FHIT、β-Catenin在胃癌中表達(dá)及其相關(guān)性研究

【摘要】 目的 探討胃癌中FHIT和β-Catenin的表達(dá)相關(guān)性及其與胃癌發(fā)展之間的關(guān)系。方法 應(yīng)用免疫組化法檢測(cè)50例胃癌組織、10例胃良性病變組織標(biāo)本中FHIT和β-Catenin表達(dá)。結(jié)果 胃癌組織FHIT和β-Catenin的陽性表達(dá)率分別為22.00%和78.00%。FHIT在胃癌組織中表達(dá)缺失，與浸潤(rùn)深度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移關(guān)系密切（P<0.05），與患者的性別、年齡、腫瘤大小及分化程度無關(guān)（P>0.05）。β-Catenin在胃癌組織中高表達(dá)與浸潤(rùn)深度、腫瘤大小及分化程度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移關(guān)系密切（P<0.05），與患者的性別、年齡無關(guān)（P>0.05）。癌組織中FHIT和β-Catenin的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)（r=-0.358，P=0.011）。結(jié)論 FHIT和β-Catenin在胃癌中表達(dá)成顯著負(fù)相關(guān)，提示兩者在胃癌的發(fā)生發(fā)展中可能存在重要的協(xié)同作用。

【關(guān)鍵詞】 FHIT； β-Catenin； 胃癌； 免疫組織化學(xué)

Study on the Expression and Correlation of FHIT and β-Catenin in Gastric Carcinoma YOU Li-guang， XU Ya-dong， LI Xin-lei，et al. The Fifth Clinical Hospital of Harbin Medical University， Daqing 163318， China

【Abstract】 Objective To investigate the correlation of the expression of FHIT andβ-Catenin proteins and study its role in the development of gastric carcinoma.Methods The expression of FHIT and β-Catenin proteins was detected by SP immunohistochemical technique in 50 cases of gastric carcinoma，10 cases of benigh gastric lesions in tissue samples.Results The positive rates of FHIT andβ-Catenin proteins were 22.80% and 82.46% respectively in gastric carcinoma. Reduction of FHIT had no relation to the sex or age of the patients， sizes of tumors and tumor differentiation(P>0.05). The expression of FHIT was closely related to the depth of tumors and lymph node metastasis(P<0.05). The expression of β-Catenin was not related to the sex or age of the patients (P>0.05). The expression of β-Catenin was closely related to the depth of tumors， sizes of tumors ， tumor differentiation and lymph node metastasis(P<0.05). The expression of FHIT protein had a significant negative correlation with that of β-Catenin protein in gastric carcinoma(r=-0.358，P=0.011).Conclusion There is a significant negative correlation between high expressions of FHIT andβ-Catenin proteins in gastric carcinoma. The high expressions of FHIT andβ-Catenin proteins are possibly related to the development and metastasis of gastric carcinoma.

【Key words】 FHIT; β-Catenin; Gastric carcinoma; Immunohistochemistry

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細(xì)胞癌變是多因素、多階段、多基因變異的結(jié)果。脆性組氨酸三聯(lián)體（fragile histidine triad， FHIT）表達(dá)頻繁地降低或缺失，在細(xì)胞增殖、轉(zhuǎn)化及腫瘤發(fā)生中具有十分重要的作用^［1，2］。Wnt信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路致癌的關(guān)鍵是β-Catenin降解障礙并與Tcf-lef結(jié)合進(jìn)入胞核，激活下游靶基因引起細(xì)胞增殖和分化失控導(dǎo)致腫瘤發(fā)生^［3］。已知兩種基因與胃癌的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，但兩者在胃癌中表達(dá)的相關(guān)性尚未見報(bào)道。本研究旨在探討FHIT和β-Catenin的表達(dá)相關(guān)性及其與胃癌發(fā)生發(fā)展的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 標(biāo)本隨機(jī)取自哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院病理科2004～2005年存檔胃癌組織蠟塊50例和胃良性病變組織蠟塊10例。所有材料均經(jīng)福爾馬林固定，常規(guī)石蠟包埋，4 μm厚連續(xù)切片，常規(guī)染色后，復(fù)核病理診斷，并按WHO標(biāo)準(zhǔn)分型、分級(jí)。其中高中分化腺癌20例，低未分化腺癌30例，胃良性病變組織10例；癌組織直徑＜5 cm 21例，≥5 cm 29例；其中男35例，女15例，男女比為2.33∶1；年齡42～83歲，中位年齡61歲。所有病例均有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況記錄，其中轉(zhuǎn)移者30例。浸潤(rùn)深度至黏膜或黏膜下及至肌層17例，浸潤(rùn)至漿膜及穿透漿膜層33例。所有病例術(shù)前均未接受放療、化療。

1.2 試劑及染色法 β-Catenin多克隆抗體及鏈霉素抗生物素蛋白-過氧化物酶免疫組化染色試劑盒均為美國(guó)Santa Cruz公司產(chǎn)品；FHIT多克隆抗體和Envision試劑盒均為Zymed公司產(chǎn)品。均購自北京中山生物技術(shù)有限公司。用免疫組化SP法，將已知陽性的胃癌切片作為陽性對(duì)照，用磷酸鹽緩沖液（PBS）代替一抗作為陰性對(duì)照。

