電針對(duì)老年阿爾茨海默病大鼠空間記憶能力的影響*

高懷云，熊晶晶，胡卡明

(1．成都中醫(yī)藥大學(xué)，四川 成都610075;2．成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院，四川成都610072)

阿爾茨海默病(AD)是多發(fā)生于中老年病人中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性改變的一種變性疾病，是癡呆最常見的病因，以進(jìn)行性智能減退、記憶障礙、認(rèn)知障礙為主要特征［1］。目前尚沒有有效的治療方法，為此，深入探討阿爾茨海默病的發(fā)病機(jī)制，來研制有效的防治措施，已經(jīng)是一項(xiàng)迫切需要解決的重大課題。由于本病嚴(yán)重影響患者的認(rèn)知功能以及記憶功能，使得很多患者生活不能自理，給家庭及社會(huì)造成很大負(fù)擔(dān)，因而尋求對(duì)于阿爾茨海默病的有效治療已經(jīng)成為世界醫(yī)學(xué)界的研究熱點(diǎn)之一。針灸治療“癡呆”也有上千年歷史，筆者采用電針百會(huì)、涌泉來評(píng)價(jià)電針對(duì)于阿爾茨海默病大鼠空間記憶能力的影響，以便研究一種治療阿爾茨海默病的有效方案。

1 材料和方法

1．1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及材料

自然衰老的 SD大鼠86只，20～24月齡，質(zhì)量400～500 g;青年SD大鼠10只，4～6月齡，質(zhì)量140～200 g，雌雄不計(jì)，由成都中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。實(shí)驗(yàn)材料:華佗牌針灸針(蘇藥管械準(zhǔn)字2001第2140033號(hào))、G6805－1型電針儀(青島鑫升實(shí)業(yè)有限公司)、Morris水迷宮(成都泰盟科技有限公司)。

1．2 動(dòng)物篩選及分組

以4～6個(gè)月青年鼠作為對(duì)照。以青年鼠組大鼠平均逃避潛伏期均數(shù)+2倍標(biāo)準(zhǔn)差值為下限，+1倍標(biāo)準(zhǔn)差值為上限，將老年大鼠分為2組。平均逃避潛伏期大于均數(shù)+2倍標(biāo)準(zhǔn)差的為老化癡呆AD組;小于均數(shù)+1倍標(biāo)準(zhǔn)差的為正常老年鼠。潛伏期介于上下限之間的老年鼠剔除。潛伏期參照文獻(xiàn)［2］，篩選標(biāo)準(zhǔn)參照文獻(xiàn)［3］。篩選出的正常老年鼠為正常老年組;篩選出的老化癡呆AD鼠隨機(jī)分為:模型組、電針組，每組各12只。

1．3 治療方法及療程

電針組:用自制的固定器固定各組老化癡呆AD大鼠。選取“涌泉”、“百會(huì)”(“涌泉”直刺2～3 mm;“百會(huì)”斜刺3～5 mm，)，“涌泉”穴雙側(cè)交替進(jìn)針。進(jìn)針后，穴位均不進(jìn)行手法刺激，直接連接G6805電針儀進(jìn)行治療，頻率2～100 Hz，施以疏密波，電壓2～4 V，強(qiáng)度緩慢加大至大鼠下肢抖動(dòng)為度，留針時(shí)間約20 min。正常老年組和模型組:大鼠不施針，每天以同樣的方式、同樣的時(shí)間和程度進(jìn)行抓取、固定。治療療程:每日1次，7天為一療程，療程間隔1天進(jìn)行下一療程，共3個(gè)療程，計(jì)21天。

1．4 檢測(cè)方法

待大鼠治療療程結(jié)束后，用Morris水迷宮對(duì)其用Markowska設(shè)計(jì)出延緩的位置非匹配作業(yè)［4］進(jìn)行訓(xùn)練與監(jiān)測(cè)，將一“T”型隔板放入水迷宮內(nèi)，將水迷宮分割成開始部A和兩個(gè)均等的開放部B和C。于開放部B中央放一平臺(tái)，水迷宮水面高出平臺(tái)1 cm。信息游泳是每次實(shí)驗(yàn)把大鼠從A部正中貼壁放入，封閉C部，從A部游到B部找到平臺(tái)所用時(shí)間為信息游泳潛伏期，待大鼠找到平臺(tái)后停留30 s，若大鼠120 s內(nèi)仍找不到平臺(tái)，則引導(dǎo)其找到平臺(tái)，并停留30 s后回籠休息60 s，接著進(jìn)行選擇游泳。選擇游泳開放B部，C部，從A部游到C部平臺(tái)(B部平臺(tái)已撤去)所用的時(shí)間定為選擇游泳潛伏期，若大鼠游入B部，則撤掉平臺(tái)懲罰其30 s，然后打開B部，允許其重新找平臺(tái)，記錄大鼠找到C部平臺(tái)所用時(shí)間加上懲罰前所用時(shí)間為選擇游泳潛伏期。若大鼠120 s內(nèi)仍找不到平臺(tái)，則時(shí)間記錄為120 s，并尋找平臺(tái)失敗。適應(yīng)性訓(xùn)練3天，每天每只大鼠訓(xùn)練9次［5］。第4天測(cè)試，每只大鼠信息游泳時(shí)間與選擇游泳時(shí)間取9次測(cè)值的平均值，直接找到C部平臺(tái)的次數(shù)與總游泳次數(shù)之比為選擇游泳正確率。

