ICU病房產超廣譜β-內酰胺酶肺炎克雷伯菌的監測和耐藥性分析

孫國全，王倩，褚云卓，田素飛，丁麗萍，郭麗潔，李富順

(中國醫科大學附屬第一醫院檢驗科，遼寧沈陽110001)

近年來，由革蘭陰性菌感染引起的耐藥問題日益嚴重，而產超廣譜β-內酰胺酶(Extended spec-trumbeta-lactamases，ESBLs)是革蘭陰性菌耐藥的主要原因，該酶由質粒介導，具有水解廣譜頭孢菌素能力，對β-內酰胺類藥物耐藥［1］。肺炎克雷伯菌，尤其是產ESBLs肺炎克雷伯菌是重要的致病菌之一，可引起敗血癥、腦膜炎、化膿性感染等疾病。隨著三代頭孢菌素應用的增多，導致肺炎克雷伯菌產ESBLs率的上升，產ESBLs率的上升勢必會導致該菌對抗生素耐藥率的提高［2］。為了解產ESBLs肺炎克雷伯菌的耐藥特點，為臨床合理應用抗生素提供參考，本文對我院ICU病房2009年1月至2011年12月連續3 a分離的肺炎克雷伯菌進行ESBLs檢測和耐藥性分析，報告如下。

1 材料與方法

1.1 標本來源

收集中國醫科大學附屬第一醫院ICU病房2009年1月至2011年12月3 a間送檢的痰液、血液、分泌物等標本(每個患者只選第1株)，共分離肺炎克雷伯菌100株。

1.2 方法

1.2.1 細菌分離鑒定及藥敏試驗按照臨床微生物實驗室標準操作規程對標本進行接種、培養，采用自動化細菌鑒定儀(法國生物梅里埃公司Vitek-2和美國BD公司Phonenix 100)進行細菌鑒定和配套藥敏板進行藥物敏感性測定。結果判斷按照2009年CLSI標準進行，根據藥敏結果在儀器專家系統的判斷下測定產超廣譜β-內酰胺酶肺炎克雷伯菌。

1.2.2 質控菌株大腸埃希菌ATCC 25922和肺炎克雷伯菌ATCC 700603。

1.2.3 統計方法采用WHONET5.4軟件進行耐藥性分析。

2 結果與分析

2.1 肺炎克雷伯菌的分離及產ESBLs情況

2009年至2011年3 a間我院ICU病房共分離肺炎克雷伯菌100株，其中2009年分離36株，2010年分離31株，2011年分離33株，ESBLs陽性株3 a分別為13、16、19株，陽性率分別為36.1%、48.5%、61.3%，呈逐年上升趨勢，但3 a間無顯著性差異，見表1。

表1 肺炎克雷伯菌的分離及產ESBLs情況Table 1 The separation and ESBLs production rate of Klebsiella pneumoniae

2.2 產ESBLs肺炎克雷伯菌在不同標本中的分布情況

48株產ESBLs肺炎克雷伯菌主要來源于血(7株)、尿(15株)、痰(22株)、其他無菌體液(4株)。

2.3 產ESBLs株和非產ESBLs株對臨床常用抗菌藥物的耐藥率

產ESBLs株和非產ESBLs株對臨床常用抗菌藥物的耐藥率，見表2。

表2 2009年至2011年產ESBLs株和非產ESBLs株的耐藥率比較Table 2 The comparison of Susceptibility rates betweeen extended Spectrum β-Lactamases(ESBLs)Producing Klebsiella pneumoniae and non ESBLs producing strains from 2009 to 2011

3 討論

肺炎克雷伯菌是臨床分離及醫院感染的重要致病菌之一，且多耐藥性菌株的不斷增加常導致臨床抗菌藥物治療的失敗和病程遷延。肺炎克雷伯菌產超廣譜β-內酰胺酶(ESBLs)是對β-內酰胺類藥物產生耐藥性的主要原因，該酶是絲氨酸蛋白酶的衍生物，是細菌染色體外的蛋白質，它能水解抗菌藥物中的β-內酰胺環而使抗菌藥物失活，尤其是頭孢他啶、頭孢噻肟、氨曲南等廣譜頭孢菌素，該酶可通過質粒形式在細菌之間傳播［3］。

本研究顯示我院ICU病房在2009年至2011年3 a間，肺炎克雷伯菌產ESBLs率分別為36.1%、48.5%、61.3%，呈逐年上升趨勢，其中痰液標本檢出產ESBLs肺炎克雷伯菌最多，其次為尿液，可能與ICU住院患者病情較重，住院時間長，抗生素的廣泛應用，侵襲性操作如機械通氣、靜脈插管、留置導尿等增多有關，應引起臨床高度重視。

藥敏結果分析顯示，產ESBLs株的耐藥率普遍高于不產ESBLs株，產ESBLs株對氨芐西林、頭孢呋辛、頭孢唑啉等全部耐藥;對頭孢曲松、頭孢噻肟的耐藥率也大于80%;對氨基糖苷類的慶大霉素、四環素，對喹諾酮類的環丙沙星、左氧氟沙星以及磺胺類中的復方新諾明耐藥率較高(均大于55%)，可能與產ESBLs株質粒攜帶耐氨基糖苷類和喹諾酮類的耐藥基因具有多重耐藥性有關，存在著廣泛、多重耐藥現象［4］;產ESBLs株對阿米卡星、頭孢西丁、哌拉西林/他唑巴坦的耐藥率相對較低，可作為聯合治療的選擇;對亞胺培南、美羅培南全部敏感，與目前相關文獻報道碳青霉烯類抗生素對ESBLs最有效一致，提示碳青霉烯類抗菌藥亞胺培南和美洛培南對產ESBLs株肺炎克雷伯菌具有強大的抗菌活性，對重癥感染的患者建議首選此類藥物治療。

綜上，由于抗生素的濫用或不規范使用，導致產ESBLs菌逐漸增多，耐藥性也不斷提高，因此加強對細菌耐藥性的監測極其重要，定期向臨床提供細菌的分類情況和耐藥分析，對指導臨床合理使用抗生素，延緩細菌耐藥性的產生，控制醫院感染具有重要意義。

［1］ 羅艷萍，張秀菊，徐雅萍，等.產超廣譜β-內酰胺酶肺炎克雷伯菌和大腸埃希菌的分布及耐藥性研究［J］.中華醫院感染學雜志，2006，16(1):101-104.

［2］ 蔣利君，韋曉謀，梁陳方.革蘭陰性桿菌產ESBLs與第3代頭孢菌素用藥頻度分析［J］.中華醫院感染學雜志，2006，16(7):799-833.

［3］ National Committee for Clinical Laboratory Standards.Performance standards for antimicrobial disk susceptiblity tests［S］.6th ed.Approved standard M2-A6(M100-S7).Wayne:NCCLS，2003.

［4］ 張獻.臨床常見細菌的耐藥機制及臨床對策［J］.廣西中醫學院學報，2011，14(2):45-47.