早期血清pNF-H和S-100B的含量變化對顱腦損傷患者療效的影響

[摘要] 目的 探討顱腦損傷患者（早期）血清中神經(jīng)絲蛋白H磷酸化亞型（pNF-H）和S-100B水平的變化對其療效的影響。 方法 采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測40名健康人和118例顱腦損傷患者損傷后6h、12h、24h、3d、5d、7d的血pNF-H和S-100B水平，分析pNF-H與格拉斯哥昏迷評分及預(yù)后的關(guān)系。 結(jié)果 觀察組各時間點檢測血pNF-H和S-100B濃度均顯著高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P均 ＜ 0.05）；觀察組內(nèi)中、重型亞組各時間點檢測血pNF-H濃度均顯著高于輕型顱腦損傷亞組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P均 ＜ 0.05）；重型亞組各時間點血清pNF-H濃度均顯著高于中型顱腦損傷亞組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P均 ＜ 0.05）；顱腦損傷后24h的血pNF-H水平與24h的GCS及6個月后格拉斯哥預(yù)后評分（GOS）呈負相關(guān) (r = -0.47、-0.33， P均 ＜ 0.05)。 結(jié)論 血pNF-H和S-100B水平檢測可作為判斷顱腦損傷早期病情和療效的指標之一。

[關(guān)鍵詞] 神經(jīng)絲蛋白H磷酸化亞型；S-100B蛋白；顱腦損傷

[中圖分類號] R651.1+5 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701（2012）04-0069-03

The early change and influencing factor of effect in treatment of serum pNF-H and S-100B in patients with traumatic brain injury

JIE Yuanqing

Department of Neuro Surgery， the People’s Hospital of Quzhou City in Zhejiang Province， Quzhou 324000， China

[Abstract] Objective To explore the early changes and curative effect of serum pNF-H and S-100B level in patients with traumatic brain injury. Methods Serum pNF-H and S-100B level of 40 healthy persons and 118 patients with traumatic brain injury were detected by ELISA method， and analysis the relationship with GCS and prognosis. Results The pNF-H and S-100B level of patients were higher than that of the control group(P ＜ 0.05); the pNF-H level of medium and heavy group were higher than that of light group(P ＜ 0.05); the pNF-H level of heavy group was higher than that of mediumgroup(P ＜ 0.05); the pNF-H level of 24h after TBI has negative correlation with 24h GCS(P ＜ 0.05) and 6month GOS(P ＜ 0.05). Conclusion pNF-H and S-100B level examinations can be used for diagnosis of early brain injury and predict prognosis.

[Key words] pNF-H; S-100B; Traumatic brain injury

神經(jīng)絲蛋白H磷酸化亞型（phosphorylated axonal form themajor neurofilament subunit NF-H，pNF-H）是神經(jīng)絲蛋白H（neurofilament H，NF-H）的磷酸化亞型，被認為是可以反映軸突損傷的潛在標志物[1]。近期有研究表明，腦出血患者發(fā)病后檢測血液中pNF-H和腦損傷標志物S-100B含量呈顯著性變化[2]，但是關(guān)于顱腦損傷（TBI）患者早期血pNF-H水平變化對顱腦損傷預(yù)后的相關(guān)性研究較少，對顱腦損傷后和S-100B的含量變化已經(jīng)有較多研究資料。本研究通過對顱腦損傷患者早期血pNF-H和腦損傷標志物S-100B蛋白濃度的測定，探討pNF-H和S-100B對于顱腦損傷患者的預(yù)期療效的意義。現(xiàn)報道如下。1 資料與方法

1．1一般資料

隨機選擇2010年10月～2011年4月單數(shù)日住院治療的不同程度TBI患者118例為治療組。病因為車禍傷、高處墜落傷、打傷等意外傷害。診斷為不同部位的腦挫裂傷，伴發(fā)不同程度的顱內(nèi)血腫、蛛網(wǎng)膜下腔出血、顱骨骨折。其中男61例、女57例，年齡23～68歲，平均（37.32±7.85)歲。同時隨機選擇40名同時段健康體檢者為正常對照組，年齡19～68歲，平均(35.35±9.28)歲。兩組性別、年齡等一般資料，無統(tǒng)計學(xué)差異（P ＞ 0.05）。