1．5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS17．0統(tǒng)計(jì)軟件包統(tǒng)計(jì)分析。實(shí)驗(yàn)統(tǒng)計(jì)計(jì)量數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，各組間比較采用單因素方差分析處理。

2 結(jié)果

模型組在療程中期因捆綁致死1只，故剩11只。電針組與模型組比較，大鼠信息游泳時(shí)間及選擇游泳時(shí)間都有明顯減少，如表1所示:電針組信息游泳時(shí)間(22．94 ±4．36)s與正常老年組(19．22 ±4．36)s相比有差異(P＜0．05)，而與模型組(27．66 ±3．50)s相比，其信息游泳時(shí)間有明顯縮短(P＜0．05)。電針組選擇游泳時(shí)間(26．90 ±3．39)s，與正常老年組(21.66±3．20)s相比有差異(P＜0．05)，而與模型組(30.54±3.35)s相比，其選擇游泳時(shí)間也有縮短(P＜0．05)。結(jié)果提示，電針刺激可改善老年癡呆大鼠的空間記憶能力。

表1 各組治療后信息游泳時(shí)間及選擇游泳時(shí)間(±s)

表1 各組治療后信息游泳時(shí)間及選擇游泳時(shí)間(±s)

注:與正常老年組相比，*P ＜0．05;與模型組相比，△P ＜0．05。

組別 n 信息游泳時(shí)間(單位:s)選擇游泳時(shí)間(單位:s)正常老年組12 19．22 ±4．36 21．66 ±3．20模型組 11 27．66 ±3．50* 30．54 ±3．35*電針組 12 22．94±4．05＊△ 26．90±3．39＊△

3 討論

涌泉穴，足少陰腎經(jīng)之井穴，其名源于《靈樞·本輸》篇:“腎出于涌泉，涌泉者，足心也，為井木”。歸屬腎經(jīng)，腎經(jīng)為生命之根，先天之本，針刺涌泉穴具有醒腦開竅、充養(yǎng)腦髓的作用。百會(huì)穴位于腦部巔頂處，為百脈所會(huì)，內(nèi)應(yīng)于腦，《會(huì)元針灸學(xué)》載:“百會(huì)者，五臟六腑奇經(jīng)三陽百脈之所會(huì)，故名百會(huì)”。《黃帝明堂灸經(jīng)》記載百會(huì)主治“……忘前失后，心神恍惚”［6］，故百會(huì)為調(diào)節(jié)大腦功能的要穴。而涌泉配百會(huì)在竇漢卿《標(biāo)幽賦》中記載為天地人“三才穴”天穴與地穴，天穴配地穴共同起到調(diào)整升降、協(xié)調(diào)全身陰陽的功用。中醫(yī)關(guān)于治療“癡呆”歷史悠久，多認(rèn)為本病腎虛髓虧，腦脈失養(yǎng)，神機(jī)失用。其病位在腦，而腎通于腦，腎藏精，主骨生髓，腎虛則髓海不充、清竅失靈，所以“癡呆”其病位在腦，而根本在腎［7］。

現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為阿爾茨海默病以進(jìn)行性智能減退、記憶障礙、認(rèn)知障礙為主要特征，本試驗(yàn)就是應(yīng)用Morris水迷宮對(duì)AD大鼠進(jìn)行空間記憶的訓(xùn)練，來測(cè)評(píng)電針對(duì)于AD大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響。Morris水迷宮是英國(guó)心理學(xué)家Morris 20世紀(jì)80年代設(shè)計(jì)的用于研究學(xué)習(xí)記憶的，是研究AD大鼠空間記憶功能的較可靠的方法。試驗(yàn)結(jié)果顯示電針治療3個(gè)療程后電針組AD大鼠信息游泳時(shí)間與模型組相比有明顯縮短(P＜0．05)，電針組選擇游泳時(shí)間與模型組也有明顯縮短(P＜0．05)。兩組數(shù)據(jù)均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。本試驗(yàn)結(jié)果還顯示電針組額葉單胺遞質(zhì)含量比模型組含量明顯增加，并且本試驗(yàn)另一個(gè)方面AD大鼠的覺醒時(shí)間和直立次數(shù)電針組也明顯多于模型組，而單胺遞質(zhì)含量與睡眠覺醒機(jī)制也有密切關(guān)系［8］，所以推測(cè)，電針涌泉、百會(huì)增強(qiáng)單胺遞質(zhì)功能，促進(jìn)神經(jīng)干細(xì)胞分化，從而抑制神經(jīng)細(xì)胞凋亡等途徑改善AD大鼠學(xué)習(xí)記憶功能。但不排除還有其他因素也參與AD大鼠空間學(xué)習(xí)記憶功能的調(diào)節(jié)。

目前醫(yī)學(xué)界對(duì)于阿爾茨海默病的治療尚未有有效的治療方案，但有大量研究與文獻(xiàn)報(bào)道［9～12］，針灸治療阿爾茨海默病的療效確切而肯定，具有極高的使用價(jià)值與科學(xué)內(nèi)涵，其具體作用機(jī)制學(xué)者多從神經(jīng)分子微生物學(xué)、神經(jīng)行為學(xué)以及神經(jīng)電生理學(xué)等方面闡述，有一定意義，但尚缺乏大量的臨床研究與權(quán)威的臨床報(bào)道，所以針刺改善阿爾茨海默病患者學(xué)習(xí)記憶功能的機(jī)制還需要進(jìn)一步研究，以便更好的來指導(dǎo)臨床對(duì)于阿爾茨海默病的治療。

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