紅花黃色素凍干粉針對大鼠體內體外血栓形成的影響

蘇慧，劉萍，溫薇，蘇云明

(黑龍江中醫藥大學，黑龍江 哈爾濱 150040)

中藥紅花為菊科植物紅花干燥管狀花，性溫，味辛，具有活血化瘀的功效。紅花黃色素為紅花的主要活性成分，研究證實［1－5］，紅花黃色素能明顯減輕心肌缺血及缺血再灌注損傷，抑制血小板聚集并改善血流動力學［6］。本實驗通過大鼠動靜脈旁路血栓形成及體外血栓形成實驗，觀察紅花黃色素凍干粉針對體內、體外血栓形成的影響，為其臨床應用提供實驗依據。

1 實驗材料

1．1 實驗藥物 注射用紅花黃色素凍干粉針由烏魯木齊郎潤醫藥開發有限公司提供;規格:80mg/支;用法:每天1支，用時以0．9%生理鹽水15～20ml溶解。

1．2 陽性對照藥 復方丹參注射液由上海第九制藥廠提供;規格:2m l/支;用法:靜脈注射4m l/次，溶于20m l 50%葡萄糖溶液中，1日1～2次。

1．3 實驗動物 Wistar大鼠，體質量250～300g，雌雄各半，由黑龍江中醫藥大學藥物安全性評價中心提供;動物合格證號:09－3－3。

1．4 實驗儀器 LBY－S5型血栓形成儀(北京宇華國際技術公司);DG－1型電熱干燥箱(重慶實驗設備

作者簡介:蘇慧(1979－)，女，講師，主要研究方向:中藥現代藥理學研究。

收稿日期:2012－07－15

修回日期:2012－08－14

廠);DT100分析天平(北京光學儀器廠);CS213電熱培養箱(重慶實驗設備廠)。

2 實驗方法

2．1 紅花黃色素凍干粉針對大鼠動靜脈旁路血栓形成的影響

取50只Wistar大鼠，稱質量后隨機分5組，每組10只，以0．3%戊巴比妥鈉30mg/kg腹腔麻醉，仰位固定于大鼠手術臺上，實施手術。彎剪剪去頸部位毛，正中切開頸部皮膚，鈍剝離分離右頸總動脈及左頸外靜脈，將事先充滿肝素生理鹽水(50u/ml)的聚乙烯管(分三段連結，在中段放入長6cm的4號手術線)的一端插入左頸外靜脈后，從聚乙烯管注入肝素50u/kg，夾住管壁，將右頸總動脈近心端以止血夾阻斷血流，眼科剪剪一“△”口，將聚乙烯管另一端插入右頸總動脈，結扎，立即舌下靜脈注射紅花黃色素凍干粉針溶液，低劑量組7.2mg/kg;中劑量組14.4mg/kg;高劑量組28.8mg/kg;陽對藥復方丹參注射液1.8ml/kg;陰性對照組給予等體積生理鹽水，10min后打開止血夾開放血流，血液從右頸總動脈經聚乙烯管返回左頸外靜脈，開放血流15min后，中斷血流，迅速取下聚乙烯管，取出手術線并稱重，以總重量減去線重計算血栓濕重。2．2 紅花黃色素凍干粉針對大鼠體外血栓形成的影響

取50只Wistar大鼠，隨機分為5組，每組10只，0．3%戊巴比妥鈉30mg/kg腹腔麻醉大鼠，仰位固定于大鼠手術臺上，手術剝離頸總動脈及股靜脈。舌靜脈給藥，劑量同上，10min后頸總動脈插管取血1．8ml，注入標好刻度線的血栓硅膠管中，套緊血栓管裝入體外血栓形成儀，啟動轉盤，計時，轉動15min后，停機，取下血栓管，將管內血液及已形成的血栓迅速倒在預先鋪好濾紙的平皿中，用眼科鑷子輕輕由一端提出血栓，使血栓下垂，移放干燥濾紙上，用分規刻度尺測血栓長度，后提起血栓重新放在稱量好的濾紙上，稱其濕重后，置恒溫烤箱60℃烘烤30min，稱干重。

3 實驗結果

3．1 紅花黃色素凍干粉針對大鼠動靜脈旁路血栓形成的影響

復方丹參組及紅花黃色素凍粉針各劑量組與生理鹽水組組間比較用t檢驗，結果顯示，復方丹參組與紅花黃色素凍干粉針各劑量組均具有統計學差異(P＜0.01或P＜0．005)，說明紅花黃色素凍干粉針及復方丹參均具有明顯的抑制大鼠體內血栓形成的作用，且紅花黃色素凍干粉針中劑量組作用優于高、低劑量組及復方丹參組。結果見表1。