1.2方法

TBI患者于傷后 6 h、12 h、24 h、3 d、5 d、7 d采取靜脈血，進行離心沉淀，取上清液血清置于-70℃冰箱保存。對照組采用相同條件和方法采血取樣。并用ELISA法測定pNF-H濃度，試劑購自美國EnCore公司；采用ELISA法測定S-100B濃度，試劑購自武漢博士德公司；檢測儀器采用BioRad酶標儀。在TBI發(fā)生后24 h根據(jù)格拉斯哥昏迷評分（glasgow coma scale，GCS）對治療組評分：3～8分為重型TBI，9～12分為中型TBI，13～15分為輕型TBI。并在6個月后隨訪觀察患者格拉斯哥預(yù)后評分(GOS)：1分為死亡，2分為植物生存，3分為重度病殘，4分為中度病殘，5分為恢復(fù)良好。

1.3統(tǒng)計學(xué)方法

實驗數(shù)據(jù)采用SPSS14.0統(tǒng)計軟件。計量數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標準差（x±s）表示，組間比較采用t檢驗，相關(guān)性比較采用Sperman等級相關(guān)分析。P ＜ 0.05為顯著性差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 治療組和正常對照組各時間點的血pNF-H和S-100B濃度測定

如表1可見，治療組各時間點血pNF-H和S-100B濃度均顯著高于對照組，經(jīng)檢驗（t = 2.12、2.33、2.46、2.67、2.80、3.03，2.02、2.20、2.34、2.50、2.69、2.88；P均 < 0.05）。

2.2 治療組早期pNF-H水平與預(yù)后的相關(guān)性分析

如表2可見，根據(jù)24hGCS評分對觀察組分組，發(fā)現(xiàn)中、重型TBI組各時間點血pNF-H濃度均顯著高于輕型TBI組，經(jīng)t檢驗有統(tǒng)計學(xué)差異 (t =2.03、2.13、2.22、2.33、2.40、2.54，2.32、2.43、2.57、2.63、2.75、2.89，P均＜0.05)；重型TBI組各時間點血清pNF-H濃度均顯著高于中型TBI組，經(jīng)t檢驗有統(tǒng)計學(xué)差異（t = 2.24、2.31、2.36、2.46、2.50、2.63，P均＜0.05），提示隨著病情越重，血pNF-H濃度越高。

相關(guān)性分析提示，TBI后24h患者早期血清pNF-H水平與相同時段的GCS評分呈顯著性負相關(guān)（r = -0.47， P ＜0.05）；與6個月后隨訪的GOS評分呈顯著性負相關(guān)（r = -0.33， P ＜ 0.05）。

3 討論

顱腦損傷（traumatic brain injury，TBI）是目前導(dǎo)致人類死殘的主要疾病之一[3]，對于尋找TBI后早期所產(chǎn)生的特異性生化標志物以及其對TBI療效分析的作用，已成為近期研究的熱點。

神經(jīng)絲蛋白（neurofilament， NF）分為NF-L、NF-M和NF-H三種，三者形成穩(wěn)定的異聚體。是軸突生長的必需因子，存在于成熟神經(jīng)元中的中間絲，是大直徑有髓軸突中含量最高的成分，并通過影響軸突轉(zhuǎn)運和傳導(dǎo)速度，而在細胞間傳遞中起重要作用。pNF-H在神經(jīng)元損傷和再生反應(yīng)時表達增加，提示其可以反映神經(jīng)損傷和再生的程度。一系列動物實驗發(fā)現(xiàn)，pNF-H水平變化與神經(jīng)損傷有關(guān)。RamaRao等[4]報道神經(jīng)毒劑損傷可造成腦內(nèi)pNF-H等蛋白表達增加。Sha等[5]也發(fā)現(xiàn)軸突損傷大鼠的血清及腦脊液中pNF-H濃度升高，越來越多的臨床研究也表明，pNF-H水平變化與腦損傷有著重要聯(lián)系，如Zurek等[6]發(fā)現(xiàn)pNF-H水平高低可反映兒童腦損傷患者的死亡率。pNF-H還有抵御各種蛋白酶作用的特點，因而可保持在被釋放入血后較長時間不被降解，因此檢測血清pNF-H水平變化可能是評估神經(jīng)損傷的重要指標，其可以間接反應(yīng)TBI導(dǎo)致的腦損害的程度，但是目前pNF-H與TBI導(dǎo)致腦損傷程度的評估及其與預(yù)后的關(guān)系的研究較少。S-100B蛋白是一種含量較高的神經(jīng)組織蛋白質(zhì)。當中樞神經(jīng)系統(tǒng)受損時，S-100B蛋白即被釋放至腦脊液中在血腦屏障受損后，S-100B進入血液循環(huán)，目前已有研究表明血S-100B的升高常提示有TBI發(fā)生[7]。

