肺結核患者外周血腺苷脫氨酶活性與T淋巴細胞亞群定量檢測的相關性及臨床意義

端木和運,韋生坤

(江蘇省常州市第三人民醫院肺科,江蘇常州,213001)

結核病的免疫是 T淋巴細胞介導的細胞免疫,對結核病的發病和轉歸具有決定性意義。腺苷脫氨酶(ADA)是人體嘌呤核苷代謝中的重要酶,在淋巴細胞中活性最高,是前 T淋巴細胞分化為T淋巴細胞不可缺少的酶。為進一步了解外周血ADA活性與T淋巴細胞亞群的關系及其臨床意義,本院對肺結核患者,進行了外周血淋巴細胞內ADA活性和 T淋巴細胞亞群的定量檢測,現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

將本科2008年9月—2012年5月收治的145例住院肺結核患者納入檢測組,其中初治100例,復治45例,均依據臨床癥狀、影像學、痰涂片或培養陽性進行診斷,且經抗結核治療后好轉。上述患者中男102例,女43例,年齡15～82歲,平均(44.5±6.4)歲。初治患者采用2HE(S)RZ/ 4HR方案,復治患者采用 2HLvERZ/HERZ/ 5HRE方案。所有患者未使用免疫調節劑,且均無心、肝、腎等重要臟器疾患,肝、腎功能檢查正常,無合并糖尿病。另選同期60例來自本院健康體檢者作為對照組,其中男36例,女24例,年齡23～76歲,平均(46.8±6.1)歲。2組患者性別、年齡等資料比較,差異無統計學意義(P>0.05),具有可比性。

1.2 方法

標本采集時間為6∶00～7∶00,空腹采靜脈血2 mL于肝素抗凝管內,用流式細胞儀檢測 T淋巴細胞亞群CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+,采靜脈血2 mL于肝素抗凝管內,由美國杜邦全自動化分析儀ADA檢測,試劑:由上海復星長征醫學科學有限公司生產。采用流式細胞檢測技術(FCM)檢測外周血中的 T淋巴細胞亞群,FCM為美國BD公司生產,型號為FACS Calibur。

2 結 果

2.1 2組各數據檢測結果比較

檢測組患者與正常對照組ADA、T淋巴細胞亞群檢測數據比較,差異有統計學意義(P<0.05或 P<0.01),見表1。

表1 2組各數據檢測結果比較(±s)

表1 2組各數據檢測結果比較(±s)

與對照組比較,3P<0.05,33P<0.01

組別 n ADA CD3+ CD4+ CD8+ CD4+/CD8+對照組 65 8.0±5.0 70.0±6.0 40.0±4.0 31.0±5.0 1.3±0.2檢測組 145 17.0±3.033 60.0±10.03 36.0±6.03 37.0±8.03 0.9±0.33

2.2 檢測組各數據檢測結果與年齡的比較

肺結核ADA、T淋巴細胞亞群檢測數據與年齡比較,差異無統計學意義(P>0.05),見表2。

表2 檢測組各數據檢測結果與年齡的比較(±s)

表2 檢測組各數據檢測結果與年齡的比較(±s)

指標 <30歲(n=15) 31～40歲(n=25) 41～50歲(n=45) 51～60歲(n=40) >60歲(n=20) ADA 18.0±7.0 19.0±7.0 25.0±5.0 16.0±7.0 16.0±7.0 CD3+ 60.0±10.0 58.0±10.0 58.0±10.0 59.0±10.0 60.0±10.0 CD4+ 35.0±8.0 37.0±8.0 36.0±11.0 34.0±10.0 35.0±7.0 CD8+ 37.0±6.0 37.0±8.0 37.0±7.0 38.0±7.0 38.0±8.0 CD4+/CD8+ 1.0±0.1 1.1±0.2 1.0±0.0 0.9±0.1 0.9±0.1

2.3 檢測組各數據檢測結果與肺結核病情比較

檢測組ADA、T淋巴細胞亞群檢測數據與病情比較,差異無統計學意義(P>0.05),見表3。

表3 檢測組各數據檢測結果與肺結核病情比較(±s)

表3 檢測組各數據檢測結果與肺結核病情比較(±s)

痰菌涂片初復治指標 涂(+)(n=70) 涂(-)(n=75)初治(n=100) 復治(n=45) ADA 18.0±6.0 17.0±4.0 17.0±5.0 18.0±6.0 CD3+ 59.0±9.0 59.0±50.0 60.0±7.0 59.0±9.0 CD4+ 35.0±6.0 36.0±5.0 37.0±5.0 35.0±7.0 CD8+ 38.0±8.0 36.0±8.0 37.0±8.0 38.0±8.0 CD4+/CD8+ 1.0±0.19 1.0±0.2 0.9±0.2 1.0±6.5