1.3 結(jié)果判定 FHIT陽性反應(yīng)產(chǎn)物呈棕黃色顆粒狀，定位在細(xì)胞漿中。β-Catenin陽性物質(zhì)呈棕黃色，定位于細(xì)胞膜，即連續(xù)的細(xì)胞膜染色。參照有關(guān)文獻(xiàn)^［4］，每張切片隨機(jī)選取10個(gè)高倍視野，每個(gè)高倍視野計(jì)數(shù)100個(gè)癌細(xì)胞，計(jì)算陽性細(xì)胞百分率，結(jié)果判定采用盲法，并由病理科醫(yī)師對(duì)染色結(jié)果復(fù)閱核定。判定標(biāo)準(zhǔn)：（1）陰性（-）：陽性細(xì)胞數(shù)＜5%；（2）弱陽性（+）：陽性細(xì)胞數(shù)在5%～25%之間，染色淡；（3）中度陽性（++）：陽性細(xì)胞數(shù)26%～50%之間，染色清晰；（4）強(qiáng)陽性（+++）：陽性細(xì)胞數(shù)＞50%，染色強(qiáng)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，組間比較采用χ2檢驗(yàn)及Fisher確切概率法，相關(guān)性分析采用Spearman等級(jí)相關(guān)分析，結(jié)果均以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 FHIT和β-Catenin在胃癌和胃良性病變組織中的表達(dá) 50例胃癌標(biāo)本中，F(xiàn)HIT陽性表達(dá)11例，陽性率22.00%；β-Catenin陽性表達(dá)42例，陽性率84.00%。10例良性病變胃組織標(biāo)本中FHIT全部陽性表達(dá)，β-Catenin全部陰性表達(dá)。兩組標(biāo)本中的FHIT和β-Catenin表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

2.2 FHIT和β-Catenin表達(dá)與胃癌臨床病理特征的關(guān)系 FHIT在胃癌組織中表達(dá)缺失，與浸潤(rùn)深度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移關(guān)系密切（P<0.05），與患者的性別、年齡、腫瘤大小及分化程度無關(guān)（P>0.05）。β-Catenin在胃癌組織中高表達(dá)與浸潤(rùn)深度、腫瘤大小及分化程度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移關(guān)系密切（P<0.05），與患者的性別、年齡無關(guān)（P>0.05）。見表2。

2.3 胃癌組織中FHIT和β-Catenin表達(dá)的相關(guān)性 由表3可見，50例胃癌組織中，Spearman 等級(jí)相關(guān)分析顯示FHIT和β-Catenin表達(dá)呈負(fù)相關(guān)（r=-0.358，P=0.011）。

3 討論

FHIT基因是于1996年首次克隆出的一個(gè)新的候選抑癌基因，其定位于染色體3p14.2，跨越人類基因組中一個(gè)最普遍的脆性位點(diǎn)FRA3B及腎細(xì)胞癌相關(guān)性斷裂點(diǎn)t。大量研究表明，F(xiàn)HIT基因在胃癌等腫瘤中均存在異常。本實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)HIT在胃癌組織中表達(dá)缺失，與浸潤(rùn)深度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移關(guān)系密切，與患者的性別、年齡、腫瘤大小及分化程度無關(guān)。Wnt信號(hào)傳導(dǎo)通路與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，而β-catenin是這條通路中的核心因子，介導(dǎo)細(xì)胞與細(xì)胞之間的黏附^［5］。當(dāng)Wnt信號(hào)蛋白與細(xì)胞膜上的受體蛋白結(jié)合后活化

細(xì)胞內(nèi)蛋白Dishevelled（Dsh），Dsh的活化抑制了糖原合成酶激酶3β（glycogen synthase kinase 3β， GSK-3β）的功能，使其不能磷酸化β-catenin，抑制了的β-catenin蛋白降解導(dǎo)致細(xì)胞漿內(nèi)游離的β-catenin增加，促進(jìn)下游靶基因的表達(dá)。研究表明，β-Catenin在胃癌組織中高表達(dá)與浸潤(rùn)深度、腫瘤大小及分化程度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移關(guān)系密切，與患者的性別、年齡無關(guān)。

兩者在胃癌中的相關(guān)性尚未見報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)中50例胃癌組織中有FHIT大量表達(dá)缺失，同時(shí)β-catenin高表達(dá)，呈明顯的負(fù)相關(guān)（r=-0.358，P=0.011），提示兩者在胃癌的發(fā)生發(fā)展中可能存在重要的協(xié)同作用，兩者的聯(lián)合檢測(cè)可能對(duì)胃癌的診治及預(yù)后有重要意義，可能會(huì)成為胃癌的靶向治療的新目標(biāo)，還需進(jìn)一步的研究來探討兩基因間的具體作用機(jī)制。

參 考 文 獻(xiàn)

［1］ Lee YC， Wu CT， Shih JY， et al. Frequent allelic deletion at the FHIT locus assosiate with p53 overexpression in squamous cell carcinoma subtype of Taiwanese non-small-cell lung cancers ［J］. Br J Cancer，2004，90(12):2378-2383.

［2］ Pekarsky Y， Palamarchuk A， Huebner K， et al. FHIT as tumou supperssor: mechanisms and therapeutic opportunitiesp［J］. Cancer Biol Ther，2002，1(3):232-236.

［3］ Kikuchi A. Regulation of beta-catenin signaling in the Wnt pathway［J］. Biochem Biophys Res Commun，2000，268(2):243.

［4］ Hao XP， Willis JE， Pretlow TG， et al. Loss of fragile histidine triad expression in colorectal carcinomas and prem alignant lesions［J］. Cancer Res，2000，60(1):18-21.

［5］ Karim R， Tse G， Putti T， et al. The significance of the Wnt pathway in the pathology of human cancers［J］. Pathology，2004，36:120-128.

（收稿日期：2011-10-21）

（本文編輯：王宇）