任 橋 李 麗 鄒本革 劉煥奇 張啟迪 徐 麗 畢可東*
(1.青島農業大學動物科技學院,青島 266109;2.青島農業大學海都學院,萊陽 265200;3.山東省萊陽沐浴店畜牧獸醫工作站,萊陽 265200)
假單胞菌病又稱貂銅綠假單胞菌病或貂出血性肺炎,是由假單胞菌屬中的銅綠假單胞菌引起的一種急性傳染病[1]。2011年10月11日江蘇某貂場出現發病癥狀。該廠共飼喂水貂900只,至請獸醫診斷時已經死亡60多只,其中母貂死亡占死亡總數70%~80%,飼喂自家配制飼料,發病期間,未就診。畜主憑經驗曾飼喂多種藥物,均未見效。經臨床癥狀、病理解剖及實驗室檢查,該病癥被確診為由銅綠假單胞桿菌引起的出血性肺炎。
病程約1~2 d;發病期間出現咳喘現象,尿液稍黃;多數死前口鼻流血,倒地,呼吸急促,呈腹式呼吸;散發,其他癥狀均不明顯。
整個肺區淤血、出血,切面流出大量血樣液體,肺門淋巴結腫大;肝臟稍發黃,邊緣稍薄;脾臟腫脹,整個呈暗紅色,內部均勻散在大量灰白色壞死點;腎臟被膜易剝落,皮質髓質均呈暗紅色,稍腫;腸系膜淋巴結腫脹,出血。
取新鮮病死貂的心血、肝臟、肺臟、脾臟直接進行涂片,進行革蘭氏染色,顯微鏡下觀察,見有革蘭氏陰性桿菌,單在、成雙或成短鏈。
取眼屎和氣管分泌物稍許加入測試液中,混勻后滴入CDV檢測卡,數分鐘后觀察結果為陰性,排除犬瘟熱病的可能性。
3.3.1 細菌分離培養 無菌采取病死貂肺臟、肝臟、脾臟和腎臟接種于普通瓊脂平板,37℃培養24 h,可見表面光滑、濕潤、微隆起、圓形中等大小的綠色菌落,挑取菌落接種于普通培養基進行純培養,得到綠膿桿菌的純培養物。將其純培養物分別接種于血瓊脂培養基和假單胞菌瓊脂B培養基上,37℃培養24 h,可見在血瓊脂上呈灰褐色菌落,菌落周圍出現溶血環;假單胞菌瓊脂B培養基上呈綠色,可見該菌能產生溶于水的綠色色素。將菌落涂片鏡檢,發現革蘭氏陰性中等大小桿菌。
3.3.2 生化試驗 該細菌能發酵葡萄糖、甘露醇、果糖、核糖,不能利用半乳糖、蔗糖、麥芽糖、肌醇、山梨醇,分解尿素,能形成硫化氫,氧化酶陽性,靛基質試驗、M.R.及V-P試驗均為陰性。根據以上試驗,鑒定細菌為銅綠假單胞桿菌。
3.3.3 動物試驗 選用6只健康小鼠作動物試驗,每組3只,一組用分離的細菌24h肉湯培養物腹腔注射,另一組注射滅菌生理鹽水作為對照組,每只0.1ml。結果顯示,注射后對照組全部正常,接種細菌培養物的于24h內全部死亡,剖檢后用肺臟和肝臟涂片、鏡檢,結果檢出大量革蘭氏陰性桿菌,經鑒定為銅綠假單胞桿菌。
分別選擇阿米卡星、恩諾沙星、復方新諾明、丁胺卡那、先鋒霉素、氨芐青霉素G、氟苯尼考、氟哌酸、強力霉素、四環素、環丙沙星、新霉素、菌必治、多粘菌素B等15種藥物進行藥敏實驗,其中環丙沙星、新霉素、多粘菌素B高敏,慶大霉素、恩諾沙星中敏,其他藥物均無明顯抑菌環。
綜合臨床癥狀,病理變化,實驗室診斷,診斷該病為由綠膿桿菌引起的水貂出血性肺炎。
立即對病貂和有癥狀的貂進行隔離;對籠舍、地面、糞便及時進行消毒,飼槽和飲水槽徹底進行清洗消毒,2次/d;對病死貂進行深埋;使用新鮮飼料,加強飼養管理,提高貂的抗病力。
根據藥敏試驗結果,在飼料中按臨床常規用量添加恩諾沙星、多粘菌素B或新霉素,2次/d,連用5~7 d。配合用葡萄糖、維生素C、維生素B進行輔助治療。
貂銅綠假單胞菌病或貂出血性肺炎臨床上以呼吸困難、出血性肺炎和肺水腫、腦膜炎、敗血癥為特征。銅綠假單胞桿菌廣泛存在于土壤、水和空氣中,在正常人與動物腸道和皮膚上亦有存在,也易從外傷、燒傷及尿道感染等發現。因具有多種致病因子而且有強侵襲力,因此,本菌并非潛在致病菌而是完全致病菌[2]。
水貂銅綠假單胞桿菌病傳染性強,可通過多種途徑進行傳播。為防止該病流行,應對患病或帶菌水貂進行嚴格隔離,并對被污染的籠子、地面和用具,進行徹底反復消毒。此次水貂發病可能是因為天氣變化多端,早晚溫差變化大,加之飼喂被綠膿桿菌污染的飼料導致水貂的抵抗力下降,為該病的發生創造了有利條件。發病后畜主擅自使用多種藥物治療,使之綠膿桿菌對多種藥物已產生耐藥性,加大了治療難度。因此,在這期間,加強飼養管理,注意環境的消毒,更換新鮮飼料,可以有效預防該病發生。為了減少藥物浪費和經濟損失,發病后應立即到相關部門進行診斷,通過藥敏試驗確定敏感藥物進行治療,才能收到顯著的防治效果。
[1]劉德福,趙燕,劉超.水貂爆發出血性肺炎的診治報道[J].2003,22(4):47-48
[2]曲海娜,鄒玲,劉文華,等.毛皮動物細菌病流行病學調查及耐藥分析[J],中國動物檢疫,2009(2):48-50