人表皮生長因子受體-2在胃癌組織中的表達及意義

劉 莉，姜 勇，李 麗，劉都禮

(1.成都大學附屬醫院病理科，四川 成都 610081;2.四川大學華西醫院病理科，四川 成都 610041)

胃癌是我國最常見的消化道惡性腫瘤之一，手術與化療仍是治療胃癌的主要手段。隨著腫瘤分子生物學的發展，分子靶向藥物治療成為目前腫瘤治療的一個熱點。靶向治療聯合化療應用已開始進行臨床試驗［1-3］，人表皮生長因子受體-2(human epidermal growth factor receptor 2，HER-2)是胃癌靶向治療的靶點基因。本研究采用免疫組化方法檢測胃癌組織中HER-2的表達，旨在探討HER-2與胃癌臨床病理特征的關系，為臨床分子靶向藥物的選擇提供參考，也為胃癌的預后判斷提供客觀的參考指標。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2009年6月至2010年6月在成都大學附屬醫院和四川大學華西醫院行根治性手術的胃癌手術標本70例進行研究。全部病例術前均未行放、化療。男43例，女27例，年齡22～87歲，平均年齡53.23歲。腫瘤直徑0.8～15.0 cm，平均4.56 cm。腫瘤部位:胃上部(賁門/胃底)20例，中部(胃體)17例，下部(胃竇/幽門)33例。分化程度:高、中分化30例，低分化及印戒細胞癌40例。侵襲深度:未侵及漿膜45例，侵及漿膜25例。淋巴結轉移情況:有淋巴結轉移49例，無淋巴結轉移21例。根據國際抗癌聯盟(UICC)關于胃癌TNM分期方法進行臨床分期，Ⅰ期/Ⅱ期32例，Ⅲ期/Ⅳ期38例。

1.2 方法 主要試劑:HER-2，鼠抗人單克隆抗體，編號ZM-0065，克隆號:B68。試劑盒選用即用型免疫組化二步法Elnvision廣譜染色試劑盒及DAB顯色試劑盒，均購自北京中杉金橋生物技術有限公司。方法:腫瘤組織標本均經甲醛固定、石蠟包埋，并經HE染色組織學確診。免疫組化采用Envision二步法，嚴格按產品說明書操作。鏡下圖像以Olympus數碼顯微成像系統BX40進行采集、分析。

1.3 結果判定 參照修訂后的HercepTestP評分標準［1］，0為沒有染色或＜10%的瘤細胞有膜染色;1+為＞10%的瘤細胞有微弱的膜染色，或瘤細胞只有部分膜染色;2+為＞10%的瘤細胞有弱到中等的完全或基底外側膜染色;3+為＞10%的瘤細胞有中等到強的完全或基底外側膜染色。用PBS代替一抗作陰性對照。每張切片由二位高年資病理醫師閱片判讀。

1.4 統計學方法 應用SPSS 15.0統計軟件包進行統計學分析。計數資料采用兩個(或多個)樣本率比較的χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 HER-2基因在胃癌組織中的表達情況 HER-2陽性定位于細胞膜，呈棕褐色顆粒狀，部分細胞漿著色(圖1)。陽性表達率為27.1%(19/70)，過表達率為15.7%(11/70)。

圖1 胃癌組織HER-2的免疫組化染色(×400)

2.2 HER-2基因表達與臨床病理參數的關系HER-2在胃癌組織中的表達與腫瘤分化程度、侵襲深度、有無淋巴結轉移及 TNM分期有關(P＜0.05)，而與患者的性別、年齡、腫瘤部位和大小無關(P＞0.05)。分化好的胃癌病例陽性表達明顯高于低分化癌，見表1。

3 討論

HER-2也稱為 c-erB-2或 HER-2/neu，屬于HER/ErbB家族的四個成員之一。HER-2單體無活性，必須形成二聚體才能產生活化信號。HER-2異質二聚體大大減弱了EGFR與cab1的偶聯，減少了EGFR在細胞內吞過程中的降解，促進EGFR循環回到細胞膜，使EGFR在細胞膜過度表達，加速了細胞的增殖，導致腫瘤的形成和增長加快。國內張杰等［4］通過對123例胃癌組織的研究認為HER-2/ neu基因擴增或過表達與胃癌患者的預后有明顯關系，特別是有該基因擴增的患者，其術后死亡率高、生存期短、預后差。本研究結果顯示:HER-2在胃癌組織中的陽性率為27.1%，在胃癌中過表達率(IHC3+)為15.7%。而ToGAⅢ期臨床試驗［1］研究的IHC3+為5.9%～32.8%，在不同國家和地區差異較大。

表1 胃癌組織中HER-2的表達與其臨床病理參數的關系

本研究還顯示HER-2表達隨腫瘤分化越高表達越強，HER-2陽性表達與胃癌的侵襲、淋巴結轉移有關，和文獻基本一致。說明HER-2參與了胃癌的增殖、侵襲、轉移等行為，HER-2過表達提示胃癌患者預后越差，并且HER-2已經成為胃癌靶向治療的靶標［5.6］。

曲妥珠單抗作為乳腺癌治療的第一個分子靶向藥物，已在HER-2過表達的乳腺癌臨床治療中取得了明顯療效。篩選患者時，HER2蛋白表達IHC3+可以直接進行靶向治療，IHC2+則需進行熒光原位雜交(FISH)基因檢測。IHC3+患者可避免做FISH檢測的高昂費用。曲妥珠單抗在胃癌中的應用和HER2檢測標準化尚在研究中。Tanner等［7］曾專門進行了曲妥珠單抗對胃癌和乳腺癌藥物敏感性比較的研究，發現兩種腫瘤對曲妥珠單抗的敏感性相同，因此曲妥珠單抗臨床治療HER-2高表達的胃癌理應有效。在2009美國臨床腫瘤學會(ASCO)年會上，曲妥珠單抗治療HER-2陽性胃癌的ToGA研究結果［1］格外引人矚目。在3807例晚期胃癌患者中，HER-2陽性表達率為22.1%，曲妥珠單抗與化療聯合的療效明顯優于單純化療。曲妥珠單抗成為HER-2陽性胃癌患者的重要治療藥物。本研究結果提示，檢測胃癌組織中HER-2的表達有助于篩選對曲妥珠單抗治療敏感的胃癌患者，同時對胃癌患者的預后評價提供參考。

［1］Bang YJ，Van Cutsem E，Feyereislova A，et al.Trastuzumab in com

bination with chemotherapy versus chemotherapy alone for treatment of HER-2positive advanced gastric or gastro-oesophageal junction cancer(ToGA):a phase3，open-label，randomised controlled trial［J］.Lancet，2010，376(9742):687-697.

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［3］Lenz HJ，Mayer RJ，Gold PJ，et al.Activity of Cetuximab in patients with colorectal cancer refractory to both Irinotecan and Oxaliplatin［J］.J Clin Oncol，2004，24:3510.

［4］張杰，舒維清，朱衛，等.胃癌中Her-2/neu過表達與基因擴增及其意義［J］.中華病理學雜志，2003，32(1):52-53.

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［6］Okines AF，Cunningham D.Trastuzumab in gastric cancer［J］.Eur J Cancer，2010，46(11):1949-1959.

［7］Tanner M，Hollmen M，Junttila TT，et al.Amplification of HER-2 in gastric carcinoma:association with TopoisomeraseⅡagene amplification，intestinal type，poor prognosis and sensitivity to trastu-zumab［J］.Ann Oncol，2005，16(2):273-278.