張 波,孫善全,甘勝偉,鐘小燕,伍修宇,徐 進(jìn),黃 娟
(重慶醫(yī)科大學(xué)神經(jīng)科學(xué)研究中心,重慶400016)
大鼠腦出血后V1αR和AQP4表達(dá)升高與腦水腫的形成相關(guān)
張 波,孫善全*,甘勝偉,鐘小燕,伍修宇,徐 進(jìn),黃 娟
(重慶醫(yī)科大學(xué)神經(jīng)科學(xué)研究中心,重慶400016)
目的 研究精氨酸加壓素1α受體(V1αR)和水通道蛋白4(AQP4)在SD大鼠腦出血(ICH)腦組織中的表達(dá)變化及兩者在腦水腫形成中的作用。方法 將自體血注入大鼠尾狀核建立腦出血模型,分別于術(shù)后6、12、24和48 h運(yùn)用干濕重法、免疫熒光和Western blot檢測(cè)腦含水量(BWC)、V1αR和AQP4蛋白的表達(dá)。結(jié)果 腦出血后6 h,V1αR和AQP4的表達(dá)開始增加,至48 h達(dá)到高峰,分別為21.88±0.44和23.16±0.67,顯著高于假手術(shù)組(14.32±0.55和13.90±0.40),與腦含水量呈正相關(guān)(P<0.05)。結(jié)論 V1αR介導(dǎo)的AQP4表達(dá)升高是腦出血后腦水腫形成的主要原因。
精氨酸加壓素;V1α受體;水通道蛋白4;腦水腫
精氨酸加壓素 (arginine-vasopressin,AVP)是一種可以維持水及電解質(zhì)平衡的神經(jīng)內(nèi)分泌肽,主要由視上核和室旁核分泌[1]。研究發(fā)現(xiàn),AVP可在多種神經(jīng)系統(tǒng)疾病,如腦外傷和腦缺血的情況下促進(jìn)腦水腫的形成[2-3]。AVP的這種作用可能是與其受體V1αR結(jié)合后,通過調(diào)節(jié)水通道蛋白4(aquaporin4,AQP4)所介導(dǎo)的水分子轉(zhuǎn)運(yùn)而實(shí)現(xiàn)的。本實(shí)驗(yàn)研究腦出血后V1αR和AQP4在腦組織的表達(dá)規(guī)律,以明確二者在出血性腦水腫形成中的作用。
1.1.1 動(dòng)物:清潔級(jí)雄性SD大鼠120只,體質(zhì)量200~250 g,由重慶醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供,許可證號(hào):SCXK(渝)2007-0001。
1.1.2 主要試劑和藥物:小鼠抗大鼠AQP4單克隆抗體和兔抗大鼠V1αR多克隆抗體(Santa Cruz公司),F(xiàn)ITC標(biāo)記山羊抗小鼠IgG和TRITC標(biāo)記山羊抗兔IgG(北京中杉金橋公司),HRP標(biāo)記山羊抗小鼠IgG和HRP標(biāo)記山羊抗兔IgG(Canspec公司),Western及IP細(xì)胞裂解液(碧云天生物技術(shù)研究所)?!?br>