蛋白芯片檢測肺炎支原體與膠體金法檢測肺炎支原體方法的比較

摘 要 目的：探討蛋白芯片檢測肺炎支原體與膠體金法檢測肺炎支原體方法的特異性與敏感性。方法：收集疑似肺炎支原體感染的患兒96例進行生物芯片和膠體金法檢測肺炎支原體進行比較。結果：兩種方法檢測96例患兒，臨床診斷肺炎支原體感染患者72例，蛋白芯片法49例陽性，陽性率51.0%，診斷符合率68.01%，膠體金法23例陽性，陽性率24.0%，診斷符合率31.9%，蛋白芯片法檢測肺炎支原體感染的特異性和敏感性均高于膠體金法，兩種方法比較差異有顯著性(P＜0.05)。結論：蛋白芯片法檢測肺炎支原體感染的特異性和敏感性均高于膠體金法。

關鍵詞 蛋白芯片 膠體金法 肺炎支原體 特異性 敏感性

隨著DNA芯片技術的不斷成熟，推動了蛋白質功能的研究［1，2］，蛋白芯片技術隨之發展壯大。蛋白芯片是近年來在生命科學領域中迅速發展起來的一項高新技術，蛋白質結構和構象變化均能引起活性或功能的改變，肺炎支原體(MP)是呼吸道感染性疾病的重要病原體之一，及時、有效地進行MP的實驗室診斷十分重要，為探討蛋白芯片檢測肺炎支原體與膠體金法檢測肺炎支原體臨床意義，收集疑似MP感染的患兒96例進行生物芯片和膠體金法檢測肺炎支原體進行比較，現報告如下。

資料與方法

2010年4月～2011年4月收治疑似肺炎支原體感染患兒96例，男56例，女40例，年齡6天～11歲，臨床確診為肺炎支原體感染的患兒72例。

主要儀器與試劑：生物微矩陣(芯片)分析儀，蛋白芯片技術檢測肺炎支原體抗體，肺炎支原體抗體檢測試劑盒(膠體金法)。實驗原理：①膠體金法：滅活的MP菌體純化抗原致敏硝酸纖維素膜，同時用檸檬酸三鈉還原法制備膠體金顆粒，標記金黃色葡萄球菌蛋白A(SPA)作為探針，利用免疫層析原理研制MP抗體快速檢測膠體金試劑，用于MP肺炎診斷。②蛋白芯片技術的基本原理［3］：是將各種蛋白質有序地固定于固相載體上，這種固相載體常用的材質有云母、硅、以及各種膜片等，有圓形或橢圓形、長條狀等不同形狀，這樣就制成了待檢用的芯片，然后，用標記了特定熒光抗生素體的蛋白質與芯片作用，有吸水或疏水物質、抗體或受體、免疫復合物、與某些陰離子或陽離子的化學基因、酶等，然后洗板，再利用激光共聚焦掃描或熒光掃描儀技術，測定芯片上各點的熒光強度，進行測定各種蛋白質功能的目的。

結 果

兩種方法檢測96例患兒，蛋白質芯片法49例陽性，陽性率51.0%，臨床確診為肺炎支原體感染的患兒72例，診斷符合率68.0%，膠體金法陽性23例，陽性率24.0%，診斷符合率31.9%，蛋白芯片法檢測肺炎支原體感染的特異性和敏感性均高于膠體金法，兩種方法比較差異有顯著性(P＜0.05)。

討 論

近年來肺炎支原體感染率呈逐年上升趨勢，發病年齡趨小，臨床表現多種多樣，很難與其他病原微生物感染相鑒別。蛋白芯片是近年來在生命科學領域中迅速發展起來的一項高新技術，蛋白質結構和構象變化均能引起活性或功能的改變，肺炎支原體是呼吸道感染性疾病的重要病原體之一，因此，及時、有效地進行肺炎支原體感染的實驗室診斷就顯得尤為重要。目前MP感染的實驗室診斷仍然主要依靠血清學試驗，抗MP-IgM是機體受MP感染后最早產生的特異性抗體，于發病后1周左右可檢出［4］，2～4周達到高峰，一般12～16周轉陰。雖然檢測抗MP-IgG雙份血清抗體滴度升高4倍，也可以作為臨床診斷指標，但臨床上取得雙份血清進行檢測的可能性很小。

本組資料顯示，兩種方法檢測96例患兒，蛋白芯片法49例陽性，陽性率51.0%，診斷符合率68.0%，膠體金法陽性23例，陽性率24.0%，診斷符合率31.9%，蛋白芯片法檢測肺炎支原體感染的特異性和敏感性均高于膠體金法，兩種方法比較差異有顯著性(P＜0.05)。

蛋白芯片法檢測肺炎支原體感染具有重復性好、操作簡便、快速等優點［5］，但是，利用蛋白芯片技術對于蛋白質功能的研究仍然存在著種種問題，例如目前大多數來自于cD-NA文庫的克隆體系不能通過正確的閱讀框架編碼蛋白質，將直接影響有關蛋白質功能的研究，因此，蛋白質芯片法檢測肺炎支原體感染的臨床應用價值還需要進一步去探索。

參考文獻

1 孫紅妹.肺炎支原體感染的實驗室診斷［J］.實用兒科臨床雜志，2007，22(4):245-248.

2 Martnez M A，Ruiz M，Zunino E，et al.Detection of Mycoplasma pneumoniae in adult community-acquired pneumonia by PCR andserology［J］.J Med Microbiol，2008，57(12):1491-1495.

3 Kashyap B，Kumar S，Sethi G R，et al.Comparison of PCR，culture serological tests for the diagnosis of Mycoplasma pneumoniae in community-acquired lower respiratory tract infections in children［J］.Indian J Med Res，2008，128(2):134-139.

4 孫煒，趙勇.四種抗肺炎支原體抗體檢測方法應用比較［J］.醫學檢驗與臨床，2007，18(5):34-35.

5 夏幫世，吳金華.Kappa一致性檢驗在檢驗醫學研究中的應用［J］.中華檢驗醫學雜志，2006，29(1):83-84.