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人參果復方顆粒抗疲勞作用的研究

2012-04-13 12:31:00張鳳清付彥臣刁冬梅
中國釀造 2012年11期
關鍵詞:小鼠劑量

張鳳清,付彥臣,刁冬梅

(1.長春工業(yè)大學 化學與生命科學學院,吉林 長春 130012;2.四平宏寶萊飲品股份有限公司,吉林 四平 136000)

現(xiàn)代醫(yī)學認為疲勞是機體過用(超限)而引起的功能降低并出現(xiàn)不適的狀態(tài),主要表現(xiàn)為疲勞困倦,可出現(xiàn)頭暈、健忘、睡眠質(zhì)量下降等伴隨癥狀[1]。疲勞的產(chǎn)生與能源物質(zhì)消耗、代謝產(chǎn)物堆積、內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定性失調(diào)、自由基影響等因素關系密切[2]。長期以來,尋找安全、有效、無毒副作用的有效藥物來延緩疲勞的發(fā)生和加速疲勞的消除一直是藥物研究的熱點之一,以中草藥為原料的保健食品在這一領域展示出廣闊的前景。

人參果為五加科植物人參(Panax ginsengC.A.Mey.)的成熟果實,人參果中富含人參皂苷,此外還含有多糖、生物堿、揮發(fā)油、氨基酸、無機鹽、胡蘿卜苷、β-谷甾醇等多種化學成分[3-4]。國內(nèi)外學者研究表明,人參果的藥理作用在許多方面與人參相似,但是在許多功能方面,人參果又具有人參無法比擬的獨特作用,其具有降低血糖、抗休克、保護心肌、保護腎功能、提高記憶力、增強免疫力、抗疲勞等多種保健作用[5-7]。此外,據(jù)文獻報道,紅景天[8-10]、靈芝[11-13]和枸杞子[14-16]中也含有豐富的活性成分,在緩解體力疲勞方面起著重要的作用。因此,本品利用人參果、紅景天、靈芝、枸杞子為原料,輔以白砂糖,采用現(xiàn)代制備工藝研制成“人參果復方顆粒”,該產(chǎn)品符合國家食品藥品監(jiān)督管理局保健食品原料使用規(guī)定,本文旨在研究人參果復方顆粒的抗疲勞作用。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實驗藥品

人參果復方顆粒(主要成分為人參果、紅景天、靈芝、枸杞子等),固體顆粒劑,鋁塑復合膜袋裝,外包裝為紙盒。由長春工業(yè)大學化學與生命科學學院研制,吉林紫鑫藥業(yè)股份有限公司加工。

1.1.2 實驗動物

選用吉林大學白求恩醫(yī)學院動物實驗中心提供的ICR清潔級雄性小鼠,體重18g~22g,生產(chǎn)許可證號:SCXK-(吉)2007-0003。小鼠基礎飼料由長春市億斯實驗動物技術有限責任公司提供,生產(chǎn)許可證號:SCXK-(吉)2010-0001。本清潔級動物室環(huán)境設施合格證號:吉動設字10-1005號,實驗動物使用許可證號:SYXK(吉)2010-0011,清潔級。

1.1.3 劑量選擇

廠家推薦成人(體重以60kg計),每天攝入2次,每次1袋,5g/袋,即166.7mg/kg BW d,以廠家日推薦成人攝入量的1、10、30倍設置灌胃劑量,即166.7mg/kg BW d、1666.7mg/kg BW d、5000mg/kg BW d,分別取1667mg、16667mg、50000mg定型產(chǎn)品加蒸餾水至200mL,蒸餾水作陰性對照組,該樣品含糖量81.33%,因此以本試驗相應的高劑量組含糖量20.33%設糖對照組。各組小鼠灌胃量均為0.2mL/10g BW d,連續(xù)灌胃30d。

1.1.4 儀器與試劑

日本東芝TBA-120FR型全自動生化分析儀,SBA-40C型生物傳感分析儀,血乳酸測試酶膜,尿素測定試劑盒,肝糖原試劑盒,游泳箱(50cm×50cm×40cm),電子天平,722分光光度計,鉛皮,秒表等。

1.2 方法

1.2.1 人參果復方顆粒的制備

人參果復方顆粒的生產(chǎn)工藝:

1.2.2 負重游泳試驗

末次給予受試物30min后,置小鼠在游泳箱中游泳,水深約30cm,水溫(25±1)℃,鼠尾根部負荷5%體重的鉛皮。記錄小鼠自游泳開始至死亡時間,作為小鼠游泳時間(min)。

