石 玥,梁曉春*,張 宏,王普艷,趙 麗
(中國醫學科學院北京協和醫學院1.北京協和醫院中醫科轉化醫學中心,北京100730;2.基礎醫學研究所細胞中心,北京100005)
筋脈通含藥血清降低高糖培養大鼠雪旺細胞活性氧水平及PARP-1蛋白表達
石 玥1,梁曉春1*,張 宏2,王普艷1,趙 麗1
(中國醫學科學院北京協和醫學院1.北京協和醫院中醫科轉化醫學中心,北京100730;2.基礎醫學研究所細胞中心,北京100005)
目的 研究筋脈通含藥血清對體外高糖培養雪旺細胞活性氧(ROS)水平及多聚(ADP-核糖)聚合酶-1(PARP-1)蛋白表達的影響。方法 30只雄性SD大鼠隨機分為3組,分別灌胃筋脈通(JMT)、維生素C(VC)或蒸餾水制備含藥血清和對照血清。取新出生大鼠的雙側坐骨神經用于制備雪旺細胞,分為高糖組、JMT組(加入筋脈通含藥血清)、VC組(加入維生素C含藥血清)及正常對照組。培養48 h后,采用激光掃描共聚焦顯微技術檢測細胞內二氯熒光黃(DCF)的熒光強度而測得細胞內ROS水平;采用免疫印跡法(Western blot)檢測細胞PARP-1(89 ku)的蛋白表達。結果 1)高糖組雪旺細胞ROS-DCF熒光值(86.59±8.14)顯著高于正常值(P<0.01);筋脈通含藥血清組(44.58±8.67)與維生素C含藥血清組(46.12±8.80)均顯著低于高糖組(P<0.01)。2)與正常組比較,高糖組雪旺細胞內PARP-1(89 ku)含量(0.712±0.012)明顯增加(P<0.01);與高糖組比較,筋脈通含藥血清組含量(0.307±0.025)明顯降低(P<0.01),且明顯優于維生素C組(0.594±0.017)(P<0.01)。結論 筋脈通含藥血清能顯著減少ROS生成,降低PARP-1的活性和酶解,減輕細胞DNA氧化損傷。
雪旺細胞;高糖;氧化應激損傷;PARP-1;筋脈通
糖尿病周圍神經病變(diabetic peripheral neuropathy,DPN)是糖尿病(diabetes mellitus,DM)最常見的慢性并發癥之一,文獻報道患病率達40% ~90%,是導致糖尿病患者足潰瘍或非創傷性截肢最常見的原因[1]。……