高效制備人誘導多能干細胞并誘導分化為心肌細胞

方月琴，郭娟寧，孫曉明，侯一平，顧 準

(1.江蘇健雄職業技術學院生物與化學工程系，江蘇蘇州215411;2.新加坡國家心臟中心研發部門，新加坡168752;3.新鄉醫學院法醫學系，河南新鄉453003;4.四川大學華西基礎醫學與法醫學院，四川成都610041)

高效制備人誘導多能干細胞并誘導分化為心肌細胞

方月琴1，2，郭娟寧3，孫曉明2，侯一平4，顧 準1*

(1.江蘇健雄職業技術學院生物與化學工程系，江蘇蘇州215411;2.新加坡國家心臟中心研發部門，新加坡168752;3.新鄉醫學院法醫學系，河南新鄉453003;4.四川大學華西基礎醫學與法醫學院，四川成都610041)

目的 提高人誘導性多能干細胞(hiPSC)轉化效率，縮短其產生周期，并避免引入異源基因。方法 利用GP2-293反轉錄病毒包裝系統對人包皮成纖維細胞(HFFs)進行轉化，引入小分子物質，并對類胚胎干細胞(ESC)克隆進行獨立培養，檢測標記蛋白，定向誘導分化能力和核型分析。結果 HFFs經轉化后，20 d出現形態與ESC克隆相似的hiPSC，比經典法縮短了10 d，效率提高約12倍。它們與ESC同樣表達標記蛋白;體外成功定向分化為心肌細胞。核型分析表明該hiPSC染色體核型正常。結論 建立穩定的轉化效率高、周期短的hiPSC生成體系，并成功誘導分化成心肌細胞，為心血管疾病的模型構建和臨床研究提供實驗基礎。

誘導性多能干細胞;轉化效率;形成周期;心肌細胞;分化

誘導性多能干細胞(induced pluripotent stem cells，iPSC)是體細胞經過轉化因子重編程得到的、與胚胎干細胞(embryonic stem cells，ESC)具有相似的形態、功能特性的多能干細胞［1－2］，是疾病模型研究的良好載體，并為臨床進行自體干細胞移植提供選擇［3］。……