肺癌和結(jié)核性胸腔積液/血清MCP21及其受體CCR2的測(cè)定及臨床意義

王 威,周未花,葉軍輝,楊群政,顧寶羅,童向民

（1.三門(mén)縣人民醫(yī)院,浙江三門(mén)317100；2.富陽(yáng)市中醫(yī)院,浙江富陽(yáng)311400； 3.杭州市蕭山區(qū)第一人民醫(yī)院,浙江杭州311200；4.浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院,浙江杭州310003）

肺癌和結(jié)核性胸腔積液/血清MCP21及其受體CCR2的測(cè)定及臨床意義

王 威1,周未花1,葉軍輝1,楊群政2,顧寶羅3,童向民4

（1.三門(mén)縣人民醫(yī)院,浙江三門(mén)317100；2.富陽(yáng)市中醫(yī)院,浙江富陽(yáng)311400； 3.杭州市蕭山區(qū)第一人民醫(yī)院,浙江杭州311200；4.浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院,浙江杭州310003）

目的：探討肺結(jié)核,肺癌患者的胸水,外周血中MCP21及其特異性受體CCR2的表達(dá)及其臨床意義。方法：用ELISA測(cè)定28例肺結(jié)核,25例肺癌患者以及正常對(duì)照20例血清和胸水MCP21的表達(dá)水平,以免疫組織化學(xué)的方法檢測(cè)肺癌患者肺組織中CCR2的表達(dá)。結(jié)果：肺癌患者血清及胸水中MCP21水平升高較肺結(jié)核患者升高明顯,而且肺癌組織中CCR2的表達(dá)強(qiáng)度與腫瘤的分化密切相關(guān)。結(jié)論：肺癌患者M(jìn)CP21以及CCR2高表達(dá)可以作為一種腫瘤標(biāo)志,而且其表達(dá)可能與肺癌的惡性程度有關(guān)。

趨化因子；單核細(xì)胞趨化蛋白21；肺癌

10.3969/j.issn.100221701.2012.02.072

有許多趨化因子在肺癌發(fā)生發(fā)展中起作用,其形成過(guò)程極其復(fù)雜,在其中發(fā)揮著作用。研究發(fā)現(xiàn)單核細(xì)胞趨化蛋白21（monocyte chemoattractant protein21,MCP21）及受體CCR2和腫瘤的血管生成有關(guān)[1],但在肺癌以及肺結(jié)核中少見(jiàn)報(bào)道。我們對(duì)結(jié)核性及惡性腫瘤胸水及血清中MCP21含量進(jìn)行檢測(cè),旨在探討它及其受體在肺癌和肺結(jié)核中的作用及意義。

一、材料和方法

1.研究實(shí)驗(yàn)對(duì)象。本院收治的28結(jié)核性胸腔積液患者以及25例肺癌伴有中等到大量胸水。20例正常對(duì)照組均為排除了重大疾病的健康成年人。患者標(biāo)本取自外周血和胸水,正常對(duì)照組取自外周血。

2.標(biāo)本收集及MCP21的ELISA檢測(cè)。抽取空腹外周靜脈血5ml,或者胸水5ml。操作按照R＆D試劑盒（Catalog Num2 ber DSA00,美國(guó)R＆D公司）說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

3.CCR2免疫組織化學(xué)檢測(cè)。采用Evision+TM System試劑盒（美國(guó)Gene Tech公司）二步法染色。結(jié)果的觀察標(biāo)準(zhǔn)為：CCR2胞膜和胞質(zhì)呈棕黃色為陽(yáng)性。

二、結(jié) 果

1.肺結(jié)核、肺癌患者和正常人MCP21水平的比較。肺癌和結(jié)核患者的外周血MCP21水平較正常人高（P＜0.05）,而結(jié)核組和肺癌組之間的數(shù)值相接近（P＜0.05）。在胸腔積液的MCP21水平檢測(cè)中,結(jié)核組患者的MCP21表達(dá)與同組的血清表達(dá)接近（P＜0.05）。但是胸水的MCP21表達(dá),肺癌較結(jié)核組患者明顯升高（P＜0.05）。見(jiàn)附表。

2.CCR2的表達(dá)。同分化度肺癌患者CCR2的表達(dá)：高、中、低分化的腫瘤細(xì)胞CCR2的免疫組化表達(dá)不同,高分化表達(dá)弱陽(yáng)性,而中、低分化表達(dá)強(qiáng)陽(yáng)性。

附表 血清及胸水MCP21的水平（±s）

注：3同組內(nèi)與血清水平比較,P＜0.05

組別例數(shù)MCP21（pg/ml）血清胸水肺癌組25 249±62#1161±2223#結(jié)核組28 213±66 243±87對(duì)照組20 69±59

三、討 論

趨化因子MCP21是具有重要生理作用的化學(xué)趨化因子,有報(bào)道稱(chēng)肺癌與血中C2C趨化因子配體22（CCR22）/單核細(xì)胞趨化蛋白21（MCP21）作用緊密相關(guān)[2]。

文章研究表明,結(jié)核患者其MCP21的表達(dá)水平較正常人升高。在肺癌患者中,胸水和血清中的MCP21表達(dá)較正常人高,血液中肺癌和結(jié)核患者兩者結(jié)果接近,而胸水的MCP21表達(dá)高于外周血表達(dá)。由于MCP21主要被腫瘤細(xì)胞分泌,也可被間質(zhì)細(xì)胞分泌,所以肺癌組的表達(dá)較高,同樣胸水中的表達(dá)也高于外周血。

實(shí)驗(yàn)中還發(fā)現(xiàn),CCR2在分化程度低的肺癌組織中表達(dá)較高。由于Th2細(xì)胞上選擇性地表達(dá)CCR2,腫瘤組織多分泌Th2類(lèi)細(xì)胞因子,機(jī)體處于Th2細(xì)胞因子優(yōu)勢(shì)狀態(tài)是腫瘤免疫逃逸的機(jī)制之一[3]。所以我們認(rèn)為,MCP21以及受體CCR2的表達(dá)升高,可能與Th2細(xì)胞因子的升高以及腫瘤免疫逃逸有關(guān)。

趨化因子在炎癥中的研究比較深入,而在結(jié)核和肺癌胸水中的研究國(guó)內(nèi)尚未見(jiàn)報(bào)道。目前有研究認(rèn)為,如果阻斷趨化因子受體則會(huì)導(dǎo)致遷移細(xì)胞迷失方向,不能到達(dá)其最終目標(biāo)。在未來(lái)的幾年中,它們很可能成為治療腫瘤和變態(tài)反應(yīng)疾病的有效藥物,我們的研究為以后趨化因子的應(yīng)用奠定了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。

[1]Yang L,Shi GL,Song CX,et al.Relationship between genetic polymor2 phism of MCP21 and non2small2cell lung cancer in the Han nationality of North China.Genet Mol Res.2010 Apr,27,9（2）：765271.

[2]Conti I,Dube C,Rollins BJ.Chemokin2based pathogenetic mechanisms in cancer.Novartis Found Symp,2004,256：29241. [3]Takayuki Uneo,Masakazu Toi,et al.Significance of macrophage chemoat2 tractant protein21in macrophage recruitment,angiogenesis,and survival in human breast cancer.Clinical Cancer Research,2000,6：328223289.

G644

A

100221701（2012）0220142202

2011204

王 威,男,本科,檢驗(yàn)師,主要從事免疫學(xué)研究工作。

浙江省衛(wèi)生廳（2011ZDA008）和杭州市科技局項(xiàng)目資助（20110833B53,20110833B42）。

●教學(xué)方法