魯金波 杜立銀 (內蒙古民族大學動物科學技術學院 通遼 028042)
環氧樹脂是一種含有環氧基因的高分子聚合物。它的機械強度較高,化學穩定性好,收縮率低,操作簡單,具有充盈飽滿,一次鑄型成功等特點,不需補注,由于環氧樹脂顆粒較小,可一直注入到毛細血管和肺泡內[1]。但易脆、柔韌性差,往往造成鑄型細小分支折斷,影響了鑄型標本的質量。用改進配制方法.通過加入四氯乙烯對其進行改進,以增加鑄型的柔軟度,鑄型效果較理想[2]。
用環氧樹脂灌注于羊肺臟的氣管中,待定型后,經過濃硫酸或鹽酸腐蝕,自來水沖洗及人工修整等過程,制作出羊肺臟鑄型標本。在腐蝕過程中,肺組織部分被腐蝕掉,灌注的環氧樹脂液把肺血管、氣管、支氣管及肺泡的原形狀顯露出來。從而制作出既保持肺臟原有的形態,又可以清楚地觀察到肺的呼吸道系統、肺循環系統及肺自身營養血管系統立體構筑的美觀、真實的肺臟氣管支氣管樹和血管鑄型標本,為教學、科研及臨床實踐提供了直觀的解剖形態學依據[3]。
取新鮮的羊肺臟,最好是肺臟內血管無積血,以免影響灌注;各種型號的注射針頭(尖端磨平)、注射器(50、100、500m1)、天平、器皿、止血鉗、手術剪、縫合針和縫合線等;配好的環氧樹脂和所需顏料(白、紅、藍)及固化劑。
1.2.1 填充劑配方 環氧樹脂lOOg、鄰苯二甲酸二丁酯(增韌劑)20~30ml、四氯乙烯(柔軟劑)20ml、丙酮(稀釋劑)15ml、乙二胺(固化劑)7~10ml[4]。
1.2.2 填充劑配制方法 先將容器洗凈、擦干,取100ml環氧樹酯裝入容器內,然后用量杯量取適量乙酸乙酯加入容器中進行稀釋攪拌,同時加入一定量的鄰苯二甲酸二丁酯和四氯乙烯,充分攪拌均勻,即成改良環氧樹酯填充劑,然后根據需要分別加入白色、紅色、藍色顏料和固化劑(灌注前加入)繼續攪拌,使樹脂與固化劑充分混合,如果室內溫度較低,可把配置好藥品盛在容器內放在溫水里加熱45~50oC但不能過高,否則速凝影響造型。灌注時用酒精把玻璃注射器洗凈,抽取灌注液,注入事先準備好的羊肺,要邊注入邊揉壓標本,使藥液在血管和氣管內流到最細小管的部位,灌注后4~5h環氧樹脂凝固,填充劑配制的量,應根據需要隨用隨配,以免浪費[5]。
1.2.3 腐蝕及后期處理 標本灌注好后,靜置4~5d后,把腐蝕好的標本從濃鹽酸或濃硫酸中取出,用流水緩慢沖洗,水流不能過急,否則,沖壞微細結構。然后用5%的雙氧水漂白,酌情進行疏密打枝處理,最后將標本裝入玻璃缸中,加入苯甲酸溶液為主的防腐固定保存液后,封好蓋,貼上標簽保存。
1.2.4 制作過程 將采來的動物離體新鮮肺臟,分別在肺動脈、靜脈,支氣管進行插管,用生理鹽水沖凈標本內的殘留血液后,用改良環氧樹脂灌注填充劑。加紅色的填充劑于肺動脈注入,加藍色的填充劑于肺靜脈注入,加白色的填充劑于氣管或支氣管注入。各種顏色灌注的量要根據羊肺的大小而定,判定方法要在肺表面看清所注入的顏色為止。灌注時壓力不要過大,以免管壁破裂。如發現有漏劑的地方可用止血鉗掐住或用線扎住。灌注持續時間約10min,在室溫下(18~20℃),該填充劑在固化劑加入后3~5h左右初凝,變為粘稠液體,24h后即完全固化,因此灌注應在固化劑加入后2~3h內完成。標本經濃鹽酸或濃硫酸中腐蝕約4~5d,然后將腐蝕好的肺臟由濃鹽酸或濃硫酸中取出,用流水或自來水緩慢沖洗,所得血管和支氣管樹鑄型充盈飽滿,支撐力強,柔韌性良好。如在沖洗過程中有部分小血管或細支氣管沖掉,要立即繪圖記好,以便修整[6]。
