摘 要 目的:探討梅毒快速血漿反應素環狀卡片試驗(RPR)、酶聯免疫吸附試驗(TP-ELISA)、和梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗(TPPA)對梅毒病人診斷的敏感性和特異性。方法:使用目前最為常用的RPR、TP-ELISA、和TPPA法對227份梅毒檢測呈陽性的血清標本及110份正常對照血清進行檢測。結果:RPR、TP-ELISA、及TPPA法的敏感度分別是83.2%、98.7%、99.7%,特異性分別是73.5%,97.4%、100%。結論:TPPA是一種高特異性、敏感性較好的梅毒血清學診斷檢測方法。
關鍵詞 梅毒血清學診斷 環狀卡片血漿反應素試驗 梅毒酶聯免疫吸附試驗梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗
梅毒是由梅毒螺旋體引體的一種慢性系統性的傳染病。梅毒螺旋體一旦侵入機體后,血清中可產生非特異性反應素抗體和梅毒螺旋體特異性抗體。目前用于梅毒血清學的檢驗方法主要有非梅毒螺旋體血清試驗和梅毒螺旋體血清試驗,檢測感染者血清梅毒螺旋體抗體是診斷梅毒螺旋體感染的主要方法。不同的檢測方法都有其特殊的臨床應用價值,實驗室如何更合理地選用檢測方法,避免錯誤,誤診、漏診而產生醫患糾紛等問題都是非常必要的。為此,就如何合理的運用RPR、TP-ELISA、和TPPA3種方法檢測進行了探討,現報告如下。
資料與方法
2010年5~10月確定一期梅毒血清樣本53份,二期梅毒血清樣本72份,三期梅毒血清樣本47份,臨床治愈后梅毒復查血清樣本44份。其他經臨床確定為類風濕性關節炎血清樣本3份,系統性紅斑狼瘡患者血清樣本2份,妊娠血清樣本6份,健康體檢者血清樣本110份。
試劑和儀器:RPR、TP-ELISA試劑盒,TPPA試劑盒。TP-ELISA使用儀器ThermoWell wash 4 MK2洗板機和WellscanK-3酶標儀。RPR使用儀器XK95-Ⅰ型多用振蕩器。
方法:采用RPR、TP-ELISA和TPPA3種方法分別對337份標本按照試劑盒的說明書操作方法進行檢驗。
結 果
337份血清標本分別采用RPR、TP-ELISA和TPPA法檢測結果,見表1。
3種方法檢測用于梅毒陽性率,靈敏度和特異性結果比較方法,見表2。
討 論
本實驗室選用了3種不同檢測方法診斷梅毒:①RPR檢測梅毒非特異性抗體用于過篩試驗及療效觀察。②TP-ELISA檢測梅毒特異性抗體可作定量,用于療效觀察,適合大規模標本檢測。③TTP用于梅毒的確認實驗。RPR實驗檢查的是人體內的反應素,它是人體感染梅毒螺旋體后組織受到破壞裂解出來的一種類脂成分,這種成分與梅毒螺旋體的蛋白質結合成為抗原,刺激機體產生抗類脂質抗體即反應素。梅毒螺旋體破壞組織可使機體產生反應素,而其他破壞機體的過程也可產生反應素,所以梅毒患者RPR實驗陽性,但RPR陽性者并不一定感染梅毒螺旋體,如懷孕、風疹、水痘、病毒肝炎、亞急性細菌性心內膜炎、類風濕性關節炎、SLE、干燥綜合征等,RPR同樣可以呈假陽性。
選用337份樣本,110份正常對照,227份陽性結果標本中,一期梅毒53例,RPR陽性率86.8%,TP-ELISA陽性率92.4%,TPPA陽性率94.3%;二期梅毒72例,RPR陽性率98.6%,TP-ELISA陽性率97.2%,TPPA陽性率100%,三期梅毒47例,RPR陽性率4.3%,TP-ELISA陽性率97.8%,TPPA陽性率100%;臨床治愈復查44例,RPR陽性率4.5%,TP-ELISA陽性率100%,TPPA陽性率100%,另外11例為其他疾病所致,RPR試劑假陽性。通過實驗數據和結果證實,如RPR(-),TP-ELISA(-),TPPA(-)可排除梅毒或初期感染潛伏期;RPR(+),TP-ELISA(-),TPPA(-)為假陽性或初期感染;RPR(+),TP-ELISA(+),TPPA(+)為梅毒感染;RPR(-),TP-ELISA(+),TPPA(+)為晚期梅毒或梅毒既往感染。
綜上所述,臨床應該同時檢測非特異性抗類脂質抗體和特異性抗螺旋體抗體(TP-Ab)來確認梅毒。梅毒血清學檢查是診斷梅毒的重要依據,但并非惟一依據,臨床應綜合分析梅毒血清學檢測結果,排除假陽性,假陰性情況,才能做出正確的診斷。通過本實驗統計數據及結果表明,實驗室合理的選用3種不同檢測方法進行梅毒檢測,將減少漏診、誤診,提高診斷率,為臨床梅毒分期的確診提供全面的參考依據,并且對判定梅毒的發展和痊愈,判斷藥物的療效和防治性傳播疾病起到積極作用。
參考文獻
1 國娟,倪藍.748例梅毒患者血清學試驗結果分析[J].中華現代臨床醫學雜志,2004,10.
2 宋繼漢,盛晚香,馮宜,等.ELISA在梅毒血清學診斷中的應用[J].中國皮膚性病學雜志,2000,14:258-259.
3 周洪偉,林松.三種方法檢測梅毒螺旋體抗體的比較[J].微生物學雜志,2005,25(3):99.
4 尹躍平.梅毒血清學檢測方法的應用評價[J].實用醫院臨床雜志,2006,3(2):13.
表1 337份血清樣本3種方法檢測結果
表2 3種方法檢測梅毒患者的陽性率、特異性、靈敏度比較(%)