吳開進,陳國添
廣西壯族自治區玉林市紅十字會醫院,玉林 537000
正當臨床對白假絲酵母感染越來越重視并深入研究其耐藥性時,非白假絲酵母引起的感染逐年增加,且對常用抗真菌藥物不敏感。為了解熱帶假絲酵母感染的分布與藥敏狀況,本文對我院2010年1月~2011年12月住院部送檢標本分離出的110株熱帶假絲酵母感染分布情況和體外藥敏試驗進行回顧性分析。
1.1.1菌株來源110株熱帶假絲酵母均分離自我院臨床送檢的痰液、支氣管肺泡灌洗液、血液、尿液、膿及傷口拭子等標本。
1.1.2儀器試劑ATB Expression 細菌分析儀及ID 32 C 鑒定板購自法國生物梅里埃公司;真菌顯色培養基、血平板、BIO-KONT酵母樣真菌(FUNGUS)快速顯色藥敏試劑盒、質控菌株白假絲酵母ATCC90029和光滑假絲酵母KTCC0001 購自溫州市康泰生物科技有限公司。
痰液、支氣管肺泡灌洗液標本接種于血平板及真菌顯色培養基,血培養瓶陽性報警轉血平板,其他標本接種于血平板,35 ℃培養24~48 h。在真菌顯色平板選擇呈藍色菌落或血平板涂片確認為酵母后,將受試菌轉種于真菌顯色平板,35 ℃孵育過夜,以保證其純度和活性[1],用ID 32 C對鑒定板菌種進一步確認,采用KONT真菌顯色最低抑菌濃度(minimum inhibitory concentration, MIC)法[2]進行體外藥敏試驗,藥物包括兩性霉素B、制霉菌素、氟胞嘧啶、氟康唑、酮康唑、咪康唑、伏力康唑、依曲康唑、克霉唑、益康唑、特比奈芬11種。嚴格按照試劑盒的要求進行操作,批試劑以ATCC90029和KTCC0001進行質量控制。
應用WHONET5.4軟件進行統計與分析。
共培養細菌標本18 423份,分離出病原體3 920株(重復標本培養出相同病原體時計1次),檢出假絲酵母767株,占19.57%。其中熱帶假絲酵母110株,占假絲酵母的14.34%,僅次于白假絲酵母(582株,占75.88%)。
標本包括痰液、支氣管肺泡灌洗液、尿液、血液、傷口拭子及足分泌物等。檢出菌構成比最高為痰標本(56.36%),其次為尿液(12.72%),結果見表1。

表1 110株熱帶假絲酵母在標本中的分布及構成比Tab.1 Distribution of 110 Candida tropicalis strains and constituent ratio
呼吸道感染63株,占57.27%;泌尿道感染14株,占12.73%;插管創傷口感染8株,占7.27%;糖尿病足感染7株,占6.36%;顱外傷、皮膚傷口感染7株,占6.36%;其他疾病感染11株,占10.00%。
11種抗真菌藥物中,敏感率>90.00%的有氟胞嘧啶、兩性霉素B、克霉唑和制霉菌素(表2)。

表2 熱帶假絲酵母體外藥敏試驗Tab.2 Susceptibility of 110 Candida tropicalis strains to 11 antifungal drugs (%)
熱帶假絲酵母是引起人體感染的條件致病菌之一。CHIF-NET 2009~2010年全國多家中心醫院酵母菌流行病研究表明,非上呼吸道標本中熱帶假絲酵母檢出率約占酵母的15%,本文為14.34%,與國內近年報道的14.8%~15.9%[3,4]一致,僅次于白假絲酵母。因此,在臨床關注白假絲酵母感染的同時,也要重視非白假絲酵母引起感染的變化趨勢[5]。
深部真菌感染與多種基礎疾病和因素有關[6]。本研究顯示,熱帶假絲酵母分布以呼吸道和尿液為主,與文獻報道[7,8]一致,說明其是引起呼吸道和泌尿道感染的重要致病酵母。來自插管創傷口感染的病例符合醫源性感染診斷,說明熱帶假絲酵母也是致醫源性感染的重要病原體[9]。熱帶假絲酵母在顱腦外傷部位和糖尿病患者足部可引起繼發性感染,增加治療困難,甚至可成為酵母感染死亡原因之一[10]。因此,加強熱帶假絲酵母在不同疾病感染中的監測對正確抗感染治療有積極意義。