(1)鑄型標本的填充劑很多,大多都用賽璐璐、過氯乙烯和明膠及氯苯膠乳等填充劑。但經過試驗得知,用這些填充劑一次注入不能成形,需進行第二次或第三次補注,并且制作出來的標本動脈、靜脈和支氣管樹,表面粗糙,不光滑,有氣泡,不能灌至微細血管及肺泡,費時費力,影響美觀。環氧樹脂是一種合成樹脂因其具有化學性能穩定,機械強度好,收縮率小,可一次灌注成功,不必多次補注,操作簡單、方便等優點。其次,由于環氧樹脂顆粒較小,可一直注入到毛細血管和肺泡內,型質地較硬,表面光滑,不出氣泡。但由于其粘度較大,固化后脆性較大,細小分枝易折斷從而大大影響了標本的質量。通過改良后的環氧樹脂填充劑具有良好的柔韌性,也就是在環氧樹脂填充劑中加入一定量的四氯乙烯可起到增韌的作用同時還可降低環氧樹脂的黏度增加樹脂的流動性,四氯乙烯加入要適量,如加入過少則增韌效果不理想且樹脂的流動性較差,加入過多則造成填充劑易透過血管壁而滲透到組織間隙中和組織粘連在一起,質地較軟,表面有氣泡,影響了鑄型標本的質量。(3)上述配方中的稀釋劑,如選用能參與樹脂固化反應的活性稀釋劑,如501活性稀釋劑,所得固化物的收縮率將更小。因這類活性稀釋劑有一定的毒性,故選用丙酮(或無水乙醇),仍滿足了對血管、支氣管樹鑄型標本收縮率的要求。用無水乙醇做稀釋劑時,固化速度比丙酮約快3倍。在環境溫度低或需快速固化時,可將上述配方改用無水乙醇作稀釋劑。
(1)四氯乙烯,有機化合物,又稱全氯乙烯,為乙烯中全部氫原子被氯取代而生成的化合物。不溶于水,可混溶于乙醇、乙醚等多數有機溶劑并形成聚合。在環氧樹酯中加入四氯乙烯,使其充分發生交聯反應,這樣可增加環氧樹酯的柔軟度。(2)配制比例:經過反復試驗,填充劑中環氧樹酯和四氯乙烯配制的適宜比例是5~7∶1(環氧樹酯5~7,四氯乙烯1),用這樣填充劑制作出的鑄型標本既具有較強的支撐力和有良好柔韌性,且鑄型的成功率高。同時在配制中加入一定量的鄰苯二甲酸二丁酯可以起到很好的增韌效果。根據管道粗細選擇不同配制比例,一般來說,對于細密小管道(如肺、動靜脈細的分支、呼吸性細支氣管等),且要求末梢具有良好柔韌性,配制比例為5∶1。對于粗大管道(如肺動脈、肺靜脈等),通常使主干充盈飽滿,且具有很好的硬度。配制比例為6∶1~7∶1。在整體器官灌注中,不同配制比例交替灌注時,形成了互補作用,能達到顯著效果。(3)灌注肺動脈、肺靜脈和肺支氣管的要求。根據填充劑易通過細小血管和肺泡、灌注阻力小等特點,灌注過程中速度不要過快,壓力不要過大,否則會造成管道破裂,應仔細觀察肺葉充盈程度及填充劑是否外漏。若肺表面出現部分散的斑點,則表明壓力和灌注量均已足夠,應減量或停止灌注,以防止大量外漏的填充劑與肺組織粘連硬化,影響后期處理工作;若出現大量外漏的填充劑與肺組織粘連的情況可修剪,這樣仍能制作出精細美觀的鑄型標本。腐蝕后的標本應在通風條件下晾干,這樣可以使細小管道具有一定的硬度和柔韌性,便于修剪時不易折斷分支。