光譜和電化學方法研究自組裝納米簇模擬過氧化物酶

摘要：利用細胞色素c與Nafion，通過自組裝方式，構建了納米簇模擬過氧化物酶；利用電子透射顯微鏡、圓二色譜儀、紫外可見光分光光度儀及電化學工作站等設備測量模擬酶結構變化、酶促動力學參數以及電化學特性；在50 mmol/L Na₂HPO₄-NaH₂PO₄緩沖溶液（pH 10.0）中，測得模擬酶米氏常數K_m、催化速率及催化效率分別為2.5 μmol/L、0.069 s^-1、0.028±0.005 （μmol/L）^-1s^-1，其催化效率為天然辣根過氧化物酶的39%±5%，該模擬酶具有很好的穩定性和活性，能夠替代辣根過氧化物酶。該模擬酶可以固定在功能化多壁納米管與納米金復合材料修飾玻碳電極上，在50 mmol/L Na₂HPO₄-NaH₂PO₄緩沖溶液（pH 7.0）中測得模擬酶與電極之間電子遷移速度常數k_s為0.65 s^-1。利用循環伏安法測量模擬酶催化濃度為0.02～10 nmol/L的H₂O₂，其陰極峰電流隨H₂O₂濃度增加而增大，并且得出模擬酶催化H₂O₂檢出限為0.05 nmol/L，電化學表觀米氏常數K_mapp為2.3×10^-10 mol/L。

關鍵詞：自組裝；納米簇；模擬酶；光譜學；電化學