本次研究采用ELISA定量方法檢測了118例TBI患者和40名健康人血清pNF-H和S-100B蛋白水平，發(fā)現(xiàn)TBI患者在傷后6h、12h、24h、3d、5d、7d血清pNF-H和S-100B水平均顯著高于對照組，通過損傷后24h的GCS評分分組，我們還發(fā)現(xiàn)中、重型組各時間點血清pNF-H濃度均顯著高于輕型組(P均 ＜ 0.05)；重型組各時間點血清pNF-H濃度均顯著高于中型組 (P均 ＜ 0.05)，提示隨著病情加重，血清pNF-H濃度升高。這與傅小君等[8]關(guān)于S100B的研究類似，也與Anderson等[9]關(guān)于TBI患者血清及腦脊液中pNF-H水平變化的研究結(jié)果一致，提示pNF-H可作為觀察TBI的程度的一個臨床指標。

本次研究檢測出TBI早期pNF-H和S-100B水平與6個月后GOS評分呈顯著負相關(guān)，TBI早期24 h內(nèi)血清pNF-H和S-100B高，則6個月后GOS評分值相應(yīng)降低，GOS評分值低則提示預(yù)后變差。由此本研究認為TBI后早期pNF-H和S-100B的含量變化可較好地推斷患者預(yù)后。

本研究還發(fā)現(xiàn)傷后第24小時的pNF-H水平與24h的GCS評分呈顯著性負相關(guān)，表明pNF-H水平與TBI的腦損傷程度存在正相關(guān)可能。病理生理機制可能與腦內(nèi)軸突損傷有關(guān)，但具體機制還有待進一步研究。早期血pNF-H和S-100B的含量變化可作為推測TBI后腦損傷程度以及預(yù)測TBI的預(yù)后的重要指標，在TBI早期具有較高的臨床檢測價值。

綜上所述，本研究通過觀察顱腦損傷早期各時段血清pNF-H的含量和S-100B蛋白濃度，發(fā)現(xiàn)其與預(yù)后密切相關(guān)，提示血清早期pNF-H和S-100B的含量變化可作為TBI預(yù)后判斷的一項指標。

[參考文獻]

[1] Ueno T， Ohori Y， Ito J， et al. Hyperphosphorylated neurofilament NF-H as a biomarker of the efficacy of minocycline therapy for spinal cord injury[J]. Spinal Cord，2011， 49(3):333-336.

[2] Lewis SB， Wolper RA， Miralia L， et al. Detection of phosphorylated NF-H in the cerebrospinal fluid and blood of aneurysmal subarachnoid hemorrhage patients[J]. J Cereb Blood Flow Metab，2008， 28(6): 1261-1271.

[3] Baguley S， Slewa-Younan R， Lazarus A. Long-term mortality trends in patients with traumatic brain injury[J]. Brain Injury， 2000， 14(6): 505-512.

[4] RamaRao G， Acharya JN， Bhattacharya BK. Changes of protein oxidation， calpain and cytoskeletal proteins (alpha tubulin and pNF-H) levels in rat brain after nerve agent poisoning[J]. Toxicol Lett，2011， 203(3):227-236.

[5] Shaw G， Yang C， Ellis R， et al. Hyperphosphorylated neurofilament NF-H is a serum biomarker of axonal injury[J]. Biochem Biophys Res Commun，2005， 336(4): 1268-1277.

[6] Zurek J， Bartlová L， Fedora M. Hyperphosphorylated neurofilament NF-H as a predictor of mortality after brain injury in children[J]. Brain Inj，2011， 25(2):221-226.

[7] Geyer C， Ulrich A， Grafe G， et al. Diagnostic value of S100B and neuron-specific enolase in mild pediatric traumatic brain injury[J]. J Neurosurg Pediatr，2009， 4(4):339-344.

[8] 文立，李善泉． 腦損傷生物學(xué)指標研究進展[J]． 國際神經(jīng)病學(xué)神經(jīng)外科學(xué)雜志，2006，33(6)：577-582.

[9] Anderson KJ， Scheff SW， Miller KM， et al. The phosphorylated axonal form of the neurofilament subunit NF-H (pNF-H) as a blood biomarker of traumatic brain injury[J]. J Neurotrauma，2008， 25(9):1079-1085.

（收稿日期：2011-11-18）