1.2.3 血清尿素測定

末次給予受試物30min,在溫度為(30±0.5)℃的水中游泳90min,休息60min摘眼球采血,取血清,進行尿素含量測定。

1.2.4 肝糖原測定

末次給予受試物30min處死小鼠取肝臟,經(jīng)生理鹽水漂洗后用濾紙吸干,精確稱取肝臟75mg,每管加入225μL試劑盒提供的堿溶液,用簿膜封住管口,扎一透氣孔,沸水浴20min,冷卻后加入7.2mL蒸餾水,充分混勻,按試劑說明書操作加入顯色劑,沸水浴5min,用722分光光度計在波長620nm處進行比色測定,按說明書提供的公式換算肝糖原。

1.2.5 血乳酸測定

末次給予受試物30min后采血20μL,再在溫度為(30±0.5)℃的水中不負重游泳10min,分別于游泳后立即(游泳后0min)和游泳后休息20min各采血20μL,采用山東省科學院生物研究所生產(chǎn)的生物傳感分析儀測定以上3個時間點的血乳酸值。以3個時間點血乳酸曲線下面積(計算公式見后)判斷結(jié)果。

1.2.6 統(tǒng)計分析

數(shù)據(jù)的統(tǒng)計處理采用SPSS11.5統(tǒng)計軟件中單因素方差分析進行均值比較,方差齊時,各組間兩兩比較用LSD法;方差不齊時,各組間兩兩比較采用Tamhane法。

2 結(jié)果與分析

2.1 人參果復方顆粒對小鼠負重游泳時間及小鼠增重的影響

表1 人參果復方顆粒對小鼠負重游泳時間及小鼠增重的影響Table 1 Effect of complex ginseng fruit granule on swimming time and body weight of mice

由表1可見,經(jīng)口給予小鼠不同劑量的人參果復方顆粒30d,各實驗組小鼠增重與糖對照組比較無顯著性差異(p>0.05),高劑量組游泳時間長于糖對照組,且差異有顯著性(p<0.05),說明人參果復方顆粒能延長小鼠負重游泳時間而對小鼠增重無影響。

2.2 人參果復方顆粒對小鼠血清尿素及小鼠增重的影響

由表2可見,經(jīng)口給予小鼠不同劑量的人參果復方顆粒30d,各實驗組小鼠增重與糖對照組比較無顯著性差異(p>0.05),高、中劑量組小鼠游泳后血清尿素低于糖對照組,且與糖對照組比較有顯著性差異(p<0.01,p<0.05),說明人參果復方顆粒具有抑制小鼠游泳后血清尿素升高的作用而對小鼠增重無影響。

2.3 人參果復方顆粒對小鼠肝糖原含量及小鼠增重的影響

表2 人參果復方顆粒對小鼠游泳后血清尿素及小鼠增重的影響Table 2 Effect of complex ginseng fruit granule on content of blood urea nitrogen and body weight of mice

表3 人參果復方顆粒對小鼠肝糖原含量及小鼠增重的影響Table 3 Effect of complex ginseng fruit granule on the content of liver glycogen and body weight of mice

由表3可見,經(jīng)口給予小鼠不同劑量的人參果復方顆粒30d,各實驗組小鼠增重與糖對照組比較無顯著性差異(p>0.05),僅高劑量組肝糖原儲備高于糖對照組且差異具有顯著性(p<0.05),表明人參果復方顆粒能增加肝糖原儲備但對小鼠增重未見影響。

2.4 人參果復方顆粒對小鼠血乳酸值及小鼠體重的影響

表4 給予人參果復方顆粒小鼠游泳前、后及休息20min 三個時間點血乳酸值Table 4 Change of the contents of blood lactic acid after overfeeding complex ginseng fruit granule

由表5可見,經(jīng)口給予小鼠不同劑量的人參果復方顆粒30d,各實驗組小鼠增重與糖對照組比較無顯著性差異(p>0.05),各劑量組小鼠游泳后3個時間點血乳酸曲線下面積雖有所降低,但與糖對照組比較無顯著性差異(p>0.05),說明人參果復方顆粒對抑制游泳時血乳酸的產(chǎn)生及小鼠增重均無影響。

表5 人參果復方顆粒對小鼠三個時間點血乳酸曲線下面積及小鼠增重的影響Table 5 Effect of complex ginseng fruit granule on the area of blood lactic acid under the curve in three time points and body weight of mice

3 結(jié)論

經(jīng)口給予小鼠人參果復方顆粒166.7、1666.7、5000mg/kg BW d,連續(xù)灌胃30d,與糖對照組比較5000mg/kg BW d劑量組能延長小鼠負重游泳時間,減少小鼠游泳時血清尿素的產(chǎn)生,增加肝糖原儲備;1666.7mg/kg BW d劑量組能減少小鼠游泳時血清尿素的產(chǎn)生,與糖性對照組比較有顯著性差異(p<0.05),各劑量組對小鼠體重及血乳酸的產(chǎn)生均未見影響。由此判定人參果復方顆粒具有緩解體力疲勞功能。

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