淺談 微生物學(xué)實驗室安全操作規(guī)程與注意事項

曾玉梅

近年來，隨著醫(yī)學(xué)微生物學(xué)、免疫學(xué)等學(xué)科的發(fā)展，許多高等院校以及醫(yī)療機構(gòu)開設(shè)微生物學(xué)實驗室。但微生物學(xué)實驗室的生物安全問題，也是現(xiàn)實存在的不可忽視的問題。管理的疏忽可能會造成工作人員感染、微生物外泄污染、危害社會等嚴重問題。2003年春季，傳染性非典型性肺炎爆發(fā)，多地的實驗室出現(xiàn)人員感染SARS病毒的事件，把實驗室的安全操作規(guī)范的問題再一次的擺在了我們的面前。因此，認真研究實驗室的具體情況，制定實驗室的安全防護對策，顯得尤為重要。

1 微生物學(xué)實驗室的特點

微生物學(xué)實驗室作為進行試驗和科研的場所，操作者在工作中不可避免的要接觸到各種病原微生物及其他有害因素。作為學(xué)生試驗教學(xué)的場所，微生物學(xué)實驗室所接觸的有害因子雖然沒有臨場科室多，但其安全性同樣不可忽視。進入實驗室學(xué)習(xí)的學(xué)生大多為初次進入醫(yī)學(xué)院的新生，其醫(yī)學(xué)知識不足，自我保護意識淡薄，對病源微生物及其他有害物質(zhì)的危險性認識不足，需要重視實驗室的安全規(guī)則和注意事項。近年來，隨著相關(guān)科學(xué)的發(fā)展，實驗室的使用率不斷增加，人員流動增加，這些都增加了保證實驗室安全的難度。

2 微生物學(xué)實驗室內(nèi)的感染

實驗室中的感染來源主要來自以下幾個方面：（1）工作中的意外；（2）實驗室氣溶膠的產(chǎn)生和傳播；（3）接種環(huán)、吸管、針頭及針筒的使用；（4）離心、勻漿、混和及振蕩等操作。微生物的感染途徑主要有口腔、呼吸道及皮膚粘膜等，而引起感染所需微生物的劑量又與感染途徑有關(guān)。因此，所有進入實驗室的人員必須強化無菌操作觀念，養(yǎng)成良好的習(xí)慣。挑取、分離、培養(yǎng)、生化反應(yīng)、檢查等操作都需做好無菌操作，正確的處理吸管、試管、培養(yǎng)物等傳染性材料，正確的使用各種消毒器械。

3 微生物學(xué)實驗室的安全操作規(guī)程及注意事項

3.1 增加操作者的安全意識 首先實驗室的所有人員要認真掌握本實驗室所涉及的所有標本的來源、致病力、傳播途徑以及防范方法等，制定相關(guān)的實驗室安全制度。具體包括制定微生物實驗室的相關(guān)標本操作規(guī)范、實驗室的環(huán)境消毒，對廢棄物的處理，以及標本的保存使用等。對新的病原體標本進行研究時，需要保持高度的警惕性與責任感，充分評估新樣本的危險性，制定相關(guān)安全措施。

3.2 實驗室的準入制度及規(guī)章制度 實驗室的入口需設(shè)立醒目的警示標牌，非實驗室工作人員禁止進入，不得隨意讓非實驗室人員參觀。在進入實驗室后，所有人員需遵守實驗室規(guī)則：（1）所有進入實驗室人員需穿著隔離衣，在試驗結(jié)束后，需將隔離衣反折好放入指定位置。（2）除外個人所需的書籍、文具外不得將其他的個人物品帶入實驗室。（3）嚴禁在實驗室內(nèi)吃喝；不得吸煙、嚼口香糖；不得將手指觸及頭面部，尤其是眼睛、鼻口周圍。（4）實驗室內(nèi)不得打鬧、高喊、隨意走動。（5）對實驗室內(nèi)的器材妥善使用，如有破損立即報告，不得私自妥善處理。（6）污染物及危險物品需放入指定容器，專門處理；離開實驗室前需檢查門窗是否關(guān)好，檢查水、電、電器是否關(guān)閉，使用消毒水洗手后離開實驗室。

3.3 實驗室內(nèi)的菌種管理 根據(jù)《中國醫(yī)學(xué)微生物菌種保存管理辦法》的規(guī)定結(jié)合實驗室的具體情況，制定本實驗室的菌種保存規(guī)程：（1）設(shè)置專門的冰柜保存菌種，進入實驗室的所有菌種都必須購自正規(guī)單位。（2）對一、二類菌種設(shè)置專門的冰柜保存，建立實驗室的菌種使用記錄，制定專人負責，防止菌種丟失。（3）使用菌種時要采用嚴格的防范措施，嚴格操作規(guī)程，防止菌種傳播。（4）對危險品及劇毒品需由專人、專柜保管、上鎖，防止其被盜、誤用或泄露。（5）對所有的廢棄物制定專門的管理辦法，并嚴格遵守以上規(guī)程。

3.4 實驗室內(nèi)的儀器管理 為維護實驗室儀器的正常運行，需要定期對實驗室儀器進行全面的檢查。（1）對冰箱及超低溫冰箱內(nèi)保存的所有容器都必須注明標簽，記錄有內(nèi)容物的科學(xué)命名、貯存時間及貯存人。清理冰箱時需攜帶面部保護罩及厚膠手套。（2）離心機在使用前需檢查離心管是否破損；離心結(jié)束后，需要等離心機完全停止后再開蓋；若離心前發(fā)現(xiàn)有離心管破碎，均需行消毒處理。（3）使用生物安全柜時，需一次性放入所需物品，表面通過70%的乙醇消毒，打開風(fēng)機5～10min后再操作。若感染性物質(zhì)流出時，以減低氣溶膠產(chǎn)生方式消毒滅菌。試驗結(jié)束后，對安全柜內(nèi)的所有物品進行消毒，關(guān)機前運行5min，凈化殘余氣體。其他如恒溫箱、高壓消毒器等器械需按時進行檢查清理。

3.5 實驗室的清潔消毒 實驗室必須具備必須的清潔消毒用品并及時檢查補充，清潔和消毒均要符合生物安全要求，遵循先消毒后清潔的總原則。在消毒處理時，遵循及時、徹底、有效的原則。為保證消毒效果，根據(jù)不同的消毒對象使用相應(yīng)的消毒方法。實驗結(jié)束后，所有的實驗臺面及實驗器材表面需要使用消毒液消毒，及時通風(fēng)，并定期使用紫外線照射消毒。當紫外線的照射強度小于原照射量的70%時，需找專人進行更換。

3.6 實驗室廢棄物的處理 實驗室在日常工作中會產(chǎn)生大量的廢棄物，需及時安全的進行處理，以防止人員的感染及污染事件。實驗室主要污染材料有三大類型：（1）可丟棄的材料如廢紙、廢液、破碎的器材等；（2）可處理后再使用的材料如剪刀、鑷子、工作服等；（3）被污染的設(shè)備，如離心機、恒溫箱、震動器等。對于實驗室的污染材料根據(jù)不同材料和利用價值的處理方法大致為：化學(xué)消毒、高壓蒸氣滅菌、焚燒滅菌三種。每天對空氣、各種物體表面和地面進行常規(guī)消毒；盛放生物廢物的容器要防漏，放在專用滅菌袋中滅菌；尖銳破損物的放置容器要堅固并且不易刺穿；所有能消毒的物品在送出實驗室前盡可能用的硬質(zhì)容器盛放；盛放生物廢物的容器在送出前進行一次高壓消毒處理。

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