氯普魯卡因誘導(dǎo)體外人宮頸癌細(xì)胞抑癌基因CDH1、APC和P16啟動(dòng)子去甲基化及基因表達(dá)

宋銀宏，何 苗，符策崗，龍春燕，汪 磊，王 想，吳林蓉

(三峽大學(xué)醫(yī)學(xué)院免疫學(xué)教研室，湖北宜昌443002)

氯普魯卡因誘導(dǎo)體外人宮頸癌細(xì)胞抑癌基因CDH1、APC和P16啟動(dòng)子去甲基化及基因表達(dá)

宋銀宏*，何 苗，符策崗，龍春燕，汪 磊，王 想，吳林蓉

(三峽大學(xué)醫(yī)學(xué)院免疫學(xué)教研室，湖北宜昌443002)

目的 觀察氯普魯卡因(CP)對(duì)人宮頸癌細(xì)胞HeLa和CaSki的抑癌基因CDH1、APC及P16啟動(dòng)子甲基化水平和基因表達(dá)的影響。方法 用不同終濃度的CP(0、1、1.5、2、3和4 mmol/L)處理癌細(xì)胞系HeLa和CaSki及正常人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞HUVEC，MTT法檢測(cè)細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率;用甲基化特異性PCR(MSP)和RT-PCR檢測(cè)1.5 mmol/L CP處理后各細(xì)胞CDH1、APC及P16啟動(dòng)子甲基化狀態(tài)及基因表達(dá)水平。結(jié)果 1.5 mmol/L CP作用96 h后，HeLa和CaSki抑制率分別為66.17% ±5.82%和69.12% ±6.89%，顯著高于HUVEC的21.78% ±3.12%，1.5 mmol/L CP處理宮頸癌細(xì)胞96 h后，CDH1、APC及P16基因啟動(dòng)子均有不同程度去甲基化，3種基因mRNA均增強(qiáng)或者恢復(fù)了表達(dá)。結(jié)論 CP可以抑制人宮頸癌細(xì)胞HeLa和CaSki增殖，誘導(dǎo)HeLa和CaSki的CDH1、APC及P16基因啟動(dòng)子去甲基化，并可增加或者恢復(fù)相應(yīng)基因的表達(dá)。

氯普魯卡因;宮頸癌;抑癌基因;DNA甲基化

普魯卡因(procaine)是沿用多年的局麻藥，研究發(fā)現(xiàn)普魯卡因有去甲基化效應(yīng)，并對(duì)肝癌［1］和肺癌細(xì)胞［2］等的生長(zhǎng)有抑制作用，但其會(huì)使患者產(chǎn)生過敏癥狀甚至導(dǎo)致死亡［3］，因此臨床使用受到一定局限。氯普魯卡因(chloroprocaine，CP)是其衍生物，可安全、廣泛地應(yīng)用于臨床麻醉［4］。與普魯卡因相比，很少發(fā)現(xiàn)過敏的臨床報(bào)道。

本實(shí)驗(yàn)用CP作用人宮頸癌細(xì)胞HeLa、CaSki及正常細(xì)胞系人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞HUVEC，以細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率及上皮型鈣黏蛋白基因(E-cadherin，又稱CDH1)、多瘤抑制基因1(multiple tumor suppressor 1，MTS1，又稱P16)及腺瘤性……