畜牧獸醫科技文摘

畜牧獸醫科技文摘

中藥四黃提取物對AA肉仔雞法氏囊組織結構的影響/金光明(安徽科技學院動物科學學院，安徽鳳陽233100 ) ，韓玉娟， 丁常宏//安徽科學學院學報.-2012，(1).-5～8

試驗研究了四黃提取物對AA肉雞法氏囊組織結構的影響。選用1日齡健康的AA肉仔雞200只，隨機分為實驗組和對照組，每組100只，分四個重復組。四黃提取物按200 mg/kg添加基礎日糧中。試驗期為42天。在42日齡時，從每個重復組中隨機抽取10只雞，頸靜脈放血處死，采集各組雞法氏囊的組織樣本，置于Bouin固定液中，應用石蠟組織切片技術制作組織切片，OlympusCH-30顯微攝影系統觀察拍照。試驗結果表明添加四黃提取物的試驗組雞的法氏囊較對照組雞退化延緩，其中試驗組雞的法氏囊較對照組皺襞發達，法氏囊淋巴小結排列緊密。結果表明，四黃提取物可以延緩AA肉仔雞法氏囊的退化。

豬繁殖與呼吸障礙綜合征疫苗的應用現狀及研究進展/王小三(河南科技大學動物科技學院，河南洛陽471003)，張春杰，趙星燦//河南農業科學.-2012(3).-12～15

簡要介紹了豬繁殖與呼吸障礙綜合征（PRRS）的病原特點，綜述了PRRS常規疫苗的特性與應用現狀、新型疫苗及其研究進展，并對其發展前景作了展望。

豬細小病毒HNZM01株NS1基因的克隆及序列分析/郭東輝，(河南農業大學牧醫工程學院，河南鄭州450002)王超群，王建輝…//河南農業科學.-2012，(3).-137～141

為加強豬細小病毒病的監控，對分離的豬細小病毒（PPV）HNZM-01株NS1基因的序列進行了分析。設計一對特異性引物，以抽提的PPV HNZM-01株的DNA為模板，通過PCR反應擴增出大小約2.27kb的目的片段，并將其插入克隆載體pGEM-T Easy上，構建了重組質粒并測序。結果表明，NS1基因全長1 989bp，與預期目的片段大小一致。序列分析結果表明，PPV HNZM-01株的NS1基因與其他PPV毒株同源性在98.2%～99.8%，說明NS1基因具有高度保守性。同時應用ANTHEPROT軟件分析了HNZM-01株NS1基因編碼蛋白質的氨基酸組成和二級結構的含量、分布。結果表明，由于HNZM-01株中堿基的突變，造成其氨基酸序列與NADL-2株有所不同，形成的二級結構略有差異，但二級結構元件分布大致與NADL-2株相同。

霍亂弧菌中弧菌素合成酶VibF的A結構域基因的克隆、表達與純化研究/劉秀華（河北大學生命科學學院，河北保定071002），王執，徐素娟//河南農業科學.-2012，(3).-149～153

弧菌素合成酶的A結構域在弧菌素的合成過程中發揮著重要作用。使用DNAStar軟件對A結構域的蛋白質二級結構進行預測，截取了多組不同氨基酸長度的A結構域片段。使用PCR方法從霍亂弧菌N16961的基因組中克隆了A結構域基因，通過酶切、連接等方法將其構建到表達載體pET-21b（＋）上，并在大腸桿菌BL21（DE3）中得到高效表達。在30個不同氨基酸長度的A結構域蛋白片段中獲得5個可溶性表達的片段；并且通過三步分離純化的方法獲得了一性狀良好、均一和高純度的A結構域蛋白（N861-1410），從而為A結構域蛋白質晶體生長提供了基礎。

牛雙芽巴貝斯蟲rap-1基因的克隆與序列分析/韓琳（甘肅農業大學動物醫學院，蘭州730070），張繼瑜，袁莉剛…//湖北農業科學.-2012，(6).-1251～1253

