小腸侵入期 自食入包囊至幼蟲在小腸黏膜發育為成蟲的這一時期。主要病變是小腸黏膜炎癥。在潛伏期過后,病人可出現腹痛、惡心、嘔吐、腹瀉和食欲減退等。腹痛主要在上腹部及臍周,呈隱痛或燒灼樣痛。腹瀉每日數次,稀便或水樣便,無里急后重感。本期癥狀持續1周左右。
1.3.3 幼蟲移行期 指幼蟲產出后,隨血液循環到達全身各部,最后到達并寄宿肌肉組織。主要臨床表現為發熱、肌痛及水腫。發熱多在38~40℃,可高達41℃,伴有畏寒、頭痛、出汗和虛弱無力。全身性肌肉痛為本病的突出特點,腓腸肌和四肢肌肉更明顯,病人因疼痛而不敢活動。嚴重病人可有咀嚼、吞咽和言語障礙及聲音嘶啞,呼吸和眼球活動時均感疼痛。水腫先從眼瞼及顏面開始,以后可擴展至四肢,嚴重病人可有腹水、胸水及心包積液,同時也可出現肺炎、心肌炎、腦膜炎等癥狀,個別嚴重者可致死亡。部分病人可有蕁麻疹和過敏性皮疹等表現。此期持續2周至2個月左右。
1.3.4 包囊形成期 包囊形成期指幼蟲最終在骨骼肌中形成包囊這一時期。此期急性癥狀(發熱、水腫)逐漸減退,但肌肉疼痛仍可持續數月,伴有消瘦、虛弱及肌肉硬結等表現。
2.1.1 新鮮肉檢驗 (1)采樣。自胴體兩側的橫膈膜肌腳部各采樣一塊,記為一份肉樣,其質量不少于50~100g,與胴體編成相同號碼。可從肋間肌、腰肌、咬肌、舌肌等處采樣。(2)目檢。撕去膈肌的肌膜,將膈肌肉纏在檢驗者左手食指第二指節上,使肌纖維垂直于手指伸展方向,再將左手握成半握拳式,借助于拇指的第一節和中指的第二節將肉塊固定在食指上面,隨即使左手掌心轉向檢驗者,右手拇指撥動肌纖維,在充足的光線下,仔細視檢肉樣的表面有無針尖大半透明乳白色或灰白色隆起的小點。檢完一面后再將膈肌翻轉,用同樣方法檢驗膈肌的另一面。凡發現白色小點可懷疑為蟲體。(3)壓片。放置夾壓玻片:將旋毛蟲夾壓玻片放在檢驗臺的邊沿,靠近檢驗者;剪取小肉樣:用剪刀順肌纖維方向,按隨機采樣的要求,自肉上剪取燕麥粒大小的肉樣24粒,使肉粒均勻地在玻片上排成一排(或用載玻片,每片12粒);壓片:將另一夾壓片重迭在放有肉粒的夾壓片上,并旋動螺絲。使肉粒壓成薄片。(4)鏡撿。將制好的壓片放在低倍顯微鏡下,從壓片一端的邊沿開始觀察,直到另一端為止。(5)判定標準。沒有形成包囊期的旋毛蟲:在肌纖維之間呈直桿狀或逐漸蜷曲狀態,或蟲體被擠于壓出的肌漿中。包囊形成期的旋毛蟲:在淡薔薇色背景上,可看到發光透明的圓形或橢圓形物,囊中央是蜷曲的蟲體。成熟的包囊位于相鄰肌細胞所形成的梭形肌腔內。鈣化的旋毛蟲:在包囊內可見數量不等、濃淡不均的黑色鈣化物,或可見到模糊不清的蟲體,此時啟開壓玻片,向肉片稍加10%的鹽酸溶液,待1~2min后,再行觀察。機化的旋毛蟲:此時壓玻片啟開平放桌上,滴加數滴甘油透明劑于肉片上,待肉片變得透明時,再覆蓋夾壓玻片,置低倍鏡下觀察,蟲體被肉芽組織包圍、變大,形成紡錘形、橢圓形或圓形的肉芽腫。被包圍的蟲體結構完整或破碎,乃至完全消失。
2.1.2 凍肉的檢驗 (1)壓片。(2)染色:在肉片上滴加1~2滴美藍或鹽酸水溶液,浸漬1min,蓋上夾壓玻片。(3)鏡檢:美藍染色法:肌纖維呈淡青色,脂肪組織不著染或周圍具淡。旋毛蟲包囊呈淡紫色、薔薇色或藍色。蟲體完全不著染。鹽酸透明法:肌纖維呈淡灰色且透明,包囊膨大具有明顯輪廓,蟲體清楚。
2.2.1 采樣 部位:采集胴體橫膈肌腳和舌肌。方法:去除脂肪、肌膜或腱膜。數量:每頭豬取1個肉樣(100g),再從每個肉樣上剪取1g小樣,集中100個小樣(個別旋毛蟲病高發地區以15~20個小樣為一組)進行檢驗。
2.2.2 絞碎肉樣 將100個肉樣(重100g)放入組織搗碎機內以2000r/min,搗碎時間30~60s,以無肉眼可見細碎肉塊為度。
2.2.3 加溫攪拌 將已絞碎的肉樣放入置有消化液的燒杯中,肉樣與消化液的比例為1∶20,置燒杯于加熱磁力攪拌器上,啟動開關,消化液逐漸攪成一漩渦,液溫控制在40~43℃之間,加溫攪拌30~60min,以無肉眼可見沉淀物為度。
2.2.4 過濾 取80目的篩子,置于漏斗上。漏斗下再接一分液漏斗,將加溫后的消化液徐徐倒入籃子。濾液濾入分液漏斗中,待濾干后,棄去篩子上的殘渣。
2.2.5 沉淀 濾液在分液漏斗內沉淀10~20min,旋毛蟲逐漸沉到底層,此時輕輕分幾次放出底層沉淀物于凹面皿中。
2.2.6 漂洗 沿凹面皿邊緣,用帶乳頭的10ml吸管徐徐加入37℃溫自來水,然后沉淀1~2min,并輕輕沿凹面皿邊緣再再輕輕多次吸出其中的液體如此反復多次,加入或吸出凹面皿中的液體均以不沖起其沉淀物為度,直至沉淀于凹面皿中心的沉淀物上清透明(或用量筒自然沉淀,反復吸取上清的方法進行漂洗)。
2.2.7 鏡檢 將帶有沉淀物的凹面皿放入倒置顯微鏡或在80~100倍的普通顯微鏡下調節好光源,將凹面皿左右或來回晃動,鏡下捕捉蟲體、包囊等,發現蟲體時再對這一樣品采用分組消化法進一步復檢(或壓片鏡檢),直到確定病豬為止。