2.4 檢測組各數據檢測結果與治療不同時期的比較

檢測組ADA、T淋巴細胞亞群檢測數據與治療不同時期的比較,差異有統計學意義(P<0.01),見表4。

表4 檢測組各數據檢測結果與治療不同時期的比較(±s)

表4 檢測組各數據檢測結果與治療不同時期的比較(±s)

與治療前比較,33P<0.01

指標 治療前 治療后2個月 治療后6個月ADA 17.0±4.0 14.0±4.033 12.0±4.033 CD3+ 59.0±10.0 62.0±9.033 67.0±7.033 CD4+ 35.0±8.0 37.0±7.033 37.0±5.033 CD8+ 37.0±8.0 36.0±6.033 33.0±5.033 CD4+/CD8+ 0.9±0.2 1.1±0.133 1.2±0.133

3 討 論

ADA是嘌呤核苷酸代謝過程中起重要作用的酶,廣泛分布于 T淋巴細胞內,是前 T淋巴細胞分化為T淋巴細胞不可缺少的酶,與T細胞的分化與增殖密切相關,尤其與T淋巴細胞的激活有關。鄢仁晴等[1]認為持續高活性的ADA即可使T化成熟不可缺少的成分,持續高活性的ADA即可使 T淋巴細胞不斷處于旺盛的增殖狀態; ADA活性亦是反映細胞免疫功能的一個重要指標,是活動性肺結核輔助性 T淋巴細胞(CD4+)的一種標志物。結核是 T淋巴細胞介導為主的多種細胞因子參與的綜合病理反應有關[2-3],可激發前淋巴細胞分化為T淋巴細胞增加,促使淋巴細胞內小分子ADA進入血液中,導致肺結核患者血清中ADA明顯升高。T淋巴細胞不僅是細胞免疫的主要細胞,而且是更重要的免疫調節細胞,其免疫調節作用是通過亞群細胞實現的。由于ADA活性是反映細胞免疫功能的一個重要指標,肺結核患者T淋巴細胞亞群比例失調與淋巴細胞內ADA活性升高有密切的關系[4]。Kar2 taloglu等[5]報道肺結核患者血清ADA水平明顯高于健康人,在肺結核不同時期,血清ADA水平亦有變化,隨著治療病情好轉,血清ADA逐漸下降。血清ADA分為ADA1與ADA2兩種,Ishii等[6]通過測定肺結核患者治療前后3個月血清ADA,ADA1、ADA2及T淋巴細胞亞群,發現肺結核患者ADA水平與T淋巴細胞亞群有關,血清ADA2的活性與CD3+淋巴細胞及CD4+淋巴細胞數量有關,血清ADA1的活性與淋巴細胞的數量無關,而血清ADA1的活性與肺結核病程有一定的關系。Reiley等[7]認為CD4+T細胞在肺結核免疫防御機制中占有重要地位,CD4+T細胞表達降低可能是肺結核惡化有原因之一。抗結核治療后病情好轉后CD4+水平升高。外周血T淋巴細胞用其亞群分析是公認的反映機體細胞免疫狀態的較好指標[8]。其中CD3+代表 T淋巴細胞總數,CD4+為輔助性 T淋巴細胞、CD8+為抑制性T淋巴細胞,T細胞亞群間相互協作和制約,能產生適度的免疫應答,既能清除病原體,以能避免過強的免疫反應損傷自身組織,是機體正常自穩的功能。T細胞在肺結核免疫防御機制中占有重要地位,CD4+T細胞的表達降低,可能是肺結核惡化的原因之一。有效的抗結核治療有助于CD4+水平升高。本文研究發現肺結核患者與正常對照組ADA、T淋巴細胞亞群檢測數據對比分析,肺結核患者血清ADA水平明顯高于健康人群,CD3+、CD4+明顯低于健康人群:CD8+升高, CD4+/CD8+降低,2者比較差異有統計學意義。抗結核治療2、6個月后,血清ADA水平明顯下降,CD3+、CD4+。顯著升高,CD8+細胞顯著降低,兩組比較差異有統計學意義。可見ADA與T淋巴細胞亞群CD4+/CD8+2者之間有著明顯的相關性。本研究結果顯示,患者的年齡及病情影響ADA,T淋巴細胞亞群在外周血中的表達差異無統計學意義。T淋巴細胞亞群表達功能異常是結核病灶存在和發展的基礎,如果CD3+、CD4+/ CD8+比值繼續下降并伴CD8+升高,提示病情加重、病灶擴散,預后較差。及時治療、糾正和提高機體細胞免疫功能有利于結核菌的清除、病情的緩解,適時檢測患者外周血ADA、T淋巴細胞亞群的變化對病情監控、療效判定和預后判斷具有臨床意義。

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