對牛雙芽巴貝斯蟲（Babesia bigemina）潛在藥物靶標Rap-1的基因進行克隆與序列分析。以蘭州株牛雙芽巴貝斯蟲基因組為模板．經PCR擴增獲得了rap-1基因．將該基因克隆到pGEM-T Easy Vector上，對重組質粒進行PCR擴增，對目的基因進行酶切鑒定及序列測定分析。結果表明，rap-1基因長度為846bp．同源性分析結果顯示．克隆序列與GenBank收錄的巴西株牛雙芽巴貝斯蟲的核苷酸序列同源性為99．74%，說明蘭州株牛雙芽巴貝斯蟲的rap-1與GenBank公布的參考基因具有高度同源性，rap-1基因具有很高的保守性。

16株豬2型圓環病毒全基因組克隆及序列分析/莫敏（石河子大學動物科技學院，石河子832003），王靜梅，李劼…//石河子大學學報：自然科學版.-2012，(1).-37～42

采用豬2型圓環病毒（PCV2）型特異性引物，通過PCR方法直接從疑似PMWS病豬肺、淋巴結病料中擴增出16株PCV2的全基因組序列，將擴增產物回收連接到pMD19-T，轉化到DH5α后進行克隆測序。結果顯示：16株PCV2中，有12株基因組全長為1767bp，1株全長為1766bp，3株PCV2的基因組全長為1778bp。同源性分析結果表明，16株PCV2之間的核苷酸同源性為95.7%～100%，與GenBank已發表的9株PCV2分離株基因組同源性為94.3%～99.9%，與2株PCV1分離株基因組的同源性為76.6%～77.3%；遺傳進化樹顯示16株PCV2主要分為2種基因型，其中134-ZF1、134-ZF2、134-ZF3、141-ZF1、141-ZF2、141-ZF3、142-TL1、142-TL2、142-TL3、142-TL4、142-TL5和148-ZF3這12株與AF055394（法國株）同屬于PCV2b亞型，親緣關系較近；133-ZF1、143-2-15、148-ZF1和WJQ001與AY181946（中國株）同屬于PCV2d亞型，組成一個分支。所得的16株PCV2的ORF2核苷酸及其所推導的氨基酸序列與參考株同源性分別為90.2%～99.9%和92.1%～100.0%，存在較大的變異。

致奶牛惡性水腫腐敗梭菌的分離鑒定/張小燕（石河子大學動物科技學院，石河子832003）， 王靜梅，孫延明李 …//石河子大學學報：自然科學版.-2012，(1).-47～50

為確診某規模化奶牛場奶牛爆發惡性水腫死亡病例，采取病變組織觸片染色，分離培養，分離菌形態觀察，生化鑒定、實驗動物接種、16SrRNA同源性序列分析鑒定。結果顯示：病死牛肝觸片染色菌體形態、分離株培養及菌體形態、生化反應均符合腐敗梭菌特征；分離株PCR產物測序后與GenBank已發表的參考基因相應片段同源性比較，同源性為95.43%；分離株培養物經肌肉與腹腔分別接種豚鼠及小鼠后均引起死亡，肝觸片染色鏡檢，其菌體形態與奶牛病例相同。結果表明，該奶牛場奶牛死亡系由腐敗梭菌感染引起的惡性水腫所致。

傳染性法氏囊病病毒NN1107廣西株的分離鑒定及遺傳進化分析/李軍（廣西獸醫研究所，廣西南寧530001），陶立，蘭美益…//動物醫學進展.-2012，(4).-63～67

為研究從廣西南寧市某雞場疑似患傳染性法氏囊病的雞群中分離鑒定出的一株傳染性法氏囊病病毒NN1107株的分子特征，通過反轉錄-聚合酶鏈反應特異擴增后進行克隆、序列分析。NN1107株VP2基因高變區（vVP2）的克隆測序和序列比較結果顯示，序列符合超強毒傳染性法氏囊病病毒（vvIBDV）的分子特征；其與廣西vvIBDV毒株的核苷酸同源性在96%～99.6%之間。根據vVP2核苷酸序列同源性繪制的遺傳進化樹結果顯示，NN1107株屬于vvIBDV毒株群，與2004年、2005年、2007年和2010年流行毒株BH09、NNTZ（3）、NN07122、HP1001的親緣關系最近，與疫苗株B87（in）、Bursine-2、FW2512株的親緣關系較遠。