從表2可見,兩性霉素B、制霉菌素、氟胞嘧啶對熱帶假絲酵母具有良好的抗菌活性,敏感率>90.00%,與李匯明等[4]報道一致。兩性霉素B抗菌譜廣,但不良反應較大,臨床用藥少可能是熱帶假絲酵母對該藥保持良好敏感性的原因。由于氟康唑對人體毒性小、易吸收等特點,臨床將其作為深部真菌感染治療的首選藥物,但近年來耐氟康唑菌株逐漸增多[11]。朱德妹等[12]研究表明,非白假絲酵母對氟康唑和伏立康唑的耐藥率有不同程度上升。本研究顯示,熱帶假絲酵母對唑類藥物中氟康唑、伊曲康唑和伏立康唑的耐藥率分別為26.36%、31.82%和26.36%,前兩者與天津地區[13]的報道一致,但均高于南京地區[4]的研究結果,可能是不同地區的菌株耐藥性存在差異。本研究中熱帶假絲酵母對特比奈芬的耐藥率為87.37%,與鐘曉艷等[14]報道不一致。特比奈芬用于治療皮膚淺部真菌病,是否適用于深部真菌感染的治療,《美國傳染病協會念珠菌病診療指南》[15]沒有提及,但熱帶假絲酵母對其較高的耐藥率在選擇抗真菌藥物治療時要考慮。因此,研究熱帶假絲酵母在不同區域的差異并監測其耐藥趨勢,對指導臨床選擇有效抗真菌藥物來及時控制感染和延緩真菌的耐藥具有重要意義。
總之,熱帶假絲酵母是引起多種疾病繼發性感染的重要真菌,也是醫源性感染的病原體,臨床應高度重視。在非白假絲酵母感染不斷上升之時,正確鑒定菌種及開展體外藥敏試驗目的在于指導臨床合理用藥,減少經驗性用藥所導致的非白假絲酵母耐藥率升高。
[1] 劉偉,李若瑜.抗真菌藥物敏感性試驗及其意義[J].中華檢驗醫學雜志,2009,32(2):233-235.
[2] 馮莉,王建海.KONT真菌顯色MIC藥敏與ROSCO藥敏紙片的對比研究[J].實用醫技雜志,2006,13(22):4102-4103.
[3] 李耀軍,陸華.臨床標本的真菌培養及藥敏分析[J].中華醫院感染學雜志,2011,21(6):1270-1271.
[4] 李匯明,梅亞寧.南京地區1 386株臨床分離酵母的鑒定及藥敏分析[J]. 微生物與感染,2010,5(4):214-217.
[5] Richter SS, Galask RP, Messer SA, Hollis RJ, Diekema DJ, Pfaller MA. Antifungal susceptibilities of Candida species causing vulvovaginitis and epidemiology of recurrent cases [J].J Clin Microbiol, 2005, 43(5):2155-2162.
[6] 朱硯萍,瞿介明.侵襲性念珠菌病診治現狀[J].臨床內科雜志,2009,26(4):227-230.
[7] 劉一婷. 熱帶假絲酵母菌感染與藥敏分析[J]. 中華實用中西醫雜志, 2007,20(23):2049-2050.
[8] 趙蓬波,曹亮弘,侯曉杰.老年泌尿系深部真菌感染的種類分布特點及耐藥性檢測[J].中國實驗診斷學,2009,13(10):1428-1429.
[9] 瞿良,李云,呂宇杰, 滕毅,夏正武.重視臨床真菌感染問題[J].國際檢驗醫學雜志,2010,31(3):292-293.
[10] Hinrikson HP, Hurst SF, Lott TJ, Warnock DW, Morrison CJ.Assessment of ribosomal large-subunit D1-D2, internal transcribed spacer 1, and internal transcribed spacer 2 regions as targets for molecular identification of medically important Aspergillus species [J].J Clin Microbiol, 2005, 43(5):2092-2103.
[11] 李雪芬,孔海深,楊青, 陳瑜,俞云松.六種抗真菌藥物對酵母菌體外抗菌活性研究 [J]. 中華檢驗醫學雜志,2009,32(4):426-428.
[12] 朱德妹,張嬰元,汪復. 中國5所醫院念珠菌屬對氟康唑和伏立康唑的耐藥性監測[J]. 中國感染與化療雜志,2007,7(1):14-18.
[13] 吳玉秀,王俊妨,劉冀琴,劉錦,韓海燕,靳穎. 1 394株真菌感染分離鑒定及藥敏試驗結果分析[J].中華醫院感染學雜志,2012,22(2):434-435.
[14] 鐘曉艷,陳慧玉,何加寧.1 182株念珠菌感染特性及耐藥性分析[J].國際檢驗醫學雜志,2009,30(8):816-817.
[15] 姚瑜.解讀美國傳染病協會2009年版念珠菌病診療指南[J].國外醫藥抗生素分冊,2010,31(2):75-84.