花旗澤仁對胰島素抵抗大鼠胰島素敏感性的影響

葛鵬玲，劉萍，馬育軒，李冀

(黑龍江中醫藥大學，黑龍江 哈爾濱 150040)

2型糖尿病的重要病理特征是胰島素抵抗。胰島素抵抗(insulin resistance IR)是指機體靶器官或組織對胰島素生物效應的敏感性降低或喪失，即胰島素促進葡萄糖攝取和利用的效率下降［1］。IR貫穿了2型糖尿病發生發展的全過程［2－7］，同時也是高血壓、冠心病、動脈硬化、肥胖等多種疾病共同聯系的病理基礎。

花旗澤仁(西洋參、薏苡仁、澤瀉等)是臨床治療脾虛濕盛，濕熱內蘊型糖尿病胰島素抵抗及相關疾病的經驗方，療效確切。本研究利用胰島素抵抗大鼠模型，觀察花旗澤仁對胰島素敏感性的影響，證實花旗澤仁改善2型糖尿病胰島素抵抗的藥理作用。

1 材料與方法

1．1 實驗動物

清潔級健康成年Wistar大鼠60只，雄性，體質量180～220g，購自上海斯萊克實驗動物有限公司，動物合格證號:SCXK(滬)2007－0007。

1．2 試劑與儀器

GMJ型全自動放射免疫γ計數器(江蘇省醫療電子研究所);酶標儀(BIO－TEX INSTRUMENTS．

基金項目:國家科技重大專項(重大新藥創制2012ZX09103201－018);黑龍江省自然科學基金(LC2011C03);黑龍江省教育廳項目(11521265);黑龍江省教育廳留學回國人員科技項目擇優資助項目(2010);黑龍江省博士后科學基金(LBH－Z09001);黑龍江中醫藥大學?；?200723)

作者簡介:葛鵬玲(1974－)，女，醫學博士，副教授，碩士研究生導師，黑龍江中醫藥大學中藥學博士后科研流動站在站工作人員，主要從事中藥藥效物質基礎及作用機理研究。

通訊作者:李冀(1960－)，男，教授，博士研究生導師，國家重點學科方劑學學科帶頭人，主要從事方劑配伍規律、作用機理及藥效物質基礎研究。

收稿日期:2012－03－05

修回日期:2012－04－17

INC．);TGL－16G臺式高速離心機(上海醫用分析儀器廠);One Touch血糖儀及試紙條(美國Lifescan);胰島素放射免疫分析試劑盒(北京科美東雅生物技術有限公司);羅格列酮(0409002);鏈脲佐菌素(Sigma公司)。

1．3 IR大鼠模型的制備

脂肪乳的制備:將豬油(20%)、丙硫氧嘧啶(1%)、膽固醇(5%)、谷氨酸鈉(1%)、蔗糖(5%)、果糖(5%)和食用鹽(6%)溶于Tween 80(20%)和丙二醇(30%)中，加水定溶配成脂肪乳。

模型制備:將Wistar大鼠灌胃脂肪乳10天，灌胃量為10ml/kg/d。動物禁食不禁水12h后腹腔注射鏈脲佐菌素(Streptozocin，STZ)40mg/kg/d(STZ溶于0.1mol/L新鮮配制的枸櫞酸鈉緩沖液中，pH值4．2)，連續注射2天。每次腹腔注射鏈脲佐菌素后15min，給大鼠腹腔注射胰島素0．4U，2．5h和5h后灌胃給予25%葡萄糖10ml/kg。最后一次注射鏈脲佐菌素后72h監測血糖。所有動物繼續灌胃脂肪乳10ml/kg/d，共灌胃30 天［8］。

1．4 分組及給藥

以胰島素敏感指數為篩選指標，于造模組中篩選造模成功大鼠54只，隨機分為花旗澤仁高劑量組(13只)、花旗澤仁低劑量組(13只)、羅格列酮組(14只)和模型組(14只)。將花旗澤仁水煎，濃縮，得花旗澤仁水煎液。花旗澤仁高劑量組按10．8g/kg劑量灌胃給藥;花旗澤仁低劑量組按5．4g/kg劑量灌胃給藥;羅格列酮組按0．4mg/kg劑量灌胃給藥;空白組和模型組每日灌服同等體積的生理鹽水10ml/kg。

1．5 標本收集及檢測

連續給藥6周，于末次給藥后，禁食12h，尾靜脈采血，應用血糖儀檢測空腹血糖(FBG);摘眼球取血，靜置30min后，4℃離心(3 000rpm)15min，吸取上部血清，采用放射性免疫分析法測定血清胰島素(FINS);計算胰島素敏感指數ISI=［1/(FBG×FINS)］。

1．6 統計學處理

2 實驗結果

2．1 花旗澤仁對胰島素抵抗大鼠空腹血糖(FBG)、空腹胰島素(FINS)的影響

由表1結果可見，與空白組比較，模型組大鼠空腹血清FBG、FINS水平升高，差異極顯著(P＜0．01);與模型組比較，花旗澤仁高、低劑量組大鼠FBG、FINS下降，差異極顯著(P＜0．01)。本實驗結果提示，花旗澤仁可降低胰島素抵抗大鼠的FBG和FINS，改善胰島素抵抗時的糖代謝異常。

表1 花旗澤仁對胰島素抵抗大鼠FBG和FINS的影響(±s)