口蹄疫合成肽疫苗研究進展/李婷婷（東北農業大學動物醫學學院，黑龍江哈爾濱150030），王君偉//動物醫學進展.-2012，(4).-76～79

口蹄疫（FMD）是一種嚴重威脅世界畜牧業發展和國際進出口貿易的重大傳染病。盡管FMD傳統疫苗在免疫效力上具有一定優勢，但其自身仍存在諸多弊端及隱患。隨著分子生物學技術的飛速發展，及其在獸醫領域不斷取得的創新性應用，FMD合成肽疫苗作為新型基因工程疫苗的一種，以其具有更為廣譜的特異性、更加安全穩定、經濟實用等特點，現已成為FMD研究領域的主要熱點及方向。論文從抗原位點的選擇、空間構象的研究、疫苗載體的探索以及免疫佐劑的優化等多方面對FMD合成肽疫苗的發展過程及其研究進展進行了深入探討，旨在為FMD合成肽疫苗的進一步發展以及其他病原微生物合成肽疫苗的深入研究提供借鑒。

抵抗素樣Relmβ分子研究進展/王靜（華南農業大學動物科學學院，廣東廣州510642），劉義志，謝青梅//動物醫學進展.2012(4).-79～84

Relmβ亦稱發現于炎癥帶2（found in inflammatory zone2，FIZZ2），是一種富含半胱氨酸的分泌蛋白。目前的研究表明，Relmβ在許多方面發揮著非常重要的作用，包括胰島素抵抗，抵制腸腔寄生線蟲的感染，預測胃腸道腫瘤的發生，促進小鼠結腸炎和回腸炎模型中的炎癥反應，誘導肺部纖維化、缺氧肺血管的重建，促進氣道重塑等。通過對Relmβ分子的結構、表達分布、生物學功能的研究進展進行歸納，為Relmβ分子在生物學和醫學方面更深入的研究提供參考。

新城疫病毒結構蛋白功能及檢測技術研究進展/鄒海濤（南京農業大學動物醫學院，江蘇南京210095），蘭鄒然，姜平//動物醫學進展.-2012，(4).-85～89

新城疫是一種由新城疫病毒引起的烈性傳染病，病死率很高，嚴重危害家禽養殖業，被世界動物衛生組織列為必須報告的動物傳染病。在我國，新城疫的暴發和流行雖然已得到了控制，但病毒的變異給新城疫的防控工作帶來了困難。新城疫病毒的隱性感染也對我國禽類產品的質量及出口造成了一定影響。因此，明確新城疫病毒各結構蛋白的功能、改進現有檢測技術以及開發新的檢測技術平臺是目前新城疫防控工作的重點。論文對新城疫病毒結構蛋白功能及檢測技術的進展進行了系統的闡述。

三種豬繁殖與呼吸綜合征疫苗免疫效果評價/王建（上海市動物疫病預防控制中心，上海201103），齊新永，李凱航…//動物醫學進展.-2012，(4).-107～113

為研究不同豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）疫苗的的免疫特性，分別采用PRRSV變異株（JXA1-R）弱毒疫苗、經典PRRSV（VR 2332）弱毒疫苗、變異株（JXA1）滅活疫苗，免疫接種PRRSV抗原和抗體陰性的健康斷奶仔豬，免疫接種后70d用PRRSV變異株強毒攻毒，ELISA檢測血清中PRRSV特異的抗體水平及IFN-γ、IL 2、IL 4、IL 8、IL 10的水平，并進行臨床癥狀和肺部病理組織學觀察和評分。結果表明，VR 2332、JXA1-R弱毒疫苗對免疫豬攻毒保護效果差異不顯著，均為63.6%（7/11），JXA1滅活疫苗免疫攻毒保護效果較差，為36.4%（4/11）。試驗還發現病毒感染豬血清中細胞因子IFN-γ和IL-10的比值可以作為評價疫苗免疫效果的一個指標。

