MMP2和CA50在膀胱移行細胞癌\\癌旁組織及正常膀胱組織中的表達及臨床意義

關鍵詞 膀胱移行細胞癌 癌旁組織 MMP2 CA50

膀胱移行細胞癌是泌尿系常見的腫瘤，術后易復發，腫瘤在侵襲和轉移過程中基質金屬蛋白酶類（MMP2）和糖鏈抗原CA50起重要作用，采用免疫組化法，聯合檢測MMP2和CA50在各組織中的表達，據其不同的陽性表達程度，分析其與腫瘤分期、分級的關系及意義。

資料與方法

一般資料：選取2007年1月～2009年11月收治膀胱癌組患者45例，男35例，女10例；年齡29～81歲，平均55.7歲。行膀胱切除或部分切除術。經膀胱鏡檢+活檢診斷為膀胱移行細胞癌，術后病理證實膀胱移行細胞癌Ⅰ級14例，移行細胞癌Ⅱ級17例，移行細胞癌Ⅲ級14例。本組11例膀胱全切，34例術后1周開始行膀胱灌注化療，方案：NS 20ml+羥喜樹堿20mg，1次/周×8，后1次/月×10，每3個月復查膀胱鏡，6例復發再次手術，其中1例術后死于腦血管病，病人全部得以隨訪。另于前列腺開放手術中切取正常膀胱組織10塊，約0.5cm×0.5cm×0.5cm大小作為對照。

方法：①取材固定包埋：膀胱移行細胞癌術后即取材，取癌組織、癌旁1.0cm、2.0cm膀胱組織各1塊；另于前列腺開放手術中切取正常膀胱組織10塊，大小均為0.5cm×0.5cm×0.5cm。②采用MMP2、CA50免疫組化染色試劑，一抗為鼠抗人MMP2、CA50單克隆抗體，生物素標記的通用性型二抗工作液，用已知陽性片作陽性對照，PBS代替一抗作陰性對照。

評分標準：采用半定量積分法，以胞漿或胞膜中出現棕黃色或黃色為陽性細胞，據陽性細胞比例及著色深淺計數。計數5個隨機高倍鏡視野下100個細胞中陽性細胞數，以百分數表示，取其平均值。

統計學處理：采用SPSS10.0統計軟件，用秩和檢驗和Spearman等級相關分析處理數據（檢驗水準α＝0.01）。

結 果

本組45例膀胱移行細胞癌組織細胞中，MMP2有7例陰性表達（15.56%），11例弱陽性表達（24.44%），19例陽性表達（42.22%），8例強陽性表達（17.78%）。CA50有15例陰性表達（33.33%），9例弱陽性表達（20.00%），14例陽性表達（31.11%），7例強陽性表達（15.56%）。二者在各膀胱組織細胞中的表達陽性率：正常膀胱組織＜癌旁2.0cm組織＜癌旁1.0cm組織＜膀胱癌組織。本組中MMP2和CA50表達具有一致性，從移行細胞癌Ⅰ～Ⅲ級，陽性率逐漸升高。瘤細胞表達強度不均，腫瘤間質陽性強度不均勻，與腫瘤細胞鄰接處表達較強，3組之間差異顯著（P＜0.01）。MMP2陽性表達與腫瘤的病理分級、浸潤深度呈正相關性。10例膀胱正常黏膜MMP2均為陰性，細胞漿內無深棕色顆粒。見表1、2。

討 論

腫瘤細胞的侵襲和轉移是惡性腫瘤致死的主要原因，研究發現基底膜（BM）及細胞外基質（ECM）在腫瘤的浸潤和轉移過程中起關鍵作用。腫瘤細胞在侵襲和轉移中破壞ECM，而基質金屬蛋白酶類（MMPs）是破壞細胞外基質的主要酶類，當細胞惡變時常有MMPs的升高。Dvaies等用酶普分析法定量檢測膀胱癌組織中MMP2的水平，發現有活性的MMP2水平隨膀胱癌的惡性分級增加而升高，且侵襲性腫瘤明顯高于淺表性腫瘤，MMP2高表達與患者預后明顯相關。免疫組化和原位雜交研究證實，腫瘤細胞與間質細胞中均可表達MMP2，但以腫瘤組織表達相對較高。本研究顯示，膀胱移行細胞癌組織具有較強分泌MMP2的能力。癌旁不典型增生組織的MMP2蛋白表達較低，但高于正常組織。腫瘤中的血管增生提示預后不良。

糖鏈抗原CA50為單涎酸 N-節玳酯的抗原，由癌細胞株產生。CA50以酯或脂蛋白結合的形式存在于細胞膜，屬于鞘糖脂類標記物，是上皮源性腫瘤的廣譜標志物，不具有器官特異性。細胞癌變時，因靜止的一些轉化酶被激活，引起細胞表面糖類結構發生改變，抗原性質改變，導致腫瘤標志物的產生。糖鏈抗原CA50在癌變過程中由腫瘤組織和癌細胞產生。

本組通過MMP2和CA50聯合檢測發現，二者在膀胱移行細胞癌、癌旁組織和正常膀胱組織中的表達具有一致性：膀胱移行細胞癌Ⅰ級陽性表達低于Ⅱ～Ⅲ級，隨病理分級的增加表達增強，與腫瘤惡性度呈顯著相關性。二者陽性表達與病人的年齡、性別無明顯關系與病理分期、分級關系密切。移行細胞癌Ⅰ級陽性表達，大部分基底膜強陽性，表達較均勻，Ⅱ級陽性表達但基底膜陽性表達不均勻，膀胱移行細胞癌Ⅲ級陽性表達，腫瘤、間質細胞陽性表達強度不均，與腫瘤細胞鄰接處表達較強，三組之間差異顯著（P＜0.01）。各膀胱組織中的表達陽性率：正常膀胱組織＜癌旁2.0cm＜癌旁1.0cm＜膀胱癌組織。陽性表達位于癌細胞胞漿，細胞間質和部分腫瘤組織間質內，陽性表達主要分布在間質、血管臨界面及癌侵入膀胱深層組織前緣，特別是呈浸潤性生長的癌組織周圍表達較強。在10例正常膀胱組織中二者呈陰性表達，與實驗組45例中MMP2和CA50的表達有明顯的差異，提示與腫瘤的進展有關。本組復發6例患者中，病理分級Ⅲ級者3例，Ⅱ級2例，Ⅰ級1例；其中癌旁2cm切緣MMP2和CA50均陽性者1例，癌旁1cm 2項指標均陽性者3例，癌組織中二者強陽性3例，陽性2例。表明MMP2和CA50的高表達，提示復發率高，預后較差，與患者預后明顯相關。故采用MMP2和CA50聯合檢測分析，對膀胱移行細胞癌患者預后的判斷和進一步治療具有指導意義。

表1 MMP2在各膀胱組織細胞中的表達（例）

表2 CA50 在各膀胱組織細胞中的表達（例）