表1 花旗澤仁對胰島素抵抗大鼠FBG和FINS的影響(±s)

注:與空白組比較，▲▲P ＜0．01;與模型組比較，★★P ＜0．01。

分組 n FBG(mmol/L) FINS(μIU/ml)空白組10 4．53 ±0．44 26．02 ±4．73花旗澤仁高劑量組 13 5．74±0．54★★ 30．04±3．71★★花旗澤仁低劑量組 13 6．01±0．47★★ 31．72±5．39★★羅格列酮組 14 5．86±0．52★★ 30．25±5．33★★模型組 14 7．47 ±0．67▲▲ 38．91 ±6．30▲▲

2．2 花旗澤仁對胰島素抵抗大鼠胰島素敏感指數(ISI)的影響

由表2結果可見，與空白組比較，模型組大鼠ISI下降，差異極顯著(P＜0．01)，說明胰島素抵抗模型復制成功;與模型組比較，花旗澤仁高、低劑量組大鼠ISI胰島素抵抗升高，差異顯著(P＜0．05)。本實驗結果提示，花旗澤仁可升高胰島素抵抗大鼠的ISI，增強胰島素敏感性。

表2 花旗澤仁對胰島素抵抗大鼠ISI的影響(±s)

表2 花旗澤仁對胰島素抵抗大鼠ISI的影響(±s)

注:與空白組比較，▲▲P ＜0．01;與模型組比較，★P ＜0.05，★★P ＜0．01。

分組n ISI空白組10 －4．77 ±0．69花旗澤仁高劑量組 13 －5．27±0．41★花旗澤仁低劑量組 13 －5．36±0．30★羅格列酮組 14 －5．22±0．58★★模型組 14 －5．81±0．53▲▲

3 討論

糖尿病，特別是2型糖尿病發病率及致死率逐年升高，已被我國列入嚴重危害人民健康的10類(種)重大多發病和常見病之一。胰島素抵抗(insulin resistance IR)是2型糖尿病的重要病理特征，貫穿了2型糖尿病發生發展的全過程［2－7］，同時也是肥胖、高血壓、高血脂、冠心病等多種疾病共同聯系的病理基礎。發生IR的確切機制尚未完全闡明，按其產生環節目前被人為地分為受體前抵抗、受體水平抵抗和受體后抵抗，其中以后兩者尤為重要。

由于常用的胰島素增敏劑可促進肥胖的產生［9］，故西醫對IR的治療存在不可避免的治療矛盾。近年來，注重整體調節和辨證論治的中醫藥在IR及其相關疾病的防治中不斷取得新進展。實驗研究表明，西洋參具有改善胰島素抵抗的藥理作用［10］?；ㄆ鞚扇室宰剃幯a氣、清熱生津之西洋參，伍以利水、滲濕、泄熱之澤瀉，滲濕、健脾之薏苡仁，補氣健脾、利濕泄熱之功尤佳，對脾虛濕盛，濕熱內蘊患者的2型糖尿病胰島素抵抗療效確切。本研究利用胰島素抵抗大鼠模型，通過觀察花旗澤仁對大鼠胰島素敏感指數的影響，證實花旗澤仁改善2型糖尿病胰島素抵抗藥理的作用，為其在臨床推廣應用提供實驗依據。

本研究結果顯示，經藥物干預后，花旗澤仁高、低劑量組均可明顯升高大鼠胰島素敏感指數，與模型組比較差異顯著(P＜0．05)。因此，從實驗研究角度證實了花旗澤仁改善2型糖尿病胰島素抵抗的藥理作用，為進一步探討花旗澤仁的作用機制奠定了基礎。

［1］Panzer C，Lauer MS，Brieke A，et al．Association of fasting plasma glucose with heart rate recovery in healthy adults:a population－based study［J］．Diabetes，2002，51:803 －807．

［2］Himsworth．Diabetes Mellitus Its differentiation into insulin sensititive and insensititive type［J］．The Lancet，1936，18:127 －130．

［3］Yalow Rs，Berson SA．Immunoassay of endogenous plasma Insulin in man［J］．JClin Invest，1960，39:1157 － 1751．

［4］廖春分，丁洪成，廖勇敢，等．糖尿靈片治療陰虛熱盛型2型糖尿病的療效及安全性觀察［J］．西部中醫藥，2012，25(8):4 －6．

［5］高秀娟，吳范武，馬會霞，等．三清降糖方改善2型糖尿病患者胰島素抵抗的臨床研究［J］．西部中醫藥，2012，25(4):58 －59．

［6］馬海龍，張菊霞，謝慧榮，等．益氣養陰法配合豬胰子治療2型糖尿病50例療效觀察［J］．西部中醫藥，2012，25(6):72－73．

［7］劉希宏．中西藥物聯用對老年高血壓合并2型糖尿病患者腎功能的保護作用［J］．西部中醫藥，2012，25(7):9 －10．

［8］魏偉，吳希美，李元建．藥理實驗方法學［M］．北京:人民衛生出版社，2010:1367－1368．

［9］李秀鈞．胰島素抵抗綜合征［M］．北京:人民衛生出版社，2001:22－25．

［10］葛鵬玲，李冀，馬育軒，等．葡萄糖氧化酶法篩選西洋參干預胰島素抵抗脂肪細胞模型的活性成分［J］．中醫藥信息，2010，27(3):110－112．