不同腸球菌基因組DNA提取方法對PCR鑒定的影響/張祥（河南農業大學牧醫工程學院，河南鄭州450002），李曉博，谷素美…//河南農業大學學報.-2012，(1).-67～71

為研究腸球菌基因組DNA的不同提取方法對16SrRNA基因序列PCR、種屬多重PCR、RAPDPCR等腸球菌鑒定結果的影響，分別采用6種基因組DNA提取方法（水煮法1、水煮法2、常規酚／氯仿抽提法、chelex-100法1、chelex-100法2和試劑盒法），對l株腸球菌標準菌株ATCC29212基因組DNA進行提取，以這些分別提取的DNA為模板在相同的擴增條件下進行PCR檢測．結果表明，在16SrRNA基因序列PCR和種屬多重PCR檢測中以水煮法1進行腸球菌DNA的提取最適宜，而試劑盒法在RAPDPCR檢測中效果最佳，

犬瘟熱病毒N蛋白基因真核表達質粒的構建與瞬時表達/簡子健（新疆農業大學動物醫學學院，烏魯木齊830052），馬素貞，申衛紅…//新疆農業科學.2012(3).-560～564

【目的】構建犬細小病毒（CPV）VP2基因真核表達質粒，為研究核酸疫苗奠定基礎。【方法】參考GenBank中發表的CDV N蛋白基因序列設計引物， 采用RT-PCR方法從疑似犬瘟熱病犬全血樣品中擴增CDV N蛋白基因，將其克隆至真核表達載體pcDNA3.1（＋）。經測序驗證后，小白鼠尾靜脈注射瞬時表達CDV N蛋白基因，8 h取其肝臟提取總RNA，進行RT－PCR方法擴增。【結果】在病犬的全血樣品中擴增得到1 572 bp的CDV N蛋白基因片段，并構建了真核表達質粒pcDNA3.1（＋）-CDV N，從瞬時表達的小白鼠肝臟總RNA中可擴增到目的條帶。【結論】構建了犬瘟熱病毒N蛋白基因真核表達質粒，并在小白鼠體內進行了瞬時表達。

脂多糖、苯酚、硫酸銅對紅笛鯛非特異性細胞毒性細胞受體基因表達的影響/周晴（廣東海洋大學水產學院廣東省水產經濟動物病原生物學及流行病學重點實驗室暨廣東省高等學校水產經濟動物病害控制重點實驗室，廣東湛江524025），簡紀常，魯義善…//廣東海洋大學學報.-2012(1).-1～10

應用Real-time PCR技術，研究脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）、苯酚、硫酸銅刺激紅笛鯛（Lutjanussanguineus）后非特異性細胞毒性細胞受體（NCCRP-1）基因在不同組織里的表達差異。結果發現，LPS刺激紅笛鯛24 h后NCCRP-1在紅笛鯛頭腎、脾臟、胸腺、肝臟、心臟、腦、肌肉和腸組織中均有表達，其中頭腎表達量最高，脾臟次之，然后依次是肝臟、腦、肌肉、胸腺和腸，心臟表達量最少。LPS、苯酚和CuSO4刺激紅笛鯛后，隨著刺激時間的增長，NCCRP-1表達量在各組織達到峰值的時間不同。以頭腎為模式組織，RTPCR的結果顯示，紅笛鯛NCCRP-1在LPS、苯酚和CuSO4的刺激下的表達模式相似，隨著時間的增加NCCRP-1表達量逐漸增加，分別在24、9、12 h處達到最高，達到對照組的52、30、24倍左右，之后表達量開始下降。免疫組織化學表明，NCCRP-1只在頭腎、脾臟和胸腺的特定細胞中表達。