低劑量卡那霉素對(duì)小鼠噪聲性聽力損失的保護(hù)作用：依賴于給藥方案和遺傳背景的研究

謝立 摘譯 華清泉

審校/武漢大學(xué)人民醫(yī)院耳鼻咽喉-頭頸外科(武漢 430060)

年輕人及幼年動(dòng)物的聽力易遭受噪聲及耳毒性藥物的影響，目前文獻(xiàn)更多的是支持二者在致聽力損失中的協(xié)同作用。但是，最近的試驗(yàn)卻意外發(fā)現(xiàn)低劑量卡那霉素(KM, 300 mg/kg皮下注射,2次/日,連續(xù)10日)能顯著減輕一月齡CBA/J小鼠的永久性噪聲性聽力損失和毛細(xì)胞損害，卡那霉素的保護(hù)作用在最后一次給藥后持續(xù)至少48小時(shí)，機(jī)理似乎與多次給藥后的累積效應(yīng)的預(yù)處理有關(guān)。

因耳蝸對(duì)噪聲和耳毒性損傷敏感，小鼠出生后的第一個(gè)月被稱為早期“敏感時(shí)期”，處于這一時(shí)期的CBA/J小鼠對(duì)噪聲有很強(qiáng)的易感性。根據(jù)最初的試驗(yàn)數(shù)據(jù)，尚不能明確以下幾點(diǎn)：①與上述方法不同的給藥方式是否具有等同或更好的保護(hù)作用；②與預(yù)處理過程聯(lián)系緊密的卡那霉素的保護(hù)作用是否專屬于小鼠的這一敏感時(shí)期；③卡那拉霉素的保護(hù)作用是否僅限于CBA/J小鼠。

為此，本文將67只CBA/J小鼠按性別隨機(jī)分組，皮下注射卡那霉素或生理鹽水10～11天，然后于出生后29或30天行噪聲暴露，另有13只兩月齡及8只一歲小鼠同時(shí)進(jìn)行試驗(yàn)，未接受試驗(yàn)的14只一月齡及4只一歲大的CBA/J小鼠作為對(duì)照以確立ABR反應(yīng)閾及毛細(xì)胞的正常值。由于遺傳背景不同于CBA/J小鼠，本研究另選擇21只C57BL/6J (B6)小鼠接受同樣試驗(yàn)。卡那霉素均按300 mg/kg皮下注射，但給藥次數(shù)及間隔時(shí)間有差異，1月齡CBA/J小鼠在生后20天開始注射，分為1次/天(10次)、2天1次(5次)、3天1次(4次)，其余的在生后28或29天時(shí)單次注射，出生后30天時(shí)給予噪聲暴露。兩月齡和1歲CBA/J小鼠1天注射1次，連續(xù)10天，第11天時(shí)給予噪聲暴露。B6小鼠在生后20～30天時(shí)注射2次/天，出生后30天時(shí)給予噪聲暴露。噪聲暴露選用寬帶噪聲(4～45 kHz, 110 dB SPL)，暴露時(shí)間因小鼠品系及年齡而異，生后30～31天的CBA/J小鼠暴露30 s,B6小鼠暴露30 m，2月齡CBA/J小鼠暴露15 m，1年齡的CBA/J小鼠暴露2 h，使試驗(yàn)動(dòng)物ABR檢測(cè)結(jié)果為中度聽力下降(20～50 dB)。于噪聲暴露后10～14天行ABR檢測(cè)，并提取耳蝸組織檢測(cè)外毛細(xì)胞存活率，對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析及多重比較。結(jié)果顯示，接受兩小時(shí)的寬帶噪聲暴露后的1年齡CBA /J小鼠獲得幾乎完全的保護(hù)作用，CBA/J小鼠降低給藥頻率至隔日一次與每日兩次給藥所獲得的保護(hù)作用無明顯差異，而噪聲暴露前24或48小時(shí)給藥1～2次，其保護(hù)作用顯著下降。而且，對(duì)CBA/J小鼠有保護(hù)作用的給藥方案并不能對(duì)B6小鼠的噪聲所致聽力及毛細(xì)胞的損傷起保護(hù)作用。

總之，卡那霉素對(duì)CBA/J小鼠噪聲性聾的保護(hù)作用涉及一個(gè)較寬泛的給藥方案，且并非僅限于“敏感時(shí)期”，其機(jī)制與耳蝸外毛細(xì)胞的顯著保留相關(guān)，卡那霉素極有可能促進(jìn)了未被噪聲致死的毛細(xì)胞的保留及功能修復(fù)。因B6小鼠未能獲益，這一保護(hù)作用似乎并不具有普遍性，提示近親品系在對(duì)低劑量卡那霉素的內(nèi)部反應(yīng)上存在著基本的遺傳相關(guān)性差異。建立在CBA/J和 B6小鼠相交叉遺傳背景上的經(jīng)典遺傳學(xué)方法可能會(huì)發(fā)現(xiàn)在卡那霉素參與的梯級(jí)保護(hù)或其他預(yù)處理過程中起關(guān)鍵作用的基因座，其與人類的生物相似性將在一定程度上決定誰更易罹患聽力損失。