李敏娜,申 樂,黃宇光
(中國醫學科學院北京協和醫學院北京協和醫院麻醉科,北京100730)
慢性神經病理性疼痛對大鼠脊髓背角miRNA表達的影響
李敏娜,申 樂,黃宇光*
(中國醫學科學院北京協和醫學院北京協和醫院麻醉科,北京100730)
目的 篩選慢性神經病理性疼痛大鼠脊髓背角差異表達的miRNA,并預測其調控的靶基因。方法 建立大鼠坐骨神經慢性壓迫損傷CCI模型,在術后疼痛高峰期取腰膨大脊髓背角,用miRNA芯片篩選CCI大鼠差異表達的miRNAs,再用熒光實時定量RT-PCR驗證差異表達的miRNAs,并利用MIRANDA、TARGETSCAN、PICTAR 3個數據庫找出這些miRNA可能調控的靶基因。結果 CCI大鼠表達上調的有miR-99b,表達下調的有miR-674-3p、miR-879與miR-325-5p。RT-qPCR驗證結果與芯片基本相符。預測這些miRNA可能的靶基因約26個,這些基因功能廣泛。結論 慢性神經病理性疼痛可導致miRNA的表達發生變化,這些miRNA及其調控的靶基因為進一步研究奠定了基礎。
慢性疼痛;微小RNA;芯片;熒光實時定量PCR;脊髓背角
微小RNA(microRNA,miRNA)是一種內源性非編碼單鏈小分子RNA,約18~25個核苷酸,可通過堿基配對與mRNA分子相結合來直接降解mRNA或抑制其翻譯,從而在轉錄后水平使基因沉默[1-2]。miRNA參與早期發育、細胞增殖、細胞死亡和細胞分化等重要生命進程[3]。miRNA在神經系統的分化、發育、決定細胞命運方面有重要作用。miRNA可在突觸部位選擇性聚集或缺失,調節突觸局部的基因表達和蛋白合成,影響神經細胞的突觸可塑性[4]。有研究者發現炎性反應疼痛小鼠神經系統miRNA表達水平發生變化,推測在疼痛的發生機制中miRNA可能發揮了重要作用[5-6]。……