人羊膜上皮細胞在大鼠受損肝組織中分化為肝細胞

宮黎明，方 寧，陳代雄*，萬衛紅，章 濤，余麗梅，趙春華

(1.遵義醫學院附屬醫院貴州省細胞工程重點實驗室，貴州遵義563003;2.中國醫學科學院基礎醫學研究所組織工程中心，北京100005)

人羊膜上皮細胞在大鼠受損肝組織中分化為肝細胞

宮黎明1，方 寧1，陳代雄1*，萬衛紅1，章 濤1，余麗梅1，趙春華2

(1.遵義醫學院附屬醫院貴州省細胞工程重點實驗室，貴州遵義563003;2.中國醫學科學院基礎醫學研究所組織工程中心，北京100005)

目的 探討人羊膜上皮細胞在大鼠損傷肝原位植活及向肝細胞分化。方法 用胰蛋白酶消化法從羊膜組織中分離人羊膜上皮細胞(hAECs)，用流式細胞術和免疫熒光染色進行表型分析和細胞鑒定。腹腔注射D-氨基半乳糖溶液建立大鼠肝損傷模型，隨機分為hAECs移植組和對照組，每組20只。造模后24 h用微量注射器于肝左、中、右葉3點分別移植L-DMEM懸浮的hAECs懸液50 μL(約1×106個細胞)，對照組注射等量L-DMEM。于移植后48 h、1、2和4周處死各實驗組5只大鼠，取肝臟制備冰凍切片，用免疫熒光雙染色檢查hAECs在受損肝原位的植活、分布及其向肝細胞分化的標志物表達。結果 1)FCM分析和免疫熒光染色結果顯示，所分離的hAECs表達CD29、CD166及CK19，幾乎不表達CD44、CD80、CD86、HLA-DR及波形蛋白;2)免疫熒光雙染色結果顯示，hAECs移植后1周主要定植于肝小葉且表達AFP，至2周表達CK18，至4周表達Alb。結論 hAECs在大鼠受損肝組織中能被植活且可分化為肝細胞，提示hAECs移植在臨床肝病的治療方面可能具有潛在應用價值。

人羊膜上皮細胞;移植;分化;肝細胞;肝損傷

人羊膜上皮細胞 (human amnion epithelial cells，hAECs)在特定的體外誘導培養條件下，可分化成來自3個胚層的各種細胞，包括神經細胞、心肌細胞、成骨和軟骨細胞、胰島素分泌細胞等［1－5］。……