桑葉的化學成分研究

楊艷

（云南省大理州人民醫院，云南大理 671000）

桑葉（Folium Mori）為桑科植物桑（Morus alba L.）的干燥葉，其味苦、甘，性寒，歸肺、肝經，具有疏散風熱、清肺潤燥、平肝明目、涼血的功能[1]。現代藥理學及化學分析研究表明桑葉具有降血糖、降血脂、抗氧化、抗病毒等多種活性物質，還具有抗腫瘤、抗病毒、抗絲蟲等作用[2-4]。另外，桑葉內含豐富纖維素，具有導瀉通便、保護腸黏膜和減肥的作用[5]。

該試驗以桑葉為研究對象，運用物理、化學等方法綜合分析桑葉的化學成分，旨在為桑葉的廣泛應用提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 供試材料。試驗用桑葉購自大理市三月街藥材市場，經大理州藥檢所中藥室鑒定為桑葉。

1.1.2 主要試劑。薄層層析用硅膠GF254、柱層析用硅膠（100-200目）均由青島海洋化工有限公司生產；Sephadex LH-20由瑞典 Amersha Pharmacia Biotech公司生產；薄層色譜硅膠及硅膠柱其他所用試劑均為分析純。

1.1.3 主要儀器。RD1型熔點測定儀（溫度計未經校正）由天津國銘醫藥設備有限公司生產；GCMSQP2010型氣質聯用儀由日本島津公司生產；Varian UNITY INOVA-400型高分辨核磁共振儀（TMS內標）由美國瓦里安公司生產。

1.2 方法

1.2.1 提取與分離。干燥桑葉5 kg，95%乙醇回流提取3次，每次2 h，回收乙醇至無醇味，水混懸，攪拌，放置過夜。混懸液先后分別用石油醚、氯仿、乙酸乙酯萃取得到3個部位。石油醚部位，經反復硅膠柱層析，氯仿-醇進行梯度洗脫，反復聚酰胺層析，氯仿-甲醇進行梯度洗脫，以及 Sephadex LH-20柱層析，氯仿-甲醇洗脫，分離得到化合物1（120 mg）、2（90 mg）、3（21 mg）。乙酸乙酯萃取部分回收有機溶劑至干后，上Lipophilic Sephadex柱，用氯仿將葉綠素洗脫后，用甲醇沖柱，取甲醇洗脫部分濃縮至干，再反復經硅膠柱層析、Sephadex LH-20柱層析，得化合物 4（12 mg）、5（23 mg）、6（34 mg）。

1.2.2 分析方法。通過與標準品對照、理化性質檢測及相關波譜學方法分析，對提取和分離出的化合物進行結構鑒定。

2 結果與分析

化合物1：白色針狀結晶，mp：139～140℃。不溶于水、甲醇、丙酮，易溶于石油醚、乙醚、氯仿。經TLC試驗，用不同的展開系統：氯仿︰甲醇（9︰1）、石油醚︰乙酸乙酯（6︰1）、石油醚︰丙酮（8︰1），試樣與 β-谷甾醇對照品的Rf值相同；以10%H2SO4-EtOH液顯色，均呈紫紅色斑點。與對照品混合后測熔點，不下降，且與文獻[6]一致，從而確定該化合物為β-谷甾醇。

化合物2：白色粉末，mp：292～293 ℃，經TLC試驗，用不同的展開系統：氯仿︰甲醇(6︰1)、石油醚︰乙酸乙酯(4︰1)、石油醚︰丙酮(9︰1)，試樣與 β-胡蘿卜苷對照品Rf值相同；以10%H2SO4-EtOH液顯色，均呈紅色斑點。與對照品混合后測熔點，不下降，且與文獻[7]一致，從而確定該化合物為β-胡蘿卜苷。

化合物 3：淡黃色針晶（乙酸乙酯），mp：207～208℃，Borntrager’s反應陽性，顯示可能為羥基蒽醌類化合物。1HNMR(400 MHz，CDCl3) δ：2.45（3H，s，CH3），3.93 （3H，s，OCH3），6.89 （1H，d，J=2.2 Hz，H-7），7.22（2H，s），7.53（1H,s,H-4），12.13（1H,s,-OH），12.15（1H,s,α-OH）。13CNMR（DMSO）δ：166.8，166.2，161.5，148.8，135.1，133.2，124.2，120.8，113.5，110.1，107.8，106.6，56.2，22.3。以上數據與文獻[8-9]基本一致，從而確定該化合物為大黃素甲醚。

化合物4：油狀化合物，易溶于二氯甲烷、氯仿等溶劑。1HNMR（400 MHz，CDCl3） δ：0.98（6H，t），1.47（4H，m），1.72（4H，t），4.29（4H，t），7.61（2H，m），7.72（2H，m）。13CNMR（DMSO）δ：169.3，133.8，132.5，130.2，66.7，31.9，20.5，14.1。以上數據與文獻[4,10]基本一致，從而確定該化合物為鄰苯二甲酸丁二酯。

化合物5：白色針狀結晶，紫外燈下有藍色熒光，易溶于甲醇、DMSO、乙酸乙酯。1HNMR（400 MHz，CDCl3）δ：6.22（1H，d，J=9 Hz），6.73（1H，d，J=2 Hz），6.78（1H，dd，J=8.5 Hz，2 Hz），7.55（1H，d，J=8.5 Hz），7.92（1H，d，J=9.5 Hz），10.56（1H，s）。13CNMR（DMSO）δ：161.9，160.7，155.8，144.8，130.2，113.6，111.9，111.6，102.5。以上數據與文獻[11]基本一致，從而確定該化合物為7-羥基香豆素。

化合物6：白色片狀結晶，mp：104～105℃，Libermann 反應陽性，1HNMR（CDCl3）δ：0.72～2.73（m，43H），3.24（1H，m），3.52（br，OH），5.04（1H，m），5.16（1H，m），5.35（1H，m）。13CNMR（DMSO）δ：140.8，121.7，71.9，56.8，56.6，50.2，42.4，42.3，40.6，37.3，36.6，31.9，31.7，30.3，29.2，24.1，21.3。以上數據與文獻[12]基本一致，從而確定該化合物為豆甾醇。

圖1 化合物Ⅰ～Ⅵ

3 結論

從桑葉乙醇提取物的石油醚、氯仿、乙酸乙酯萃取部分分離得到6個化合物，經與標準品對照、理化性質檢測及相關波譜學方法分析，分別鑒定為β-谷甾醇、β-胡蘿卜苷、大黃素甲醚、鄰苯二甲酸丁二酯、7-羥基香豆素、豆甾醇。

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