HIV－P24核酸適配體的篩選

張 寧，毛愛紅，馬 瑾，廖世奇*，張麗瓊，王曉清，馬 君

(1.蘭州理工大學生命科學與工程學院，甘肅蘭州730050;2.甘肅省醫學科學研究院，甘肅蘭州730050)

HIV－P24核酸適配體的篩選

張 寧1，毛愛紅2，馬 瑾2，廖世奇2*，張麗瓊1，王曉清2，馬 君1

(1.蘭州理工大學生命科學與工程學院，甘肅蘭州730050;2.甘肅省醫學科學研究院，甘肅蘭州730050)

目的 利用SELEX技術篩選HIV-P24的核酸適配體，為艾滋病的診斷和治療奠定基礎。方法 以重組P24為篩選靶，用SELEX技術從隨機寡核苷酸庫中篩選與HIV-P24結合的寡核苷酸，利用凝膠阻滯實驗鑒定第12輪篩選到的寡核苷酸與HIV-P24的結合，再用Dot-blot法篩選出與HIV-P24結合的核酸適配體，并檢測核酸適配體識別HIV-P24的特異性。結果 Dot-blot篩選到5條與HIV-P24有較強結合能力的核酸適配體，且均為不同的序列。特異性檢測顯示，18和26號配體只與HIV-P24特異性結合，而與人血清白蛋白、牛血清白蛋白和脫脂奶粉均無明顯結合。結論 成功篩選到2條特異結合HIV-P24的核酸適配體，為其應用于艾滋病診斷和治療提供了實驗基礎。

SELEX技術;HIV-P24;核酸適配體

P24是HIV-1的核心抗原，在病毒的包裝和成熟過程起重要作用。機體感染HIV-1后，P24在血清中出現的時間較早，一般在HIV-1感染后2～3周就可以檢測，可作為艾滋病窗口期檢測的血清標志物。通過檢測血液中的P24，可達到早期診斷和治療的目的［1－2］。

核酸適配體是通過SELEX技術篩選得到的一類寡核苷酸分子，能與靶分子強特異、高親和力地結合，并發揮生物學效應［3－4］。由于其篩選靶分子范圍廣、分子質量小、免疫原性低，且可進行化學合成、改造與標記［5］，核酸適配體越來越受到人們的青睞。……