表1 紅花黃色素凍干粉針對大鼠血栓形成的影響(±s，n=10)

表1 紅花黃色素凍干粉針對大鼠血栓形成的影響(±s，n=10)

注:與生理鹽水組比較，＊＊P ＜0．01，＊＊＊P ＜0．005。

組別 劑量(mg/kg) 血栓濕重(mg)生理鹽水組 等體積62．89 ±20．41復方丹參組 1．8(ml) 33．59 ±13．30＊＊＊紅花黃色素凍干粉針低劑量組 7．2 35．85 ±16．52＊＊紅花黃色素凍干粉針中劑量組 14．4 30．30 ±13．18＊＊＊紅花黃色素凍干粉針高劑量組 28．8 35．94 ±14．78＊＊

3．2 紅花黃色素凍粉針對大鼠體外血栓形成的影響

紅花黃色素凍干粉針各劑量組及復方丹參注射液組與生理鹽水組組間比較用t檢驗，結果顯示，紅花黃色素凍干粉針各組及復方丹參組血栓長度均有統計學差異(P＜0．05或P＜0．005);紅花黃色素凍干粉針各組及復方丹參組血栓濕重均有顯著性差異(P＜0．05或P＜0．01或P＜0．005);紅花黃色素凍干粉針各組能減少血栓干重形成，但無統計學差異，而復方丹參組有顯著統計學差異(P＜0．01);結果顯示，紅花黃色素凍干粉針及復方丹參注射液均有抑制血栓形成的作用，其中紅花黃色素凍干粉針中劑量組優于低、高劑量組，與復方丹參組作用相當。結果見表2。

表2 紅花黃色素對大鼠體外血栓形成的影響(±s，n=10)

表2 紅花黃色素對大鼠體外血栓形成的影響(±s，n=10)

注:與生理鹽水組比較，*P ＜0．05，＊＊P ＜0．01，＊＊＊P ＜0．005

組別 劑量(mg/kg) 血栓長度(mm) 血栓濕重(mg) 血栓干重(mg)生理鹽水組 等體積103．0 ±51．9 578．7 ±363．0 64．33 ±36．0復方丹參組 1．8(ml) 24．0±30．4＊＊＊ 105．2±103．5＊＊＊ 21．12±14．5＊＊凍干粉針低劑量組 7．2 53．0 ±26．9* 267．6 ±155．1* 49．72 ±31．7凍干粉針中劑量組 14．4 29．7±25．3＊＊＊ 152．9±127．2＊＊ 35．83±31．9凍干粉針高劑量組 28．8 47．6 ±52．7* 215．7 ±220．7*41．23 ±41．1

通過大鼠動靜脈旁路血栓形成和體外血栓形成實驗，觀察紅花黃色素凍干粉針的抗血栓作用，證實紅花黃色素凍干粉針具有明顯的抑制大鼠體內與體外血栓形成作用，其中在體內血栓形成試驗中，紅花黃色素凍干粉針組藥效優于復方丹參組。在體外血栓形成試驗中，紅花黃色素凍干粉針對血栓濕重、干重影響與復方丹參組作用相當。說明紅花黃色素凍干粉針具有較好的活血化瘀作用，具有較好的臨床應用前景。

［1］孫建國，滕梅，張文忠，等．紅花黃色素對兔缺血再灌注心肌的保護作用［J］．山東醫藥，2012，52(1):42 －43．

［2］林楚生，方懿珊，林昱，等．紅花黃色素對腦梗死患者凝血機制的影響［J］．基層醫學論壇，2010，14(16):502 －503．

［3］黃正良，崔祝梅，任遠，等．紅花黃色素的抗凝血作用研究［J］．中草藥，1987，18(4):22 －25．

［4］陳文梅，金鳴，吳偉，等．食品紅花黃色素抗血小板激活因子作用的研究［J］．心肺血管病雜志，2001，20(4):201 －201，240 －240．

［5］楊志福，文愛東，賈敏，等．紅花黃色素對急性血瘀大鼠微循環及血液流變學部分指標的影響［J］．中藥材，2001，24(4):283 －284．

［6］萬先惠，秦亞利，顏濤．紅花注射液藥理作用研究進展［J］．中醫藥學報，2011，39(6):109 －110．