電化學(xué)發(fā)光法與放射免疫法測(cè)定血清甲狀腺激素的比較

[摘要] 目的 探討電化學(xué)發(fā)光免疫法（ECLI）與放射免疫法（RIA）在檢測(cè)血清甲狀腺激素結(jié)果的可靠性及方法學(xué)的便利性上是否更具優(yōu)勢(shì)。 方法 利用兩種方法分別檢測(cè)甲狀腺激素（FT3、FT4、TSH），并進(jìn)行精密度、線性范圍、靈敏度、回收率等方面的比較。 結(jié)果 電化學(xué)發(fā)光法在精密度、線性范圍、靈敏度、回收率等方面均優(yōu)于放射免疫法，且檢測(cè)結(jié)果差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜ 0.05）。 結(jié)論 電化學(xué)發(fā)光法比放射免疫法具有明顯優(yōu)勢(shì)。

[關(guān)鍵詞] 電化學(xué)發(fā)光法；放射免疫法；甲狀腺激素

[中圖分類號(hào)] R446.62 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 1673-9701（2012）03-0071-02

Comparing of measurement of thyroid hormones by ECLIA and RIA

ZHANG Yuping

Deparment of Clinical Laboratory， the Affiliated Hospital of Xinyang Vocational and Technical College， Xinyang 464000， China

[Abstract] Objective To compare which one is superiority in result of reliability and methodology of convenience between ECLIA and RIA measurement. Methods The thyroid hormones were measured by ECLIA and RIA. The measurements were compared of precision， sensitivity， coefficient of recovery， linear range and others. Results Precision， sensitivity， coefficient of recovery， linear range of ECLIA have had an advantage over RIA. Conclusion ECLIA is an outstanding method applied in clinical laboratory.

[Key words] ECLI; RIA; Thyroid hormones

放射免疫法（RIA）檢測(cè)成本低，但具有報(bào)告時(shí)間長(zhǎng)、結(jié)果不穩(wěn)定、同位素污染等缺點(diǎn)，漸趨于淘汰。近年來隨著檢測(cè)分析技術(shù)的發(fā)展，電化學(xué)發(fā)光（ECLI）分析法日益受到關(guān)注，本文分別采用2種方法對(duì)甲狀腺激素標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和20份患者血清甲狀腺激素進(jìn)行測(cè)定并對(duì)其評(píng)價(jià)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

20份血清標(biāo)本取自門診患者，均為甲狀腺疾病，血標(biāo)本無脂血和溶血。標(biāo)準(zhǔn)品及質(zhì)控品均為羅氏公司提供。

1.2 儀器與試劑

電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀為美國(guó)羅氏公司生產(chǎn)的2010型；美國(guó)產(chǎn)全自動(dòng)γ計(jì)數(shù)儀。電化學(xué)發(fā)光免疫分析試劑購(gòu)于羅氏公司，放射免疫分析試劑購(gòu)于天津九鼎公司。

1.3 方法

1.3.1 精密度 用兩種方法分別對(duì)中、高值質(zhì)控品進(jìn)行測(cè)定，每份樣品連測(cè)20次，計(jì)算批內(nèi)CV值。每日測(cè)定1次，連續(xù)20次，計(jì)算批間CV值。

1.3.2 線性范圍 將甲狀腺激素標(biāo)準(zhǔn)品（FT3 40 pmol/L，F(xiàn)T4 45 pmol/L，TSH 100 mIU/L）及中、高值質(zhì)控品按不同比例關(guān)系混合制成評(píng)價(jià)樣品，重復(fù)測(cè)定5次。坐標(biāo)圖上預(yù)期值與實(shí)測(cè)值的直線所達(dá)的限值即為線性范圍。

1.3.3 靈敏度 分別對(duì)空白零標(biāo)準(zhǔn)做批內(nèi)20次檢測(cè)，分別記錄放射強(qiáng)度和發(fā)光強(qiáng)度并做統(tǒng)計(jì)，再計(jì)算檢測(cè)低限（LLD）[1]。公式：LLD=均值BIK+2SBLK。

1.3.4 回收實(shí)驗(yàn) 將甲狀腺激素標(biāo)準(zhǔn)品（FT3 40 pmol／L，F(xiàn)T4 45 pmol/L，TSH 100 mIU/L）作為基質(zhì)，在其中分別加入中、高值質(zhì)控品作為樣品1和2 ，然后分別進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算均值并進(jìn)行比較。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件包，所有數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，兩組間比較計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)，以P ＜ 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 精密度

觀察兩種方法測(cè)定甲狀腺激素的批內(nèi)和批間CV結(jié)果可見，兩種方法均達(dá)到了臨床檢驗(yàn)的質(zhì)量要求，但電化學(xué)發(fā)光法的精密度更高。見表1、2。

2.2 線性范圍

2種方法檢測(cè)FT3、FT4、TSH的可報(bào)告范圍：電化學(xué)發(fā)光免疫法（0.26～115） pmol/L、（0.12～116） pmol/L、（0.08～90）mIU/L。放射免疫法為（1.14～65）pmol/L、（1.69～82） pmol/L、（0.23～58）m/L。

2.3 靈敏度

兩種方法檢測(cè)FT3、FT4、TSH的低限，電化學(xué)發(fā)光免疫法為0.12pmol/L、0.16pmol/L、0.09mIU/L；放射免疫法為1.11pmol/L、1.77pmol/L、0.24mIU/L。

2.4 回收實(shí)驗(yàn)

檢測(cè)結(jié)果平均回收率見表。均有較好的回收率，比較后發(fā)現(xiàn)電化學(xué)發(fā)光免疫法優(yōu)于放射免疫法（P ＜ 0.05）。

3 討論

放射免疫分析始于20世紀(jì)60年代，其敏感度、特異性均較好，發(fā)生交叉反應(yīng)少，準(zhǔn)確性好、重復(fù)性好、批內(nèi)批間誤差低，但容易發(fā)生放射性污染，不能形成自動(dòng)化，不能快速地檢測(cè)、出報(bào)告[1]。電化學(xué)發(fā)光免疫法是電化學(xué)發(fā)光和免疫測(cè)定相結(jié)合的新一代標(biāo)記免疫技術(shù)，近年來在國(guó)內(nèi)一部分臨床實(shí)驗(yàn)室相繼應(yīng)用。電化學(xué)發(fā)光免疫法不僅可用于檢測(cè)激素類、腫瘤標(biāo)志物類，還可用于傳染病、血藥濃度的監(jiān)測(cè)，預(yù)計(jì)將來臨床應(yīng)用會(huì)更加廣泛。電化學(xué)發(fā)光免疫法自動(dòng)化強(qiáng)，可以24小時(shí)開機(jī)，能夠隨時(shí)滿足現(xiàn)代醫(yī)院的節(jié)奏和病人對(duì)醫(yī)院的更高要求，如一些急診項(xiàng)目；絨毛膜促性腺激素、肌紅蛋白、肌鈣蛋白等，隨時(shí)檢測(cè)，具有更大的臨床應(yīng)用價(jià)值[2]。

本組試驗(yàn)表明兩種方法檢測(cè)血清FT3、FT4、TSH的結(jié)果在精密度、線性范圍、靈敏度、回收率等幾方面均有顯著性差異，顯示電化學(xué)發(fā)光免疫法明顯優(yōu)于放射免疫法。電化學(xué)發(fā)光免疫法檢測(cè)血清FT3、FT4、TSH時(shí)，被測(cè)抗原與抗體全部參與反應(yīng)；而放射免疫法是競(jìng)爭(zhēng)性反應(yīng)，被測(cè)物和標(biāo)準(zhǔn)物都不能全部參與反應(yīng)，最大結(jié)合時(shí)一般在50%左右，亦即抗體結(jié)合位點(diǎn)與標(biāo)記抗原結(jié)合一半[3]。試驗(yàn)結(jié)果顯示了電化學(xué)發(fā)光免疫法在可測(cè)定范圍上要遠(yuǎn)勝于放射免疫法。

電化學(xué)發(fā)光可以最大程度消除樣本底的干擾及對(duì)位量的散射，可以獲得較高的靈敏度。另外電化學(xué)發(fā)光免疫法可以全自化，能夠最大限度減少系統(tǒng)和隨機(jī)誤差。而且電化學(xué)發(fā)光免疫法試劑有效期長(zhǎng)，檢測(cè)快速準(zhǔn)確，且安全無毒，不會(huì)出現(xiàn)同位素輻射污染的問題[4]。

因此，電化學(xué)發(fā)光將會(huì)成為微量法檢測(cè)的發(fā)展和普及方向，可以替代放免法，使實(shí)驗(yàn)室的服務(wù)具有競(jìng)爭(zhēng)力。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 馮琴，楊駿，朱菩軍. 電化學(xué)發(fā)光分析與酶聯(lián)免疫分析用于測(cè)定血清甲狀腺激素的評(píng)價(jià)[J]. 地方病通報(bào)，2007，22（6）：32-34.

[2] 王國(guó)洪，趙理想，許瑞吉，等. 放射免疫分析和化學(xué)發(fā)光分析血清胰島素結(jié)果差異[J]. 放射免疫學(xué)雜志，2007，20（6）：557-558．

[3] 吳嬰. 放射免疫分析與電化學(xué)發(fā)光法測(cè)定血清FT3、FT4結(jié)果分析[J]. 放射免疫學(xué)雜志，2010，23（1）：29-30.

[4] 馬紅霞，周運(yùn)恒，楊藺，等. ELISA法和電化學(xué)發(fā)光免疫法檢測(cè)血清HBsAg結(jié)果比較分析[J]. 醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)，2010，25（6）：473-474.

（收稿日期：2011-11-21）